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1、1 . 免疫( immunity) 免疫( immune)是机体识别“自己”、排除“异己(非己)”过程中所产生的生物学效应的总和。正常情况下免疫是维持内环境稳定的一种生理性防御功能。2 .免疫防御( immune defence )主要指机体对外来微生物及其毒素的免疫保护作用应答过强或持续过长导致超敏反应;应答过低或缺如导致免疫缺陷病。3 . 免疫监视( immune surveillance) * 指免疫系统识别畸变和突变细胞, 并将其清除的功能;* 免疫监视功能异常导致肿瘤发生或持续病毒感染。4 . 免疫自稳( immune homeostasis )* 免疫系统通过调节网络实现免疫系统功
2、能的相对稳定;* 自稳机制发生异常(应答过强或过弱) 导致自身免疫病。1 . 单克隆抗体由单一B 细胞克隆产生的高度均一( 属同一类、亚类、型别)、单一特异性(仅针对特定抗原表位) 的抗体, 称为单克隆抗体。通常采用小鼠B 细胞与骨髓瘤细胞形成的杂交瘤( hybridoma ) 技术来制备2 . 多克隆抗体用普通抗原免疫动物所获得的抗体, 由于抗原含多种抗原决定簇, 同时刺激多个B 细胞克隆产生抗体, 所获得的抗体是包括多种特异性抗体的混合物, 此为多克隆抗体。3 . 基因工程抗体借助DNA 重组技术和蛋白质工程技术, 按人们的意愿在基因水平上对Ig 进行切割、拼接或修饰, 重新组装成为新型抗
3、体分子, 称为基因工程抗体。4 . Ig 类别转换Ig类型转换(class switch）或称同种型转换(isotype switch)是指一个B淋巴细胞克隆在分化过程中VH基因片段保持不变，而发生CH基因节段的重排，比较CH基因片段重排后基因编码的产物， V区相同而C区不同，即识别抗原特异性不变,而类或亚类发生改变。 这种类型转换在无明显诱因下可自发产生。5 . Ig 独特型免疫球蛋白独特型是在不同个体的抗体上的等位基因。6 . HVR/ CDR 7 . 抗体具有抗原结合部位，能与抗原分子上相应表位发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。8 . ADCC9 . 调理作用1 . 补体存在于人和脊
4、椎动物血清、组织液中的一组球蛋白, 经活化后具有酶活性, 发现时被认为是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条件, 故称为补体( complement , C)2 . 补体旁路激活途径3 . 补体经典激活途径由C1 开始的补体激活途径; 其激活物主要是免疫复合物( immune complex , IC)。1 . 识别阶段C1 (C1q) 与IC 中Ig 补体结合位点结合 C1 脂酶形成ICC1q C1q C1r C1s(具有脂酶活性)2 . 活化阶段C1s 作用于后续成分, 至形成C3 转化酶和C5 转化酶。C4 C4a + C4bC1s C 4b 2b(C3 转化酶) C 4b2b3b(C5 转化
5、酶)C2 C2a + C2b C3 C3b + C3a4 . MBL 激活途径MBL 途径与经典途径过程基本类似, 但激活物质是细菌表面甘露糖残基, 激活过程始于细菌表面甘露糖残基与MBL 结合。MBL 与细菌表面甘露糖残基结合, 再与丝氨酸蛋白酶结合,形成MBL 相关的丝氨酸蛋白酶( MBL-associated serine protease,MASP-1、-2) 。MASP 与活化的C1q 具有同样的生物学活性, 可水解C4 和C2 分子, 继而形成C3 转化酶, 其后过程与经典途径相同。1 . 细胞因子是由细胞分泌、具有生物活性的小分子多肽物质的统称。2 . 趋化因子趋化性细胞因子(
