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1、实验项目学院专业班级姓名学号指导教师 实验日期广州大学实验报告实验四 氮、磷、钾元素对植物生长的影响生命科学学院生物技术生技121崔仁洪1214300095江月玲老师2014年4月17日-2014年5月15日目录1. 前言摘要关键词 32. 目的 43. 实验材料 44. 实验方法 44. 1材料处理方法 44. 2实验测定 54.2.1叶绿素含量的测定54.2.2过氧化物酶活性测定（比色法）64.2.3. 硝酸还原酶活性测定 64.2.4鲜重、十重和含水量的测定74.2.5 .测定叶片数、株高、根长 74.2.6 植株的形态观测 75. 实验结果 85.1测定株高、根长和叶片数的结果汇总85
2、.2叶绿素含量的测定 95.3过氧化物酶活性测定（比色法）105.4硝酸还原酶活性测定 115.5鲜重、十重和含水量的测定 115.6 番茄植株形态观察126实验结果计算126.1完全培养液的实验结果计算126.2计算结果统计表137对上述结果和实验数据的分析148实验结论 159实验讨论 1610心得体会 1711参考文献 17摘要 植物生长需要各种元素，缺一不可，不能相互代替。本实验通过无土栽培技 术对番茄幼苗，了解氮、磷、钾元素在植物生长中的作用及对植物生长的影响。叶 绿素含量、过氧化物酶活性测定(比色法)、硝酸还原酶活性的测定、植株的根茎叶 观察、鲜重的测量几项生物指标皆表明缺素对植物
3、影响严重。关键词 番茄幼苗缺素溶液培养植物生长侧根叶片 叶绿素1前言1.1番茄(Lycopersicum esculentum Mill.)又名西红柿，果实用作蔬菜或水果， 是我国种植面积较大的蔬菜之一。随着过加对外贸易的发展，番茄也成为了对外贸 易的重要产品之一，因此番茄对发展农业具有十分重要的意义。为了提高番茄的产 量和品质，掌握番茄植株生长发育对外界环境条件营养物质的需要是非常重要的。1.2. 为了提高番茄的质量和产量，研究番茄的缺素症状就很有必要了，为更有效的 掌握番茄营养管理提高科学依据。本文以番茄缺氮、磷、钾、铁元素，利用溶液培养， 分析番茄缺素的生理变化和症状。1.2.1无土栽培
4、技术无土栽培(soilless culture)是指不用天然土壤而用基质或仅育苗时用基质， 在定植以后用营养液进行灌溉的栽培方法。由于无土栽培可人工创造良好的根际环 境以取代土壤环境，有效防止土壤连作病害及土壤盐分积累造成的生理障碍，充分 满足作物对矿质营养、水分、气体等环境条件的需要，栽培用的基本材料又可以循 环利用，因此具有省水、省肥、省工、高产优质等特点。1.2.2番茄缺素实验的应用植物缺少氮、磷、钾、铁元素会表现出不同的症状，因此可以通过控制个元素 的控制培养各种缺素的的植物，最终可以记录下各种缺素的植物所表现出的症状。 根据表现的症状来应用实际生活番茄施肥。1.2.3立题根据与目的意
5、义通过植物的溶液培养和形态、生理生化指标测定等实验操作，掌握植物无土栽 培技术，了解氮、磷、钾、铁元素在植物生长中的作用及对植物生长的影响。使学 生在科学态度、实验技能、自主探究、团结协作等方面获得初步训练。为后续遗传 学、细胞生物学、植物组织培养的学习奠定基础。1.3. 植物生长必需的营养元素主要有碳、氢、氧、氮、磷、钾、硫、钙、镁、铁、 硼、锰、铜、锌、钼等1。植物对各种营养元素的需要只有量的差别，没有质的 区别2。即各种营养元素对植物来讲都是同等重要、不可代替的，缺乏任何一种营 养元素，植物都不能正常生长。2目的2.1掌握植物的溶液培养法.2.2 了解植物缺乏氮、磷、钾元素的症状.2.3
6、 了解氮、磷、钾元素对植物幼苗生长的影响.2.4掌握植物生理学专业常见生理指标的测定方法.2.5基本实验技能和创造性实验能力的培养。2.6提高学生设计实验、发现问题、分析问题和解决问题的能力。2.7培养学生的科研素养、激发学生的自主学习和独立研究能力，全面提高学生综合 素质。3材料材料选取：选取健壮无病，长势基本一致的番茄幼苗。4实验方法4. 1材料处理方法4.1.1挑选长势基本一致的番茄幼苗，测量叶片数量、株高和根长，具体数据请 看实验结果。4.1.2按下表分别配制不同的培养液，并将培养液分别放到培养缸内，然后调pH5.56之间。标记（完全培养、缺N培养、缺P 培养、 缺K 培养、 缺Fe
7、培养、 水培养）。各培养液组成如下表:贮存液配制800毫升配培养液所需的原液ml数完全液缺N缺P缺KCa(NO3)2888KH2PO488MgSO4*7H2O8888KC18816NaH2PO48NaC18CaCl28螯合铁1.61.61.61.6二主微量儿素0.80.80.80.8蒸馏水756.6765.6765.6765.64.1.3把幼苗栽在培养缸上用棉花固定，根部一定要与溶液接触。4.1.4在阳光充足的地方下培养该苗。4.1.5每隔一天要补足缸内的水分，即加蒸馏水至原来的高度，每周更换一次培 养液。4.1.6第14d在此测定叶片数量、株高和根长。再继续培养1周。4. 2实验测定4.2.
