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1、常熟理工学院毕业设计（论文） 本科毕业设计（论文）题 目 油菜花蜂蜜中挥发性成分的提取与特征 图谱的建立 院 系 生物与食品工程学院 年 级 2011 专 业食品质量与安全 班 级 Y134111 学 号 Y13411106 学生姓名 指导教师 职 称 副教授 论文提交日期 2015年5月20日 常熟理工学院本科毕业设计(论文)诚信承诺书本人郑重声明： 所呈交的本科毕业设计(论文)，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到
2、本声明的法律结果由本人承担。本人签名： 日期： 常熟理工学院本科毕业设计(论文)使用授权说明本人完全了解常熟理工学院有关收集、保留和使用毕业设计(论文)的规定，即：本科生在校期间进行毕业设计(论文)工作的知识产权单位属常熟理工学院。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许毕业设计(论文)被查阅和借阅；学校可以将毕业设计(论文)的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编毕业设计（论文），并且本人电子文档和纸质论文的内容相一致。保密的毕业设计(论文)在解密后遵守此规定。本人签名： 日期： 导师签名： 日期： 油菜花蜂蜜中挥发性成分的
3、提取与特征图谱的建立摘要本论文采用顶空固相微萃取技术萃取油菜花蜂蜜中的挥发性成分，利用气相色谱技术对10种油菜花蜂蜜的挥发性成分进行分析，建立起油菜花蜂蜜挥发性成分的特征图谱。采用顶空固相微萃取方处理油菜花蜂蜜，筛选萃取时间、萃取温度、Nacl加入量三个条件参数，其中萃取温度的选择分为四个梯度，分别为30、40、50和60，萃取时间的选择分为四个梯度，分别为20min、25min、30min和40min，萃取氯化钠的添加量分为0g、0.5g、1.0g和1.5g，确定最优的操作条件，通过气相色谱仪对10种品牌的油菜花蜂蜜挥发性成分进行解析处理，得到色谱图，然后对色谱图数字化处理，通过数据分析找出
4、内参考峰，计算保留值，然后按照一定标准找出共有峰建立油菜花蜂蜜的特征图谱。最终确定顶空固相微萃取的最优条件是：萃取温度为40，萃取时间为30分钟，加入氯化钠1.0g，此条件下得到蜂蜜的特征共有峰有10个。关键词：油菜花蜂蜜 顶空固相微萃取 气相色谱 特征图谱IIExtractionandtheCharacteristicMapofVolatileCompositionofRape HoneyAbstractIn this paper, headspace solid phase micro extraction rape honey extraction of volatile compone
5、nts by gas chromatography for 10 kinds of rape honey volatile compounds were analyzed to establish the characteristic chromatogram rape honey volatile components.Headspace solid phase micro-extraction side processing rape honey, screening extraction time, extraction temperature, NaCl amount, which i
6、s divided into four choices extraction temperature gradient, respectively 30 , 40 , 50 and 60 , extraction time Select four gradient, respectively 20min 25min 30min and 40min, the amount of sodium chloride and extracted into 0g, 0.5g, 1.0g and 1.5g, determine the optimal operating conditions by a ga
7、s chromatograph 10 brands the rape honey volatile components resolved to give chromatograms, and then digitize the chromatogram to identify internal reference peak, calculate retention, and follow certain standards to identify common peak establish rape honey characteristic spectrum data analysis .F
