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1、多糖含量测定方法（总2页）-本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可-内页可以根据需求调整合适字体及大小-粗多糖中的总糖含量使用苯酚-硫酸法进行测定，还原糖用3,5-二硝基水 杨酸（DNS）法测定，多糖含量二总糖-还原糖。1、总糖含量测定实验原理：多糖在硫酸作用下，先水解成单糖，并脱水生成糖醛衍生物，与苯酚生成 橙黄色溶液，在490nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。试剂：浓硫酸（分析纯）、5%苯酚溶液（分析纯）、标准葡萄糖。操作步骤： 制作标准曲线：准确称取105 C烘干至恒重的葡萄糖50mg于500ml容 量瓶中配成mg/ml的标准溶液，用蒸馏水分别配成0、mg/ml1 ml 标准
2、液分别加入5%苯酚溶液1 ml,并迅速加入浓硫酸5 ml ,静置10 min。 摇匀，30C放置30 mi n后于490nm测定0D值，以葡萄糖含量为横坐标，0D值 为纵坐标，制作得到标准曲线。 样品含量测定：吸取样品液，按照上述步骤操作测定0D490,并代入标 准曲线计算样品的总糖含量。2、还原糖含量实验原理碱性条件下，DNS可与还原糖反应生成3-氨基-5-硝基水杨酸。此物质在煮 沸条件下成棕红色，且颜色深浅在一定范围内与还原糖含量成线性关系。据此 可通过测定0D值确定还原糖含量。试剂及配制：浓度为1mg/ml的葡萄糖标准溶液。DNS显色液：称取DNS溶于少量蒸馏水 中并转移至500ml容量瓶中，加入2mol/L的NaOH溶液，再加入的丙三醇，摇 匀，加蒸馏水定容至500ml，摇匀。操作步骤 标准曲线制作：在6支试管中分别加入1mg/ml葡萄糖标准溶液，补蒸馏水至，然后加入DNS试剂，充分混匀。置于沸水浴中煮 沸5mi n,然后迅速流水冷却，并分别向试管中加入4ml蒸馏水，混匀。在 540nm处读0D值。以葡萄糖浓度（Hg/ml ）为横坐标，以0D值为纵坐标制作 标准曲线，得到其线性回归方程。样品含量测定：吸取样品液，按照上述步骤操作测定0D值，并代入 回归方程中计算样品中的还原糖含量。
