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1、院感操作说明一：空气培养：1：采样时间：在消毒处理后、操作前进行采样。采样前应关好门窗，在无人走动的情况下，静止5-15分钟进 行采样。2 :采样高度：与地面垂直高度80 - 150cm。3:采样方法:3.1洁净手术部（室）及其他洁净用房检测时，将90mm直径普通营养琼脂平板置于室内中央 0.8m-1.5m高度，每次采样时间不应超过30min。房间面积10 m2者，每增加10 m2增设一个采样点（此采样 点位置无特殊要求）。3.2未采用洁净技术净化空气的房间检测时，室内面积30m2，设内、中、夕卜对角线上取3点，内外点应距墙 1m处；室内面积30 m2,设四角及中央5点，四角的布点部位应距墙1
2、m。将90mm直径普通营养琼脂平板放 置个采样点，采样高度为距地面0.8m-1.5m ;采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁暴露规定时间后盖上平皿盖 及时送检培养，H类环境暴露15分钟，山类IV类环境暴露5分钟。4:根据上述采集空气平板后，按每个平板都贴不同的条码。二：手部细菌培养：常规监测在手卫生后从事诊疗操作前采样；特殊监测随时采样。采样方法：被检人5指并拢，用浸有无菌生理盐水的棉拭子在双手指曲面从指根到指尖往返涂擦2次（1只手涂 擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应无菌生理盐水 试管内（注：为了避免引起运输过程中的破管、污染此试管中心不
3、予提供，医院可以采用一次性无菌棉签代替试 管），包装完整后送检。三：物体表面培养：（1 ）采样时间：消毒处理后4小时内采样（2 ）采样面积：被采样表面100cm2,取全部表面；被采表面100 cm2，取100cm2o（3 ）采样方法：用5 cm*5 cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规 格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样14个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子入 装10ml采样液的试管内。（注：为了避免引起运输过程中的破管、污染此试管中心不予提供，医院可以采用一 次性无菌棉签代替试管），包装完整后送检。四：压力蒸汽灭菌生物指示剂（嗜热
4、脂肪芽孢杆菌生物指示剂）使用方法：1、在压力蒸汽灭菌生物指示剂表面的标签空白处，用油性笔记录灭菌管理的必要事项。（如：灭菌处理日期、位 置等）2、将压力蒸汽灭菌生物指示剂数支分别横放在灭菌器内不易被灭菌完全的位置。3、灭菌处理后，将压力蒸汽灭菌生物指示剂取出，确认标签上的化学指示剂由蓝色变成黑色后，放置15分钟 以上冷却至室温。4、将完全冷却后的压力蒸汽灭菌生物指示剂包扎固定后送检。5、此项目在送检时需要提供一个阴性对照管注意事项：1、禁止菌片接触任何消毒剂及放射源以免影响抗力，避光保存。2、本品为易碎品，运输过程中注意小心轻放并注意生物安全防护。五：消毒液及污水监测（中和剂的使用方法）项目种
5、类所需添加中和剂采集要求消毒液监 测醇类、酚类消毒剂普通营养肉汤用无菌吸管按无菌操作方法吸取1.0ml被检消毒 液，加入9ml中和剂中混匀。包装后及时送检！含氯、含碘消毒剂， 过氧化物消毒剂0.1%硫代硫酸钠洗必泰、季铵盐类消 毒剂0.3%土温 80 和0.3%卵磷脂醛类消毒剂0.3%甘氨酸污水监测经过氯消毒的污水5%硫代硫酸钠按无菌操作方法取500ml被检污水，加入2.5ml 中和剂混匀，装入容器后（避免洒溢）及时送检。污水监测包括粪大肠、沙门、志贺三种，三种一起 送检需要500ml污水，若单独送检粪大肠100ml， 沙门200ml，志贺200ml，若单独送检，请关注中 和剂比例，需自行计算
6、除氯以外方式消毒 处理的污水无需中和剂附注：1、科室配制空气平板、中和剂时间为周一至周五10点前（不包括节假日），如有需要中和剂，需提前1 天预定。2、所有中和剂需要避光保存。六：血液和腹膜透析所用的水及透析液的微生物监测（1）采样点：透析用水出口（自来水经过过滤、软化、活性炭吸附、去离子逆渗透等步骤处理后的出口、透析 液出口（及透析结束时透析液离开透析器的出口）。如疑有透析液污染或严重污染者，应增加采样点，如原出水 口、透析液配比机、反渗水出口、贮水罐出口、透析液进口等。（2）采样容器：无菌试管，至少1ml，建议采集5-10ml送检，包装完整后送检。七：灭菌医疗器材的微生物检查1、可用破坏性
7、方法取样的，如一次性输液（血）器、注射器和注射针等按照中华人民共和国药典中无菌 检查法”进行。对不能用破坏性方法取样的医疗器材：应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向 流空气区域内或隔离系统中，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹，采样取全部表面或不少 于100 cm2（此采样面积同物表培养），除去手接触部分，将棉拭子入装10ml采样液的试管内。包装完整后送 检。2、牙科手机等：应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中，将每支 手机分别放置于含20ml25ml采样液（即无菌生理盐水）的无菌大试管中，液面高度应大于4.0cm,于
8、漩涡混 合器上洗涤震荡30s以上，取洗脱液进行无菌检查。八：消毒医疗器材的检查方法1、可整件放入含有10ml生理盐水的无菌试管中，震荡30S以上送检。2、可用破坏性方法取样的，在100级超净工作台称取1g-10g样品，放入装有10ml采样液的试管内送检。3、对不能用破坏性方法取样的医疗器材，在100级超净工作台，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物 体表面涂抹采样，被采表面100 cm2,取全部表面，被采表面100 cm2,取100 cm2,然后将除去手接触 部分的棉拭子于10ml生理盐水无菌试管中送检。4、消毒后内镜：取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50ml含相应中和剂的洗脱液（此中和剂中心不提供, 消毒液与中和剂需要对成，消毒液与中和剂如何对应可以参考消毒液监测部分），从活检口注入冲洗内镜管路， 并全量收集（可使用蠕动泵）送检。
