电泳仪电泳槽的使用方法

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1、电泳仪、电泳槽的使用方法电泳仪：电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两 大类，自由界面电泳不需支持物，如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等，这类电泳目 前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物，常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非 凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等，分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电 泳，是指带电粒子在电场中的运动，不同物质由于所带电荷及分子量的不同，因此在电场中运动速度不 同，根据这一特征，应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析，或将一定混合物进行组份分析或 单个组份提取制

2、备，这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造 的。下面简单介绍其使用方法及注意事项。使用方法1 首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。2 电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范 围。3 接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进 行。4 工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态，并拨出电泳插头。注意事项1 电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取 放东西，如需要应先断电，以免触电。同

3、时要求仪器必须有良好接地端，以防漏电。2 仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝， 但短路现象仍有可能导致仪器损坏。3 由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间 也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。4 在总电流不超过仪器额定电流时（最大电流范围），可以多槽关联使用，但要注意不能超载，否则容 易影响仪器寿命。5 某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时，允许在稳压状态下空载开机，但在稳流状态下必须先接 好负载再开机，否则电压表指乍十将大幅度跳动，容易造成不必要的人为机器损坏。6 使

4、用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常气味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意 外事故。夹芯式垂直电泳槽使用方法：、组成部件（一）装有铂金丝的贮液槽一对，配有冷却装置及电泳缓冲液流出口。（二）凹型橡胶框，配有玻璃板，可分别制作厚度为Imm、1.5mm的凝胶板，操作时根据需要选择适当厚 度的玻璃板及梳子配套使用。（三）样品孑b模具（梳子）用于电泳加样。（四）固定贮液槽的螺丝杆及螺母4对，28D、30型为5对。（五）橡胶管五根。两根长的用于连接冷却水的出入口；中等长度的两根用于连接电极缓；中液的流出口； 最短的一根用于连接贮液槽间的冷却水。（六）导线1付。（一）清洗部件上述部件组装前要彻底

5、清洗干净。尤其是玻璃板及凹形带槽橡胶框，必须用泡沫海绵沾少许肥皂粉或洗涤 剂彻底清洗干净。清洗后的玻璃板应放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。（二）组装电泳槽A、1、将四只固定螺杆插进一只贮液框（半上槽）的相应孔洞中，然后将贮液框仰放在桌上。2、左手拿凹型槽橡胶模框，右手的拇指与中指握住玻璃板的两侧边缘插到橡胶模框内（注意手指不能接 触灌胶面的玻璃板）。3、将带有玻璃的橡胶模框子放在仰放的贮液槽框架上，其下缘必须对齐贮液槽框下缘。4、双手拿另一只贮液槽框与仰放在桌上的贮液槽框相合，并使橡胶框上的凸出线位于贮液槽有机玻璃框 中央。5、装上四只螺母，拧紧螺丝。注意拧紧螺丝时用力应均匀，最好用双手按斜

6、角位置双双逐渐拧紧。6、将电泳槽垂直竖起，放在桌上，带短玻璃板的贮液槽称上槽（阴极端），带长玻璃板的贮液槽称为下槽 （阳极端），在长玻璃板与橡胶框间有一缝隙。此缝隙可用已熔化的10%琼脂沿长玻璃板下端灌入，为防止 留存气泡，可稍抬起一端即可赶去气泡。待琼脂完全凝固后才能灌胶。B、也可将槽垂直竖起，将带有玻璃的橡胶模框直接放入槽中，对称拧紧螺丝后，用琼脂封底边。（三）灌胶1、先灌分离胶，待凝固后再灌浓缩胶。灌胶前接通冷却水，夹紧连接上下贮液槽的两根橡胶管。2、用细头滴管吸取胶液，沿长、短玻璃板中间缝隙从一端加入胶液。为防止产生气泡，可稍拾起另一端 （气泡往高处走），不断加入胶液。若单层胶（分离胶

7、）则加胶量约距离短玻璃板上端0.3厘米处，轻轻加少许 水，双手轻轻将梳子插入，待胶凝后就可形成凹形加样孔。3、为防止漏胶，在上、下贮液槽中立即加入蒸馏水，但蒸馏水不能超过短玻璃板上缘。4、胶凝固后即可看到样品槽梳子与凝胶板间有一层折射率不同的亮区。（四）加样1、松开连接上、下贮液槽两根橡皮管上的夹子，放掉槽内的蒸馏水，待水流完后，再夹紧夹子。2、双手轻轻取出样品梳子，即可看到界线清楚的加样孔，将孑冲水分吸去（注意千万不要碰坏孔沿的字 面）。3、在上、下贮液槽中加入缓；中液，液体高度应超过上贮液槽短玻璃板上缘。4、用微量注射器吸取一定量的样品加到长、短玻璃板间的凹型凝胶样品孔内（注意加样动作要轻

8、，针头不 能碰坏胶面）。（五）电泳一贮液槽导线与电泳仪的负极相连，下贮液槽导线与电泳仪的正极相连。检查线路无误，方可按照所要求 的电压电流进行电泳。（六）取出胶板电泳结束，旋松螺母，取出胶框，剥出玻璃板，在两块玻璃板下角空隙内，用刀片背面轻轻撬动，即可将 胶面与一块玻璃板分开，将有胶板的玻璃板平放在桌上，双手轻轻沿凝胶底将胶片托起，放在大培养皿中 染色，胶板经漂洗、脱色后即可看到清晰的分离条带。注：DYCZ28B、29型夹芯式电泳槽使用方法与此相同。DYCZ28C型、28D型和30型电泳槽使用方法 也与此相同，因是制作两块胶板，故实际形成三个贮液槽。请注意在操作时两个胶室的短玻璃板都要向 里，中间为负极，两边为正极。注意可作两块胶的电泳槽，在作一块胶时，应将三头导线都插在电泳槽上，以免放在桌上误碰。