6、chemokine ) 是对血细胞具有趋化、激活作用的因子。3 . 集落刺激因子集落刺激因子( colony stimulating factor , CSF) 是刺激不同造血干细胞增殖、分化并使之在半固体培养基中形成集落的因子。它包括GM/ G/ M-CSF、EPO、SCF 和TPO。4 . 白细胞介素白细胞介素( interleukin , IL) 是介导白细胞或其他细胞间相互作用的CK5 . 干扰素干扰素( inteferon , IFN ) 是干扰病毒复制的CK, 可分为、三种。* IFN-/ (型)主要由白细胞、成纤维细胞、病毒感染细胞产生。* IFN-(型)主要由活化T 细胞、NK
7、 细胞产生。6 . 肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子( tumor necrosis factor , TNF ) 是对某些肿瘤具有胞毒活性的因子, 包括TNF- 和TNF-三、名词解释1 . MHC 复合体主要组织相容性复合体(MHC) 是一组紧密连锁的基因群,其编码的产物在启动特异性免疫应答中起重要作用, 也决定个体的组织相容性。2 . HLA 抗原HLA是具有高度多态性的同种异体抗原，其化学本质为一类糖蛋白，由一条重链(被糖基化的)和一条轻链非共价结合而成。其肽链的氨基端向外(约占整个分子的3/4)，羧基端穿入细胞质，中间疏水部分在胞膜中。HLA按其分布和功能分为类抗原和类抗原。三、名词解释1
8、. 酶联免疫吸附试验( ELISA)酶联免疫吸附试验( ELISA) 将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面, 使抗原抗体反应在固相表面上进行, 用洗涤方法使固相上的抗原抗体复合物与液相中游离抗原或抗体分开。该技术用于抗原或抗体的定量检测。2 . 放射免疫分析法(RIA)放射免疫分析法( RIA) 用放射性核素标记抗原或抗体进行的免疫学检测。RLA 常用于微量抗原或抗体的定量检测。3 . 免疫荧光技术免疫荧光技术 用荧光素与抗体连接成荧光抗体,再与待检标本中的抗原反应, 在荧光显微镜下观察抗原抗体反应的部位。该技术用于抗原的定位检测。4 . 凝集反应凝集反应 颗粒性抗原(如细菌、细胞等)与相应的抗
9、体结合后形成肉眼可见的凝集块, 该类反应称为凝集反应。5 . 直接凝集反应直接凝集反应 将细菌或红细胞与相应抗体直接反应,出现细菌或红细胞凝集的现象。6 . 间接凝集反应间接凝集反应 将可溶性抗原包被(结合)在无关载体颗粒表面, 再与相应抗体反应后, 出现载体颗粒凝集的现象。7 . 对流免疫电泳对流免疫电泳 在琼脂糖电泳凝胶的正负极端打孔,并分别加入抗体和抗原, 在电场的作用下, 抗体和抗原作定向扩散。其中抗体由于电渗作用, 扩散方向为正极负极, 而抗原则由于电泳作用, 扩散方向为负极正极, 在二者比例适当的位置出现沉淀线。对流免疫电泳用于抗原或抗体的定性检测。四、问答题1 . 从外周血分离淋
10、巴细胞的方法有哪些?1 . (1 ) 依靠淋巴细胞物理特征的分离方法有以下几种:葡聚糖-泛影葡胺( Ficoll)等密度梯度离心法 根据淋巴细胞的比重将其与其他血细胞成分分离。尼龙绵分离法 根据B 淋巴细胞粘附于尼龙棉的特性, 将B 细胞与T 细胞分开。(2 ) 依靠表面标记的分离方法:E 花环分离法 T 细胞表面的CD2 是绵羊红细胞(SRBC) 受体,能使T 细胞与SRBC 结合形成E 花环。因花环形成后比重变大, 采用密度梯度离心即可将T 细胞从其他淋巴细胞中分离出来。免疫磁珠分离法 将某种表面标记特异性抗体包被在磁性微珠上, 与磁珠交联的抗体能够特异性结合具有这种表面标记的细胞, 然后
