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1、探究课题题：生物物组织中中蛋白质质的鉴定定一、课题题分析1教学学目标（1）初初步学会会蛋白质质的鉴定定方法，领领悟并能能描述该该实验的的实验原原理。（2）探探索该实实验的最最佳实验验材料及及稀释浓浓度，培培养学生生的科学学素质和和创新意意识。（3）如如实观察察并记录录实验现现象和结结果，提提高学生生的实验验操作能能力和观观察能力力，（3）分分析实验验过程中中出现的的问题，培培养学生生分析问问题和解解决问题题的能力力。2背景景描述组成蛋白白质的氨氨基酸分分子是通通过肽键键互相连连接起来来的，其其中的肽肽键结构构与双缩缩脲（尿尿素加热热至1880左右，生生成双缩缩脲并放放出一分分子氨）相相似，双双
2、缩脲（HH2NOCCNHCONHH2）在碱碱性环境境中能与与Cu2+作用用，形成成紫色或或紫红色色的络合合物，这这个反应应叫做双双缩脲反反应。反反应式如如下：但双缩脲脲反应不不仅为含含有两个个以上肽肽键的物物质所有有。含有有一个肽肽键和一一个CCSNNH2，CCH2 NNH2 NNH2NH2，CRHHNHH2或CCHOHHCHHNH22等基因因的物质质以及乙乙二酰二二氨 （OOCCOO）等物物质也有有此反应应。因此此，一切切蛋白质质或二肽肽以上的的多肽都都有双缩缩脲反应应，但有有双缩脲脲反应的的物质不不一定都都是蛋白白质或多多肽。双缩脲试试剂常常常用于组组织蛋白白质的定定性测定定（如图图）。二
3、材料料器具1实验验材料：大豆、黄黄豆、鸡鸡蛋、豆豆浆等， 稀释2倍倍100倍的蛋蛋清等）。2仪器器：双面面刀片，研钵，石英砂，玻璃漏斗，试管，试管架，试管夹，纱布，镊子，吸管，小烧杯，试管刷。3试剂剂：双缩缩脲试剂剂，蒸馏馏水三教学学建议本课题的的重点是是初步学会会蛋白质质的鉴定定方法，领领悟该实实验的实实验原理理。难点点是规范范地完成成该实验验的操作作步骤，并并能分析析实验过过程中出出现的问问题，从从实验中中找出该该实验的的最佳实实验材料料。根据据实验内内容，建建议教师师采用探探究性实实验和验验证性实实验相结结合的教教学方法法。学生可以以按4人人为一组组进行实实验，通通过颜色色反应定定性地验
4、验证生物物组织中中的蛋白白质成分分，让学学生了解解构成细细胞的化化合物中中含有蛋蛋白质，并并学会蛋蛋白质鉴鉴定的操操作方法法，学会获获得新知知识、新新的科学学知识的的途径和和方法。可以让同同组内不不同的学学生分别别选择不不同的实实验材料料、不同同浓度的的实验材材料，如如选择提提前浸泡泡的黄豆豆与没有有浸泡的的黄豆；豆浆；没有稀稀释的蛋蛋清与稀稀释2倍倍100倍的蛋蛋清等。实实验时要要求学生生能分工工合作，体现合作精神。通过相互探讨，提高学生对实验材料进行选择和处理的能力，更深刻地理解教材中实验设计的科学之处，有利于培养学生科学的研究态度，提高学生的实验操作能力、观察能力和设计能力。通过让学生分
5、析实验现象、撰写实验报告、提出改进实验的措施、改进实验的器具等方面让学生开展探究学习，使学生更好地理解知识，提高利用科学的研究方法来解决实际问题的能力，体现学生学习的主体性，利于激发学生的创新意识。本实验所所用的双双缩脲试试剂必须须现配现现用，否否则实验验不会成成功。双双缩脲试试剂使用用时，应应先加试试剂A(0.11g/mmL的NNaOHH溶液)，造成成碱性的的反应环环境，再再加试剂剂B(00.011g/mmL的CCuSOO4溶液)。配制双缩缩脲试剂剂的方法法：配制制取100g氢氧氧化钠放放入量筒筒中，加加水至1100mmL，待待充分溶溶解后倒倒入试剂剂瓶中，配配成质量量浓度为为0.11g/m