8、inalize headspace solid phase micro extraction optimum conditions are: extraction temperature is 40 , extraction time was 30 minutes, sodium chloride was added 1.0g, get honey under conditions characterized by a total of 10 peaks.Keywords:Rape Honey; Headspace solid phase micro extraction; Gas Chrom
9、atography; Characteristic mapIII目录1绪论11.1简述11.2蜂蜜鉴定方法的研究进展11.2.1 感官分析11.2.2 荧光光谱11.2.3 高效液相色谱11.2.4 气相色谱技术21.3课题研究内容21.3.1 研究背景21.3.2 研究内容22 实验部分32.1 实验样品32.2 实验试剂32.3 实验器材32.4 实验方法42.4.1 顶空固相微萃取提取油菜花蜜挥发性成分方法42.4.2 气相色谱仪的操作流程42.4.3 气相色谱条件52.4.5 挥发性成分的最优提取条件和气相色谱图的获得52.4.6 色谱图的数字化52.5数据处理方法63 结果和讨论7
10、3.1 萃取条件的优化7IV3.2 共有内参考峰的确定93.3 相对保留值的处理结果133.4 不同油菜花蜂蜜样品的图谱共有峰的分析163.5 共有峰的保留时间结果173.6 挥发性成分特征图谱的建立184结论20致谢21参考文献22V1绪论1.1简述蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物结合后，经过在巢脾内转化、脱水、贮存至成熟的过程而成的天然甜物质1。油菜蜜呈浅琥珀色，略混浊、有油菜花的香气，稍有辛辣味，贮放日久辣味减轻，味道甜润，极易结晶，结晶后呈乳白色， 晶体呈细粒或油脂状。白菜型油菜花期早，蜂群越冬后正处于恢复、发展阶段，气候比较寒冷产量不高；甘蓝型和芥菜型花期较晚且气
11、候比较稳定，温度高是油菜蜜的主产期。油菜蜜是我国的最大众、稳产的蜜种；全年约占蜂蜜总产量40%以上。强群蜂单花期产量可达5-75公斤或更高，蜜度较低。我国油菜分布广，尤其是南方地区种植面积很大1。油菜花产蜜量大，蜜呈浅琥珀色，比紫云英蜜略深，有混浊，具有油菜花香味，味道甜润，容易结晶，结晶的油菜蜜白色细腻,属二等蜜1。油菜花蜜清热润燥、舒张血管、行血破气，消肿散结、和血补身的功能1。1.2蜂蜜鉴定方法的研究进展1.2.1 感官分析蜂蜜的感官辨别主要是由有经验的专家根据不同品种蜂蜜的色泽、状态、气味、滋味等感官性状的不同，对被检样品进行感官评价。该方法适用于判定蜂蜜是否发酵、异味或含有不纯物质，
12、但是感官分析辨别蜂蜜品种带有一定的主观性、经验性和不确定性。1.2.2 荧光光谱荧光光谱属于发射光谱，提供了有关荧光分子信息。荧光光谱技术的灵敏度高于其他光谱技术100-1000倍，可用于判定蜂蜜的植物来源。蜂蜜中所含的多酚和氨基酸有强烈的荧光团，用荧光光谱有助于鉴定蜂蜜的植物来源，如柑桔蜜的橙皮素2，熏衣草蜂蜜所含的特征氨基酸苯基丙氨酸和酪氨酸，可与桉树蜜区分开3。色氨酸和谷氨酸则有助于分类甘露蜜和花蜜4。1.2.3 高效液相色谱高效液相色谱(HPLC)特征图谱技术与化学计量学相结合的方法，由此可以建立了洋槐蜜、油菜蜜和荆条蜜的HPLC特征图谱,确定了这三种单花蜜的花源酚酸标识物,并结合化学
13、计量学的方法对蜂蜜的植物源及掺假进行了分析鉴定5。该研究为蜂蜜的花源鉴定以及掺假研究提供了依据。1.2.4 气相色谱技术气相色谱在蜂蜜品种鉴定中主要用于蜂蜜挥发性成分的分离、鉴别。测定多种蜂蜜中的芳香性成分并进行分析，发现每种蜂蜜有各自的色谱图以及特征化合物，因此，利用色谱图确定蜂蜜的蜜源种类似乎可行。迄今为止，约有600 种挥发性化合物在许多蜂蜜类型中被鉴定出。Alissandrakis E等研究发现，与单花蜜特殊气味有关的挥发性物质一般来源于对应的植物6。通过溶剂萃取，改良的“Likens-Nickerson”蒸汽蒸馏法和溶剂萃取，动态顶空萃取(DHS)，固相微萃取以及气体传感器等萃取方法
14、研究单花蜜中的挥发性物质成分，将挥发性物质作为分类单花蜂蜜的特征标记，是目前研究的热门课题之一7。Bianchi F 等用动态顶空萃取样品，GC-MS 法测定分离出草莓蜜中的28个芳香化合物，其中- 异佛尔酮，- 异佛尔酮和酮代异佛尔酮被认为是草莓蜜的特征标记8。动态顶空萃取法是花粉分析的有效替代方法，尤其用于处理如草莓蜜这种花粉含量少的蜂蜜样品。1.3课题研究内容1.3.1 研究背景我国是世界养蜂大国，由于我国国土辽阔、地理气候优越以及蜜源植物丰富，不仅蜂蜜产量居世界首位( 年产约20万吨) ，而且蜂蜜品种种类和数量繁多，分布广泛。据不完全统计，我国能被蜜蜂利用的蜜源植物约5000种以上，能取到商品蜜的蜜源植物有100多种6。根据国际食品法典委员会蜂蜜标准、欧盟蜂蜜指令及其他相关规定，蜂蜜种类依据来源、生产方式或外观划分15-16。最常见的划分是依据蜜蜂所采集的蜜源植物种类而分的，主要蜜源是单一植物的称作单花种蜂蜜，采自多种植物的为杂花蜜或百花蜜。不同蜜源植物来源的蜂蜜的成分主要取决于植物类型、植物花期、气候、蜂群强弱以及取蜜时间等，不仅在感官和内在品质上有一定的差异，而且其营养效果也有所不同6。1.3.2 研究内容 以康思农油菜花蜜为实验对象分别固定氯化钠的量、萃取时
