《天津地区糖尿病肾病易感基因研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《天津地区糖尿病肾病易感基因研究（53页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、天津地区糖尿病肾病易感基因研究 天津医科大学硕士学位论文天津地区糖尿病肾病的易感基因研究姓名:李然申请学位级别:硕士专业:临床医学;内科学肾内科指导教师:韩鸿玲2021-05天津医科大学硕士学位论文中文于葡要目的:糖尿病肾病是糖尿病重要的微血管病变,是糖尿病死亡的主要原因之一,也是导致终末期肾损言的重要原因。糖尿病肾病发病机制复杂,糖脂代谢紊乱、氧化应激、肾素血管紧张素系统、足细胞屏障功能、炎症反响、上皮细胞间叶细胞转化及细胞因子等均可影响肾脏病变。研究说明遗传因素在发病中发挥重要作用,从群体水平探讨的遗传易感性具有十分重要的意义。本研究选取与发病机制相关的个基因个位点进行基因分型,以此对糖尿
2、病肾病发病进行关联分析,并探索基因型交互作用在糖尿病肾病发病中的作用。方法:收集名中国北方天津地区汉族型糖尿病患者,样本分别来自天津医科大学总医院、天津医科大学代谢病医院、南开大学人民医院。收集患者的一般资料及临床生化指标,包括年龄、体重、血糖、血肌酐、白蛋白等。按是否伴发糖尿病肾病分为糖尿病肾病组和非糖尿病肾病组,以糖尿病病程大于年,无糖尿病肾病无糖尿病视网膜病变患者作为糖尿病肾病组的对照组采用高盐法原平皓公司试剂盒提取患者外周血白细胞基因组,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术,对例天津地区的型糖尿病患者的个基因个位点进行基因分型,应用.统计软件对样本进行描述流行病学分析和数据整理,然
3、后应用软件做基因型.表型的关联分析及基因型交互作用分析。结果:以糖尿病病程超过年,无糖尿病肾病无糖尿病视网膜病变患者作为对照,基因的、 与糖尿病肾病存在关联,特别是基因的 位点.与糖尿病肾病存在显著关联。与对照组相比,基因的 位点与糖尿病肾病发病相关联位点与糖尿病.。与对照组相比,/基因的肾病存在关联.。所测个基因个位点在糖尿病肾病发病中未见明显交互作用。结论:遗传因素在糖尿病肾病发生中起重要作用,基因、基因及/基因的多态性与糖尿病肾病发病相关,、基因所测位点与天津地区型糖尿病肾病不相关。关键词:糖尿病肾病单核苷酸多态性关联分析基因交互作用, .。舶 .鹏,. . ;嘶.,.珊 .:, .,
4、。 ,., .,: ?. .? .:., 天津医科大学硕士学位论文 /,. . 、: /. .,/ .:?天津医科大学硕士学位论文缩略语/符号说明糖尿病肾病?终末期肾脏疾病.?全基因组关联分析. .单核细胞趋化蛋白?趋化因子受体?细胞外基质肾小管间质纤维化?非肌肌球蛋白.局灶节段性肾小球硬化上皮细胞问充质转分化.?转化生子因子?血小板衍生生长因子.糖尿病微血管病变:岩藻糖基转移酶?基质金属蛋白酶?肿瘤坏死因子白细胞介素单核苷酸多态性?尿白蛋白排泄率?磷酸盐缓冲液?最小等位基因频率?肾小球滤过率.?肾素血管紧张素醛固酮系统?血管紧张素转化酶?血管紧张素原?过氧化物酶增殖体活化受体内皮型一氧化氮合