6、mL的氢氢氧化钠钠溶液，瓶瓶口塞上上胶塞，贴贴上标签签，写上上试剂AA。取11g硫酸酸铜放入入量筒中中，加水水至1000mLL，待充充分溶解解后倒入入试剂瓶瓶中，配配成质量量浓度为为0.001g/mL的的硫酸铜铜溶液（蓝蓝色）。瓶瓶口塞上上胶塞，贴贴上标签签，写上上试剂BB。在鉴定前前，可以以留出一一部分样样液，以以便与鉴鉴定后的的样液的的颜色变变化作对对比，这这样可以以增强说说服力。四探究究活动步骤之一一 探索实实现原理理 创设探探究实验验情景 设疑：生物组组织细胞胞内的蛋蛋白质是是如何鉴鉴定的？步骤之二二 探索实实验材料料 探索索实验过过程包括对实实验材料料的探索索，以及及研究获获得较好好
7、实验效效果的蛋蛋清浓度度稀释倍倍数，颜颜色反应应的规范范操作等等。通过预习习，让学学生描述述：蛋白质分分子与双双缩脲试试剂发生颜颜色反应应的原理理是怎样的的？设疑1：该实验验的实验验材料应应该如何何选择？教师引导导学生从从以下几几方面考考虑：注意材材料中蛋蛋白质含含量 的多少，含含量多则则实验效效果明显显；考虑材材料是否否容易得得到（成成本问题题）；实验前前材料的的处理是是否方便便。设疑2：如何取取得蛋白白质组织织样液？（1）制制备含蛋蛋白质的的生物组组织样液液（以黄黄豆为例例）：取几粒粒浸泡过过（或没没浸泡过过）的黄黄豆（或或大豆），去去皮，切切成薄片片。将黄豆豆薄片放放进研钵钵中，加加少许
8、石石英砂和和5mLL水，充充分研磨磨。将玻璃璃漏斗插插入试管管中，在在漏斗上上垫上一一层纱布布，过虑虑黄豆组组织研磨磨液。（2）用用现成的的食用豆豆浆、牛牛奶作实实验材料料。（3）制制备不同同浓度的的蛋清稀稀释液取一个鸡鸡蛋，用用镊子在在一端轻轻轻敲破破一小块块蛋壳，用用吸管从从蛋壳的的破孔处处吸取00.5mmL蛋白白液滴入入若干个个小烧杯杯中，分分别向小小烧杯中中加入00、2.5mLL、5mL、77.5mLL、100mL水水，搅拌拌均匀，加加以稀释释。让学生思思考：你你认为哪哪些材料料可以作作该实验验的材料料？让学生试试一试：浸泡与与未浸泡泡的种子子进行实实验操作作，效果果一样吗吗？让学生思
9、思考：事事先需要要留出一一些黄豆豆组织样样液的目目的是什什么？让学生仔仔细观察察：黄豆豆组织样样液的颜颜色是怎怎样的？让学生思思考：把把蛋清稀稀释成不不同浓度度的设计计目的是是什么？让学生仔仔细观察察：蛋清清组织样样液的颜颜色是怎怎样的？设疑3：蛋白质质鉴定的的实验如如何操作作？要注注意些什什么？步骤：取1支支试管，向向试管内内注入黄黄豆组织织样液22mL（或或者向11支试管管内注入入豆浆、或或牛奶、或或蛋白稀稀释液22mL）。向试管中加入双缩脲试剂A（质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液），摇荡均匀。注意观察试管内溶液的颜色有什么变化。再向试管中加入34滴双缩脲试剂B（质量浓度为0.01g
10、/mL的硫酸铜溶液），摇荡均匀。试管内溶溶液的颜颜色有什什么变化化对照组1试管内溶溶液的颜颜色有什什么变化化对照组2试管内溶溶液的颜颜色有什什么变化化步骤之三三 实验结结果的讨讨论及小小结在教师指指导下，让让学生们们大胆讨讨论，自自己总结结实验经经验，得得出结论论。让学生思思考：双双缩脲试试剂A和和双缩脲脲试剂BB的用量量及加入入的顺序序可以改改变吗？若加入入的顺序序颠倒，请请预测结结果会怎怎样？让学生生生试一试试：用豆豆浆、牛牛奶、蛋蛋清等做做实验，结结果是否否一样？用稀释释不同浓浓度的蛋蛋清做实实验，哪哪一浓度度效果最最好？让学生生生试一试试：把加加入的双双缩脲试试剂A和和双缩脲脲试剂BB
