《决明组培无性系建立及其毛状根结构与抗氧化酶系特征》由会员分享，可在线阅读，更多相关《决明组培无性系建立及其毛状根结构与抗氧化酶系特征（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、决明组培无性系建立及其毛状根结构与抗氧化酶系特征钝叶决明(Cassia obtusifolia L)属豆科(Leguminosae)决明属(Cassia), 多分布于非洲、美洲及亚洲，在我国主要分布于长江以南。决明是一种重要的中 药材,具有多种功效，近年来药理上已证实决明在免疫系统、消化系统、清肝明目、 抗菌抗肿瘤及保健等方面都有较好的作用，因而被广泛地用于临床和生活。目前我国决明主要来源于人工种植，由于野生资源的不断减少及人工种植品 质的下降,使得决明的产量大幅的下降，给临床及生活需求带来了较大的困难。因 而，寻找提高决明产量和品质的新方法十分必要。本研究首先对决明种子采用浓硫酸进行不同时间
2、处理，以帮助种子胚芽突破 种皮及表层蜡质的制约，统计萌发率，观察幼苗生长情况，寻找最佳种子处理方式。 然后，分别以茎段、芽和带芽茎段为外植体，利用植物组织培养技术，用不同植物 激素配比的培养基诱导决明愈伤组织、分化生芽和生根培养，确定各培养阶段最 佳培养基组成，同时建立决明组培无性系。我们以往用发根农杆菌对决明毛状根的诱导和培养的成功，开辟了决明毛状 根的生物技术生产的新途径。另据报道，决明毛状根与决明实生根相比，有其营养 物质和药用成分的优势和不足，有待优化其培养。迄今，决明毛状根与实生根的解剖和生理特征不明。本研究采用体视显微观 察、石蜡切片，番红-固绿染色及多糖-高碘酸-席夫反应染色，显
3、微观察比较决明 毛状根与实生根的形态、解剖结构及淀粉粒分布。同时利用酶测定试剂盒检测毛状根的抗氧化酶系统，探究毛状根抗氧化能力。 通过以上试验，结果如下：1、提高决明种子萌发率的最佳浓硫酸处理研究发现， 籽粒饱满的决明种子在80%浓硫酸中浸泡处理50min最佳，其萌发率、生长状态 最好。种子萌发期集中在处理后的1-2d内，期间的萌发率占90%,萌发也较为均匀, 且发芽指数、活力指数、苗高及苗重均达到最高。2、决明组培无性系的建立以 决明无菌苗茎段、芽体及带芽茎段为材料，诱导产生愈伤组织，进而诱导产生不定 芽和不定根的分化，建立了决明组培无性系。发现6-BA和NAA配合使用能有效的促进各外植体愈
4、伤组织及愈伤组织不定 芽的发生,NAA可促进不定芽生根；茎段愈伤组织形成及不定芽的发生的最佳激 素配比分别为MS+1.0mg/L6-BA+0.4mg/L NAA和 MS+0.75mg/L6-BA+0.12mg/L NAA; 芽体及带芽茎段均在愈伤组织诱导培养基和不定芽培养基中继续生长，长出多芽 体，其不定芽根的形成的其最佳培养基为MS+0.1mg/LNAA;茎段诱导分化的植株 移栽成活率为80%,芽及带芽茎段诱导分化培养植株移栽成活率均为92%;定植成 活率分别为90%和95.4%。3、毛状根解剖结构特点发现决明毛状根粗细均匀，根 尖较实生根粗有较多根毛；毛状根表皮细胞较小、排列较紧密，较不规
5、则；皮层 细胞排列紧密不整齐；内皮层细胞排列紧密，细胞间隙小，凯氏带不明显；毛状根 初生木质部为二原型,而实生根为四原型；毛状根形成层细胞较实生根细胞小、 排列紧密、层数多；毛状根根冠几乎没有淀粉粒，而实生根有较多淀粉粒.决明毛 状根与实生根无论在外部形态还是在解剖结构上均存在较大差异.这为毛状根的 细胞发生机制、生理生化和基因表达特性以及其无限非向地性生长分子机制的进 一步研究奠定了很好的基础。4、抗氧化酶系统及同工酶谱特点对毛状根及实生根的超氧化歧化酶(SOD)、 过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)的活性和超 氧化歧化酶、过氧化物酶同工酶谱进行比
6、较了研究，同时对部分活性氧含量进行了测定。结果表明：毛状根与实生根的SOD、POD、CAT、GSH-PX活性均有显著 差异。毛状根中除POD活性增加外，其SOD、CAT、GSH-PX活性均降低。毛状根SOD 活性约为实生根的1/3,CAT、GSH-PX约实生根的1/2。毛状根与实生根中的酶谱带无特异差异。毛状根含O2-较多,H2O2的含量较 少。相对来讲，毛状根较弱的抗氧化酶系统不能有效的清除活性氧，其抗逆能力 较弱，这可能是决明毛状根易于褐化的重要原因之一。这些研究结果，对于决明毛 状根细胞发生机制、生理生化代谢特点、基因表达特性、以及其决明毛状根培养 技术的实用化的进一步研究奠定了必要的基础。
