Countstar-细胞计数仪操作手册

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1、Countstar细胞计数仪操作手册计数仪的标准操作程序 和 细胞计数和活率检测标准操作程序一、 启动Cedex XS 系统1. 打开计数仪：按下计数仪上的ON/OFF按钮，按钮亮起蓝色光表示仪器已打开；2. 打开Cedex XS 控制软件： 打开配套电脑，进入Windows操作系统； 双击桌面上的Cedex XS 图标，进入Cedex XS 控制中心；3. 调节白平衡：首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。 把样品板支架拉出； 点击Cedex XS 控制中心中的HWM键，打开硬件管理对话框； 点击WHITE BALANCE键进行调节，结果将自动保存； 调节完毕后关闭对话框。

2、二、 细胞计数与活性测定1. 样品制备 用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5106/ml； 使用0.2%台盼蓝染色（一般为10l、1：1）：台盼蓝对血清蛋白亲和力更强，若大量血清蛋白导致图像背景过暗，可以将样品离心，用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数； 将细胞悬液充分混匀； 用移液枪取细胞悬液加入样品板，每槽10l；可以一次测定八槽，也可测定单槽。2. 进样：样品板有八个槽，一次可测定四个样品槽。 拉出样品板支架； 加有样品方向朝里，将样品板放上支架； 将支架推入计数仪，有少许卡扣感表示已就位：样品槽位置指示灯表示样品测定进程。三、 软件设置：1. 打开测定界面：在Cedex XS

3、 控制中心点击MEASURE键，进入测定界面；2. 设置样品参数： 在样品参数栏输入样品名（Reactor ID），可在下拉栏选择或手动输入，最多可输入21个字符； 输入样品编号（Sample ID），最多21个字符；若样品名已存在，软件将自动延续样品编号，也可手动重新输入编号； 软件将自动记录日期和时间，表明样品测定的实际时间； 点击MI键，出现进样体积对话框； 输入参数：样品量（Sample Volume）、台盼蓝用量（Dye Volume）、稀释剂用量（Diluent Volume）； 系统将自动计算稀释比例等，可以手动输入注释（Comments）。3. 设置测定与分析参数： 在分析参数

4、栏选择需要的精度水平（Precision）：精度水平表示单次测定样品数，最多8个； 选择细胞类型，默认的细胞类型有：标准大小细胞直径约12-14m；可识别对象；小细胞直径约8m； 系统自动添加系统名和测定时间。四、 开始测定 点击START MEASUREMENT键； 测定多个样品时，在弹出对话框后将样品板支架推进一格，点击确定自动开始测定程序； 重复上一步骤测定其他样品； 若测定样品多于四个，可将支架抽出后样品板调转方向重新插入进行上述测定程序； 全部测定结束后关闭对话框。五、 计数结果1. 在测定界面获得结果测定程序完成后，结果在测定界面的数据栏（Result Data）显示，数据栏有两个

5、表格：第一个表格显示总细胞数，第二个表格显示单次测定中每个样品室的测定结果。两个表中分别列出以下参数：l Viable Cell Conc.: 活细胞浓度 105/mLl Total Cell Conc.: 总细胞浓度 105/mLl Viability (%): 细胞总数中活细胞的百分比l Total Cell Count: 测定总细胞数l Avg Compactness: 活细胞与理想状态细胞形状的平均变异程度（1表示细胞形状均一）l Avg Diameter: 测定活细胞平均直径 ml Aggregate Rate (%):成团细胞占总细胞数的比值l Dead Cell Conc.: 死

6、细胞浓度 105/mLl Viable Cell Count: 测定活细胞数l Dead Cell Count: 测定死细胞数l Total Object Count: 全部测定数l Total Object Conc.: 总浓度 105/mLl Avg Object Diameter: 测定总群体平均直径 ml Avg Object Compactness: 所有测定群体与理想状态细胞形状的平均变异程度。在单个样品结果表中，会有三项列在表头：l Image No.: 图像编号l Valid: 表示图像质量是否能够达到分析要求l Excluded: 复选框以排除或包括该样品在总结果表中的显示2

7、. 在柱形图中看结果：此结果不包括已经由上述复选框选择排除的计数结果 在测定界面点击HISTOGRAMS键，打开柱形图对话框； 可选择以下项目：l 成团细胞柱形图l 细胞直径柱形图l 细胞形状均一度柱形图l 总群直径柱形图六、 查看图像单副图像：在测定界面的右侧显示的是选定的单个样品测定结果所对应的图像；多幅图像：在图像显示区点击VIEW IMAGES键出现图像列表，可显示单次测定的多个样品。1. 在图像框查看图像图像框提供放大图像，系统自动分析活细胞与死细胞，并用绿色圈和红色圈分别标出，还可以使用下列功能：l 双击图像可打开大图，调节对比、亮度和焦距；l 显示或隐藏细胞的圈标记；l 浏览前后

8、样品的图像；l 按住左键圈定可将选定图像放大或自定义尺寸，右键点击图像进行保存或复制。 七、 系统优化：调节白平衡若图像亮度不均衡，则需调节白平衡，影响图像亮度的调节。 把载物支架拉出； 点击Cedex XS 控制中心中的HWM键，打开硬件管理对话框； 点击WHITE BALANCE键进行调节，结果将自动保存； 调节完毕后关闭对话框。八、 结果列表1. 点击Cedex XS 控制中心中的LIST键，或在Measurements菜单中选择Measurement List，可选择以下功能：l 查找结果l 浏览总体的测定数据l 删除结果l 打印报告l 结果输出保存为文件l 开始新测定l 查看测定过程l 重新测定2. 查找结果可以通过以下方式：选定后点击FIND键l 样品处理时间l 测定时间l 样品名l 样品编号l 系统名l 存档数据/全部数据l 数据组l 细胞类型九、 关机 顺序为：Cedex XS 控制中心（软件）配套电脑计数仪。