11、顺序颠颠倒，结结果怎样样？让学生想想一想：设置对对照组22的目的的是什么么？实验所得得结论参参考：实验材材料最好好选用富富含蛋白白质的生生物组织织（或器器官），植植物材料料常用大大豆、黄黄豆，动动物材料料常用的的是鸡蛋蛋（卵白白）。如如用大豆豆、黄豆豆，必须须提前浸浸泡12d。这样样容易研研磨成浆浆（豆浆浆的实验验效果也也不错，因因此有条条件的学学校，可可以直接接采用现现成的大大豆磨成成的豆浆浆，豆浆浆可以购购买，也也可以用用小型的的榨汁机机制）。用蛋清做实验必须经过稀释，如蛋清液稀释不够，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不容易刷洗干净。双缩脲试剂A和双缩脲
12、试剂B的加入的顺序不可以改变。因为蛋白质只有在碱性环境中才能与CuSO4发生紫色反应，否则紫色反应会被Cu(OH) 2遮蔽。让学生反反思：这这次探索索实验的的心得。五讨论论与思考考1在实实验中，最最后的实实验结果果紫色反反应不明明显，试试管内溶溶液的颜颜色还是是呈现CCuSOO4的蓝色色，这是是为什么么？简析：这这是因为为双缩脲脲试剂BB（质量量浓度为为0.001g/mL的的蓝色CCuSOO4溶液）加加得过多多。2如何何稀释蛋蛋清才能能取得较较好的实实验效果果？简析：在在蛋白质质的鉴定定实验中中，若用用蛋白质质作实验验材料，必必须稀释释，以免免实验后后粘住试试管，不不易洗刷刷。方法法：将鸡鸡蛋
13、一端端轻轻敲敲破一小小口，让让蛋清流流入容器器中，然然后按比比例蛋清清蒸馏水水19的比比例混合合搅匀，再再用4层层纱布过过滤，放放入滴瓶瓶备用，这这样配出出的蛋清清稀释液液与双缩缩脲试剂剂发生反反应后不不会粘固固在试管管的内壁壁上，反反应也彻彻底，试试管也易易刷洗干干净。3对斐斐林试剂剂和双缩缩脲试剂剂的配方方，叙述述不正确确的是 ( )A都含含有NaaOH溶溶液和CCuSOO4溶液 B斐林试试剂的配配制是将将455滴0.05gg/mLL的CuuSO44溶液滴滴入2mmL0.1g/mL的的NaOOH溶液液中即成成 C双缩脲脲试剂是是将34滴00.011g/mmL的CCuSOO4溶液滴滴入2mm
14、L0.1g/mL的的NaOOH溶液液中混合合而成的的 D.双缩缩脲试剂剂含有两两种试剂剂：质量量浓度为为0.11g/mmL的NNaOHH溶液和和质量浓浓度为00.011g/mmL的CCuSOO4溶液答案：CC4在在用双缩缩脲试剂剂鉴定蛋蛋白质实实验时，正正确的操操作是 ( )A22mL蛋蛋白稀释释液先加加2mLL0.11g/mmL的NNaOHH溶液，再再加34滴00.011g/mmL的CCuSOO4溶液CCuSOO4B22mL蛋蛋白稀释释液先加加344滴0.01gg/mLL的CuuSO44溶液，再再加2mmL0.1g/mL的的NaOOH溶液液C22mL蛋蛋白稀释释液，同同时加入入2mLL0.11g/mmL的NNaOHH和34滴00.011g/mmL的CCuSOO4混合液液D在在2mLL 0.1g/mL的的NaOOH和334滴滴0.001g/mL的的CuSSO4混合液液中加入入2mLL蛋白稀稀释液答案：AA