5、酶?血管内皮生长因子天津医科大学硕士学位论文?一?一糖基化终末产物?醛糖复原酶?山梨醇脱氢酶蛋白激酶天津医科大学硕士学位论文.三一.?一日吾研究现状、成果糖尿病肾病是糖尿病最常见的微血管并发症之一,糖尿病患者中约.%开展为糖尿病肾病。糖尿病肾病是糖尿病死亡的主要原因之一,也是导致终末期肾病 ,的重要原因。据报道,在欧美国家,终末期肾病约有/为糖尿病所致,且%为型糖尿病。糖尿病是常见病、多发病,其患病率随着人民生活水平的提高、生活方式的改变而迅速增加。近年来,我国糖尿病患病率显著增高,全国省市万人流行病学资料显示为.%,.年.%,年岁以上的人口中,城市糖尿病的患病率升高到.%,至年,中国成人糖尿
6、病总数达万,我国可能已成为糖尿病人数最多的国家。随着糖尿病患病率的升高,糖尿病肾病的患病率亦随之增高,有报道在糖尿病发病年后,.%患者出现糖尿病肾病【,因此研究糖尿病肾病的发病机制具有重要意义。糖尿病肾病发病机制复杂,遗传因素、肾脏血流动力学异常、糖脂代谢紊乱、炎症反响、氧化应激等多种因素:参与糖尿病肾病的发病。糖尿病肾病具有明显的遗传倾向,环境和遗传因素的交互作用决定了的易感性,而遗传因素在的发生、开展过程中起着更为重要的作用。流行病学资料显示糖尿病肾病具有家族聚集现象【】,且不同种族间糖尿病肾病的发生率也明显不同,印第安人糖尿病患者中糖尿病肾病发生率高达%,而一般白种人那么为%左右。随着,
7、的广泛应用,糖尿全基因组关联分析.病肾病的遗传学背景得到逐步认识。全基因组关联分析是指采用高通量的基因分型技术,对覆盖全基因组的遗传标记进行基因分型,通过病例对照研究或基于家系的关联分析来寻找全基因组中与疾病性状相关的基因,目前多用于复杂遗传疾病的研究,包括肿瘤、精神病及糖尿病等多基因遗传疾病。迄今为止,已发现多个基因与糖尿病肾病密切相关,包括、等基因。目前国内对糖尿病肾病基因研究大多是通过病例对照研究对单个基因多态性与关系进行分析,由于糖尿病肾病是多基因遗传疾病,在群体水平上单个基因的作用是有限的,单基因突变造成的例子及其罕见。在多基因遗传病中,遗传因素的总体作用不等于单个基因的作天津医科大
8、学硕士学位论文用相加,也就是说,存在基因之间的协同作用。基因型交互作用反映了在群体水平上对某种疾病的易感性,而生物学上的交互作用为基因研究提供一定参考,本研究从影响糖尿病肾病发病机制着手,研究多个基因与糖尿病肾病的关系及基因间的交互作用。糖尿病肾病肾脏病理改变以肾小球系膜扩张、细胞外基质积聚、基底膜增厚及肾小球硬化为特征,细胞外基质 ,积聚包括在肾小球系膜区和肾小管间质区的聚集。肾小管间质纤维化,是所有慢性肾脏疾病进展至终末期肾衰竭的共同通路,也是进展期糖尿病肾病的重要特征。高糖刺激氧化应激、病理性血管生成、肾素血管紧张素系统等异常导致肾脏血流动力学改变,肾小球高滤过,基底膜增厚、破坏,尿蛋白
9、排泄增多,刺激前炎症和前纤维化因子一、释放,使炎症细胞主要是巨噬细胞、淋巴细胞的浸润增加及炎症因子的释放,并在炎症因子刺激下激活成纤维细胞导致其增殖分化,使细胞外基质合成增加,最终导致纤维化的发生。氧化应激、血流动力学改变、足细胞功能、炎症细胞浸润、成纤维细胞的增殖、细胞外基质的合成和降解水平都是影响的主要因素,我们推测与以上途径相关的基因可能与糖尿病肾病的发病相关。研究说明长期的高糖刺激会导致氧化应激发生,氧化应激与糖尿病微血管并发症密切相关。动物及体内实验均证明增加肾小球蛋白滤过,而引起系膜增生、肾小球硬化【。细胞内活性氧,的主要来源是线粒体呼吸链,基因编码产物是锰超氧化物歧化酶,它常被转
