《色谱实验报告》由会员分享，可在线阅读，更多相关《色谱实验报告（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、xb 中南大学学院化学化工学院班级应化0904学号*姓名 *实验日期2012年4月28日指导教师郭方遒GC-MS用于鱼腥草中挥发性成分的分析一、实验目的1. 优化气相色谱-质谱联用技术分离条件。2. 学会质谱定性和总体积积分面积归一化法定量方法。二、实验原理气相色谱原理：以氦气为流动相，当它携带的欲分离的混合物流经固定相 时，因混合物中各组分与固定相作用的分配系数的不同，使其滞留时间各有 长短，通过多次分配，使各组分一次先后流出色谱柱从而得到分离。然后根 据流出组分的物化性质，选取合理的检测器，将得到的信号记录下来，得到 色谱曲线，保留时间可用于定性分析，峰高和峰面积可以用于定量分析。质谱原理
2、：利用高能电子轰击化合物分子，得到分子离子以及碎片离子， 由质量分析器记录下来，得到质谱图。可以作为气相色谱的检测器，用于定 性分析。三、仪器与试剂1. 鱼腥草鲜草、十草2. 挥发油提取器3. 恒温加热套4. 气相色谱及气相色谱-质谱仪四、实验步骤1. 气相色谱条件优化岛津2010气进样口以及检测器温度为250C，分别采用等温和程序升温进行分析，并 根据样品出峰情况确相色谱仪，氢火焰离子化检测器，30 mX0.25mmI.D. OV-1弹性石英 毛细管柱，载气N2,定优化的程序升温条件。实验条件包括：柱温程序升温条件、分流比、 流速、进样量。实验所采用的条件为：起始温度60C，保持4分钟，以1
3、0C/min升至250C，维持 10min； 分流进样比为1： 10；流速为1.0mL min-1；进样量为1 L。获得最佳条件后，对所提取的12个样本进行测定，得到其色谱图。2. 气相色谱-质谱分析采用GC-MS以对样品进行定性分析。将岛津2010型气相色谱与岛津2010型质谱相 连接来对挥发性成份进行定性分析。质谱条件：EI源电子轰击能量70 eV；离子源温度200 C；倍增电压0.9 kV；扫描范围40-400 amu；扫描速度0.2 s/scan。3. 定性定量分析在离线工作站利用质谱数据库NIST147谱库等对甲基正壬基酮等部分组分进行定性分 析；由于鱼腥草挥发油中成分复杂，要达到所
4、有组分完全分离非常困难，在所得到的总离 子流图中存在着一些重叠谱峰，有必要对其进行数学分离，本实验中采用化学计量学分辨 算法直观推导式演进特征投影法对重叠谱峰进行解析，得到组分的纯色谱和纯质谱，从而 提高组分定性和定量的准确性，本实验中采用直观推导式演进特征投影法对重叠色谱峰进 行解析。利用对质谱图进行检索。五、实验数据及处理(1)得到GC谱图如下：(xl,000,000)7 nJTIC5 0-4.03 ? 0-1.00 OJA _ _A A A入i i 1 i i 1 i 1 i i 1 7 STO17 sH n1111117 Sn77 s(2)根据质谱峰和保留时间对部分组分定性分析的结果如
5、下:编号保留时间对应物质化学式111.585.gamma.-TerpineneC10H16214.0482-Cyclohexen-1-ol, 1-methyl-4-(1-methylethyl)-, trans-C10H18O314.7182-Cyclohexen-1-ol, 1-methyl-4-(1-methylethyl)-, cis-C10H18O416.326(-)-Terpinen-4-olC10H18O516.698.alpha.-TerpieolC10H18O617.156trans-PiperitolC10H18O719.769Bornyl acetateC12H20O282
6、0.0732-UndecanoneC11H22O922.934Acetic acid, geraniol esterC12H20O21023.0901-Decen-3-oneC10H18O(3)利用归一化法定量各组分含量，如下表所示：归一化法可以用面积归一，也可以对高度进行归一化处理。而且一般不能直接对面 积或高度归一化，还需要乘上一个校正因子。实验给出的结果，在不考虑校正因子时， 对面积和高度归一化处理得到的结果相差较大，因此还需要查找相关校正因子，才可以 得到更为正确的结果。限于条件，这里给出面积归一化法的数据处理处理结果。编号保留时间面积面积百分比19.7001877720.27210.
7、1461527230.22310.6518541641.23411.5632391890.35513.1302436690.35613.17716.01990.23714.06714280052.06814.73111501281.66915.9101481570.211016.3285568706680.391116.71330737664.441217.1823695240.531319.7978347101.201420.10036379235.251522.962621960.601623.1248917631.92六、结果与讨论1. 实验得到的色谱图出现了 16个峰，这说明样品混合物中只有16中组分吗？答：不一定。有些性质非常相近的物质，如手性化合物，在本实验条件下不能够有效的 分离，从而有相差无几的保留时间，所以看到的每个峰都可能是多个化合物的峰叠加在一起 形成的。2. 归一化法有哪些优点和限制条件？答：归一化法有下列有点 和内标法一样当色谱条件变动时对结果的影响不大，但比内标法方便一些。 当分析同系物时，可粗略地认为它们的校正因子是一样的，可把峰面积直接归 一化处理。归一法定量有如下限制 样品有某些组分不能出现色谱峰时不能使用，即必须所有物质都流出色谱柱， 在检测器上要有信号。 样品中有些组分在色谱系统中有部分分解时不能使用。