11、用强磁场可将具有这种表面标记的细胞分离出来。流式细胞术分离法 利用各种荧光素标记的表面标记特异性抗体, 使不同表面标记的细胞结合上不同的荧光素, 借助荧光活化细胞分选仪( FACS) 将各种细胞分离开来。2 . 简述细胞毒试验的原理。2 . (1 ) 对于可溶性物质(如抗体、补体、肿瘤坏死因子等)导致的靶细胞破坏, 可以采用简单的染色法来进行检测。原理是当靶细胞破坏时, 其胞膜完整性被破坏, 当用染料(如台盼蓝、酚红、结晶紫等)染色时, 损伤的细胞浆将会着色, 而未受损的靶细胞因胞膜完整, 会拒染。结合光密度的测定, 能够进行定量检测。(2 ) 对于效应细胞(如CTL、NK 等)对靶细胞的损伤
12、, 可以采用同位素释放法、酶释放法来进行测定。其原理如下:5 1Cr 释放法: 用Na5 12 CrO4 标记靶细胞, 若效应细胞损伤靶细胞, 5 1Cr 将释放进入上清液, 检测上清液中的放射活性, 即可计算出效应细胞对靶细胞的杀伤活性。酶释放法: 靶细胞内具有多种酶, 当靶细胞受损时, 这些酶将从胞内释放至上清液, 通过上清液中酶活性的检测, 可以计算出效应细胞杀伤靶细胞的活性。最常检测的酶是乳酸脱氢酶。(3) 细胞凋亡检测法: 某些因素能够诱导靶细胞发生凋亡, 这也是免疫应答杀伤靶细胞的一种形式。凋亡是细胞内源性DNA 酶被激活, 将染色体DNA 酶解, 使细胞发生程序性死亡。可以采用D
13、NA ladder 法、TUNEL 法等方法来检测靶细胞的凋亡事件, 从而评估对靶细胞杀伤的效应。3 . 简述细胞因子的检测原理。3 . 细胞因子检测可以分为三类。(1 ) 生物活性检测法: 根据细胞因子的生物学活性来检测其含量。该方法包括细胞增殖试验( 如IL-2 检测)、细胞毒试验( 如TNF 检测) 、保护细胞免受病毒致病( 如干扰素检测)等。(2 ) 免疫学检测法: 用抗细胞因子抗体进行抗原抗体反应, 根据抗原抗体反应检测的基本原理, 对细胞因子的含量进行测定。该法包括ELISA、RIA 和免疫印迹等。(3 ) 分子生物学检测法: 根据细胞因子基因的核苷酸序列, 设计相应引物, 借助反
14、转录PCR 测定待测细胞中该细胞因子mRNA 的含量, 从而评估该细胞因子基因表达的情况。四、问答题1 . 何为HLA 基因复合体的多基因性和多态性? 试述其生物学意义。1 . HLA 复合体的多基因性是指HLA 复合体中,结构和功能相似的基因座位有多个。多态性是指随机婚配的群体中, 同一基因座位上有众多的等位基因, 可编码两种以上产物。HLA 复合体是目前已知人类基因组中最复杂的多态性系统。因为HLA 复合体中基因座位众多, 每一基因座均有众多复等位基因, 各座位等位基因随机组合, 导致HLA 基因型的极端复杂性和表型的极端多样性。人是二倍体生物, HLA 复合体中的等位基因均为共显性, 从
15、而增加了HLA 表型的多样性。HLA 表型的多样性一方面有利于群体适应复杂的环境改变, 从而维持种群的生存。因为MHC 的主要生物学功能是提呈抗原, 启动特异性免疫应答, 其多样性赋予群体( 多态性) 和个体(多基因性) 提呈抗原的多样性。另一方面在群体中难以寻找到HLA 型别完全一致的个体, 可用于个体识别, 但不利于寻找同种移植物供者。2 . 比较HLA 类和HLA 类分子在结构、组织分布和提呈抗原方面的特点。3 . 试述MHC 的主要生物学功能及其与临床医学的关系。(1 )MHC的主要生物学功能是抗原提呈。MHC分子的抗原结合凹槽选择性结合抗原肽, 形成MHC 分子-抗原肽复合物, 以MHC 限制性的方式供T 细胞识别, 启动特异性免疫应答。其中MHC 类分子提呈的抗原肽由CD8 + T 细胞识别,MHC
