病理切片的特殊染色方法

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1、1.Van Gieson苦味酸和酸性品红法【染色方法】(1)中性甲醛固定组织,石蜡切片;(2)组织切片脱蜡至水;(3)用Van Gieson液染15分钟;(4)倾去染液,直接用95乙醇分化和脱水;(5)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。【结果】胶原纤维呈红色,肌纤维、胞质及红细胞呈黄色。2.Masson氏结缔组织三合染色法【染色方法】(1)石蜡切片厚6m,脱蜡至水;(2)0.2冰醋酸水溶液浸泡片刻;(3)Masson氏染色液中5分钟或更长时间;(4)0.2冰醋酸水溶液浸泡片刻;(5)5磷钨酸水溶液23分钟,再入0.2冰醋酸水溶液浸洗(6)投入淡绿、冰醋酸水溶液浸染5分钟或更长时间;(7)

2、再入0.2冰醋酸水溶液浸洗片刻;(8)脱水、透明和封固。【结果】胞浆和神经胶质纤维染红色,胶原纤维染绿色。【染色方法】(1)石蜡切片、脱蜡至水;(2)0.25高锰酸钾液3分钟;(3)蒸馏水洗2次;(4)1草酸漂白即可;(5)蒸馏水洗2次;(6)2.5铁明矾水溶液媒染510分钟,蒸馏水洗多次;(7)二氨氢氧化银浸染1分钟,蒸馏水洗3次;(8)10甲醛液还原2分钟,蒸馏水洗3次;(9)0.2氯化金液调色12分钟,蒸馏水洗3次;(10)5硫代硫酸钠固定5分钟;(11)蒸馏水洗,需要时复染;(12)水洗、脱水、透明和封固。【结果】网状维呈黑色,其他组织呈复染的颜色。显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法【

3、染色方法】(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水;(2)切片入70乙醇中洗2分钟;(3)将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染0.52小时;(4)直接入95乙醇中分色数秒钟;(5)浸入蒸馏水洗2分钟;(6)用丽春红S液滴染切片5分钟;(7)直接用无水乙醇冲洗多余染色液2次;(8)将切片在空气中或冷风干燥;(9)二甲苯透明,中性树胶封固。【结果】弹性纤维呈蓝绿色,胶原纤维呈红色,背景呈淡黄色。【染色方法】(1)冰冻切片厚度815m;(2)Harris苏木素,染约1分钟;(3)自来水洗后,用0.5盐酸乙醇分化,再水洗直至胞核返蓝为止;(4)蒸馏水洗后移入70乙醇内浸洗一下;(5)浸入苏丹III染

4、液中约30分钟或更长时间(如果置于56温箱中可适当缩短时间);(6)在70乙醇分化数秒钟;(7)待切片在空气中稍凉干或用冷风机吹干;(8)及时用明胶甘油封片。【结果】脂肪呈橘红色,脂肪酸不着色,胞核淡蓝色。高碘酸Schiff(Periodic acid Schiff,PAS)染色法【染色方法】(1)切片脱蜡至蒸馏水;(2)浸入高碘酸氧化液中1020分钟;(3)蒸馏水洗2次;(4)Schiff液染色1030分钟;(5)流水冲洗5分钟;(6)用苏木素染细胞核35分钟;(7)在盐酸酒精中分化,自来水洗至细胞核变蓝为止;(8)脱水、透明和封固。【结果】糖原和粘蛋白呈紫红色,细胞核染蓝色,霉菌也呈紫红色

5、等。【染色方法】(1)切片入二甲苯,后递次向下直到入水;(2)3冰醋酸溶液3分钟;(3)在奥辛兰溶液中染5分钟;(4)入3冰醋酸3分钟,蒸馏水洗(3次);(5)用1过碘酸处理10分钟,蒸馏水洗;(6)入Schiff液1030分钟;(7)流动自来水洗10分钟;(8)逐级酒精脱水,二甲苯透明;(9)中性树胶封固。【结果】酸性粘多糖染兰色;中性粘蛋白染品红色;中性和酸性粘蛋白混合物染紫色。Mallory磷钨酸苏木素染色法PTAH【染色方法】(1)切片脱蜡至水;(2)在酸性高锰酸钾液中氧化510分钟;(3)自来水充分洗,蒸馏水洗2次;(4)用1草酸液漂白2分钟;(5)自来水洗,蒸馏水洗2次;(6)浸入

6、MalloryPTAH液中1248小时;(7)直接用95乙醇分化;(8)无水乙醇急速脱水,二甲苯透明和树胶封固。【结果】胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维素、横纹肌等均呈蓝色;胶质纤维、网状纤维、软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色;粗弹力纤维有时被染成微紫色;有缺血缺氧早期病变的心肌呈紫蓝色或棕黄色。【染色方法】(1)石蜡切片,脱蜡至水;(2)在1刚果红水溶液中1小时或更长时间;(3)投入饱和碳酸锂水溶液中15秒钟;(4)用80酒精分化,直至无多余燃料溜下为止;(5)水洗后用苏木素进行核染色;(6)等干后进行二甲苯透明和树胶封固。【结果】淀粉样物质呈红色,细胞核呈兰色。【染色方法】(1)中性甲醛固

7、定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水;(2)0.2molL醋酸缓冲液洗2次;(3)将切片置入1硝酸银液内1小时左右(温箱56);(4)直接把切片取出,立即浸入显影液内23分钟;(5)将切片浸入56蒸馏水中洗12分钟;(6)蒸馏水洗1次;(7)无水乙醇脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。【结果】胃幽门弯曲菌呈棕黑色或黑色,背景呈淡黄色。【染色方法】(1)石蜡切片厚6m,脱蜡至水;(2)用1甲苯胺蓝水溶液置于5060温箱内浸染2040分钟;(3)蒸馏水稍洗;(4)95乙醇迅速分化;(5)无水乙醇脱水,二甲笨透明,中性树胶封固。【结果】尼氏小体紫蓝色,胞核棕红色。【染色方法】(1)石蜡切片厚6m,脱蜡至水;(2)投入新鲜配置的20盐酸和10亚铁氰化钾等量混合液(用前过滤)中30分钟,必要时可延长时间;(3)蒸馏水洗;(4)在0.5的碱性品红(溶剂为50酒精)进行1分钟对比染色;(5)在95酒精中分化后晾干,透明,封固。【结果】含铁血黄素呈蓝色,血棕色素呈红色。【染色方法】(1)石蜡切片,脱蜡至水;(2)投入硝酸银染色液中,并置于暗处1218小时;(3)蒸馏水洗2分钟;(4)以0.2氯化金水溶液增色510分钟;(5)蒸馏水洗;(6)投入5硫代硫酸钠水溶液2分钟;(7)自来水洗;(8)如需复染,可用苏木素伊红染色法;(9)酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。【结果】黑色素呈黑色。

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