8、1叶绿素含量的测定4.2.1.1叶绿素含量的提取0.5g材料（加绿豆大小碳酸钙）f 加10ml丙酮f 研磨 f 过滤到20ml 的量筒，用丙酮定容至20ml，待用。4.2.1.2比色，测光密度值：调波长（ 652nm）、调零一取提取好的叶绿素提取液于652nm下测定光密度值。4.2.1.3结果计算叶绿素总浓度（mg/L ）= D652 X 1000/34.5让疗去M/辟击、叶绿素浓度（mg/l） X提取液总体积（ml）叶绿素总含量（呢/g鲜重）=重量（g）xi0004.2.2过氧化物酶活性测定（比色法）4.2.2.1.酶液的提取：0. 3g叶片一研磨一匀浆一离心（4000转/分）一活性炭脱色
9、上清液待用4.2.2.2 .比色，测光密度值：调波长、调零，先往比色杯中加入2ml的反应液，放进比色计，然后快速地 加入1ml的酶液，计时，先读第一个原始数据，然后每30秒读一次，共读5个数据。4.2.2.3 结果计算以每分钟光密度变化值表示过氧化物酶活性大小.E （ODn - ODn-1）过氧化物酶活性=鲜重（g） 乂反应时间（min）过氧化物酶活性单位：OD470/min g FW4.2.3. 硝酸还原酶活性测定4.2.3. 1.取材称取等量叶片两份，每份0.3克，剪碎成黄豆大小，分别置于两个注射器内。4.2.3.2. 配液（放进2个烧杯）4.2.3.2.1 0.1mol/L磷酸缓冲溶液5
10、ml+蒸馏水5ml。4.2.3.2.2. 0.1mol/L 磷酸缓冲溶液 5ml+0.2mol/L KNO3 5ml4.2.3.3. 抽气（用以上溶液放于注射器内抽气至叶片沉下来）4.2.3.4. 静置（15分钟，放在黑暗柜子里）4.2.3.5. NO2 -含量的测定反应液1ml于试管，先加入磺胺试剂2ml，后加入一萘胺试剂2ml，混合摇匀， 如有粉红色出现即可比色测定，(520nm波长)光密度，从标准曲线上查得NO2-含 量，然后计算酶活性，以每小时每克鲜重产生的NO2-表示之。4.2.3.6结果计算NO2- (pmol/ml) = 8.288 OD 520-0.03硝酸还原酶活性(NO2-
11、 , pmol/hgfw)=错误！4.2.4.鲜重、干重和含水量的测定4.2.4.1鲜重、十重和含水量的称量将整株番茄幼苗材料迅速剪成约2厘米的小块，!装入已知重量W的培养皿中!在电子天平上准确称重量!称得培养皿与鲜样品总重为W1!然后于105度烘箱中干燥0.5小时!关掉烘箱电源，待其冷却全温室!再用电子天平称重，称得重量为瓶与十样品总重量为W2。4.2.4.2计算结果整株番茄幼苗鲜重：Wf=W1-W 整株番茄幼苗十重：Wd=W2-WWf-Wd整株番茄幼苗含水量()= Wf4.2.5. 测定叶片数、株高、根长。4.2.6植株的形态观测。我们小组各自带回了完全叶番茄材料回宿舍再栽培，期望 有收获
12、。5实验结果5.1测定株高、根长和叶片数的结果汇总第1d测定测定完全液NPK株高（cm）10101010根长（cm）32.53.53叶片（片）8789第14d测定测定完全液NPK株高（cm）231510.616根长（cm）1123229叶片（片）17111212第28d测定测定完全液NPK株高（cm）42271127根长（cm）17363917叶片（片）2015151528d株高、根长测定株高（cm）完全液NPK422711273021102838171122241530626112252810185平均值31171716根长（cm）完全液NPK173639171542201822322116
13、21322621203227221832238平均值193426175.2叶绿素含量的测定叶绿素总含量测定的D652值重复完全液NPK1.1420.5010.5370.8290.8760.5781.0150.8591.1610.527-0.646平均值1.0600.5350.7760.7785.3过氧化物酶活性测定（比色法）过氧化物酶含量测定的D值变量完全液NPK00.0350.0600.0530.0170.0310.0060.0300.0300.120-平均值0.0620.0330.04150.0235300.3120.0730.3150.2480.3220.0200.1090.2210.675-平均值0.4360.04650.2120.2345600.5130.0880.4820.4660.5130.0500.2270.4191.032-平均值0.6860.0690.35450.4425900.6700.1040.6340.6510.671
