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1、温度胁迫对植物（小麦幼苗）膜系统的伤害摘要：本实验采用经高温（40C）,常温，低温（4C ）处理后的小麦幼苗作为实验材料来 测定其经测定发现：高温、低温对植株的伤害率相近，但都高于常温。关键词： 温度胁迫 小麦幼苗 膜系统伤害引言：本实验通过电导率仪法测定小麦幼苗的抗逆性，使得进一步认识到细胞膜 系统的结构和功能，而植物细胞膜脂氧化作用的测定，加深了对细胞膜脂氧化作 用的认识，并掌握了丙二醛测定的原理和技术。电导率仪法的测定原理在于植物 受到逆境环境伤害时膜的功能受损或结构遭到破坏而透性增大，细胞内的水溶性 物质外渗到无离子水中，形成外液，通过测定外液的导电能力即可比较不同逆境 下植物的抗逆性
2、强弱；双组分分光光度计法测定MDA含量则在于MDA为植物在逆 境伤害时发生过氧化作用的产物之一，通过测定MDA的含量即可反应出不同逆境 伤害下植物细胞膜脂的过氧化作用。实验材料：分别在高温、常温、低温条件下处理的小麦幼苗设备与试剂：研钵 剪刀 石英砂 电子天平 10ML 离心管TDL-5000B型低速多管离心机 试管10mL和2mL移液管 10%三氯乙酸（TCA）1.6%硫代巴比妥酸（TBA）方法步骤：1.电导法（1）处理 分别取3种温度下处理过的小麦幼苗各10株，除去幼苗上残留的胚 乳。先用自来水冲洗，再用无离子水漂洗数次，以除去伤口上的物质。分别放入 刻度试管中，在每个试管中各加20ml去
3、离子水，在室温下平衡20min,其间要 不断摇动，使外渗物均匀分布在溶液中。（2）测定 平衡结束后，摇匀，将电极插入溶液中（不要贴着材料和试管壁） 测电导率。（3）电导率的再测定 将装有样品的3支试管置沸水浴煮沸lOmin,以杀死细 胞，使其质膜差别透性丧失，冷却至室温后，以蒸馏水补加到原来的数量。然后 取出幼苗,摇匀后再测一次电导率。（ 4）计算 记录数据,并根据一下公式计算伤害率：伤害率二处理电导率/煮沸电导率* 100%2.双组分分光光度计法测定 MDA 含量（ 1 ） MDA 的提取：各称取3种温度下处理过的小麦叶片lg,剪碎后放入研钵中，加入2mL 10%TCA 和少量石英砂，研磨至
4、匀浆，再加8 mL TCA，多次冲洗研钵，转入10 mL离心 管，匀浆以3000g离心lOmin，上清液待用。（ 2）显色反应和测定：吸取离心的上清液4mL （对照加4mL蒸馏水），加入4mL 0.6%TBA溶液混匀，置 于沸水浴中15min，迅速用冷水冷却后以3000g离心lOmin，取上清液测定其在 532nm、600nm 和 450nm 波长下的消光度。（3）计算 记录试验数据，并根据公式计算MDA的含量：MDA 含量 m （”mol/g） =6.45 （A532-A600） -0.56*A450*提取液总体积（ml） *反应液总体积（ml） /鲜材料质量（g） *参加反应的提取液体积（
5、ml） 实验结果：电导率法测定活体植物根系抗逆性记载表处理电导率（us/cm）伤害率煮死前煮死后40 C6.232.119.31%4 C4.625.418.11%室温3.923.816.39%结果分析与讨论：当细胞受到 40C 或 4C 的逆境条件后，细胞膜差别透性就会改变或丧失，导致细胞内的物质（尤其是电解质）大量外渗，导致组织浸泡液的电导率增大，通过测定外液电导率的变化即可反映出质膜受害程度和植物抗性的强弱。从上表中可以看出，40 C和4 C条件下的伤害率都要比常温下的高。样品在 450nm、532nm、600nm 波长下的消光值处理吸光度值MDA含量A600A532A450(umol/g
6、)40 C0.0230.2240.24023.24 C0.0330.2400.1419.7室温0.0590.1530.2349.6MDA含量40C4C常温口 MDA含量结果分析与讨论：植物器官在逆境下遭受伤害时，往往发生膜脂过氧化作用。其 丙二醛的含量应高于常温，根据表格中的数据高温和低温时的 MDA 含量均高于常 温时的含量，故本实验结果相对准确。实验讨论： 本实验通过电导率法测定活体植物根系的抗逆性和对植物细胞膜过氧化作用的 测定两组实验来验证温度胁迫对小麦幼苗膜系统的伤害。植物器官在逆境下遭受 伤害时，往往发生膜脂过氧化作用。通过计算得知，经高温和低温处理的小麦幼 苗 MDA 含量大于常温的，说明其膜脂过氧化作用水平高 , 对细胞膜的伤害大。参考文献：植物生理学（萧浪涛 王三根主编）2003 年12 月植物生理学实验技术指导（王三根主编）