10、运至线粒体基质清理超氧阴离子自由基,从而保护细胞免受氧化应激损害。多态性位点位于基因外显子,与锰超氧化物歧化酶转运至线粒体基质效率相关,影响细胞抗氧化应激的能力,比抗氧化应激能力更强【】。在丹麦型糖尿病患者中发现,基因多态性与糖尿病肾病密切相关【。【及等分别在日本和韩国型糖尿病肾病患者中发现,基因等位基因频率低于非糖尿病肾病患者,说明基因多态性与糖尿病肾病密切相关。糖尿病肾病早期肾小球高滤过和肾小球肥大与肾小球毛细血管增多有关,缺氧诱导的病理性血管新生通过多种途径参与糖尿病肾病的发生与开展。研究发现血管极处的新生血管使。予球肥大,肾小球毛细血管闭塞、纤维化发生频率增加,肾小管间质损害和尿蛋白排
11、泄增加 。糖尿病肾病早期缺氧、高糖刺天津医科大学硕士学位论文激下,.表达增高,它可促进内皮细胞增殖抑制细胞凋亡而导致内皮细胞增多引起血管新型。而在糖尿病肾病晚期却发现肾小球和肾小管周围表达.下降,伴随着肾小球和肾小管周围毛细血管的丧失,导致肾小球硬化和肾小管间质纤维化【。用小剂量处理足细胞特异表达最常见亚型转基因大鼠周后观察到,足细胞丧失、肾小球基底膜增厚、.结节性肾小球硬化、微动脉瘤形成,尿蛋白排泄增加,说明局部.水平决定糖尿病肾病的严重程度【】。基因多态性与糖尿病肾病密切相关【】,而在中国汉族人中未发现基因的单核苷酸多态性与型糖尿病的相关性【】,由于只是对基因单个位点多态性与糖尿病的关联分
12、析,有必要分析它与多个基因的交互作用。此外与肾脏血流动力学改变密切相关的尚有肾素血管紧张素系统,目前基因与糖尿病肾病中关联被广泛研究,但也有不同甚至相反的研究结果。足细胞屏障功能破坏参与糖尿病。肾病的发生开展。糖尿病肾病早期表现出肾小球足细胞数目及密度的减少,足细胞病变不仅导致大量蛋白尿的发生,而.且还与肾小球硬化和肾功能损害有关。非肌肉肌球蛋白重链,是由基因编码的蛋白,是构成上皮细胞完整性的主要成分,基因突变时,不能维持正常足细胞骨架,影响屏障功能,而导致肾脏损害。对欧美例.,例没有肾病,例正常人进行的基因分析说明 ,和与型糖尿病所致终末期肾病易感性相关【引,提示细胞骨架结构改变可影响糖尿病
13、肾病的发生。基因与基因编码的蛋白功能相似,主要功能是通过磷酸化切丝蛋白、蛋白来调节肌动蛋白丝和质膜结构的重新组装,调节肌动蛋白细胞骨架。基因编码蛋白属于激酶家族成员之一,以往研究说明激酶与神经、生殖、心血管系统病变及肿瘤密切相关】。而最近在非裔美籍人型糖尿病所致终末期。肾损害的全基因关联分析中。已证实基因及与之相邻的基因是.的关联基因【炎症细胞的浸润是炎症反响的特征性表现之一,也是发生开展的中心环节。在动物模型和人糖尿病肾病活检标本中均发现有巨噬细胞、淋巴细胞在肾小球和肾小管间质浸润,且肾问质纤维化程度与间质内炎症细胞浸润数量显著正相关【。炎症细胞的迁徙与炎症趋化因子/趋化因子受体、整合素如细
14、胞间粘附分子一、单核巨噬细胞趋化蛋白一、选择素选择素、选择素天津医科大学硕士学位论文等密切相关。微炎病症态在糖尿病肾病发病中具有重要作用,且近来的研究表明自身免疫反响亦参与糖尿病肾病的发病。基因在许多免疫相关细胞亚群上均有表达,可调节细胞、自然杀伤细胞和淋巴组织诱导细胞的开展,而参与免疫炎症反响。基因被证实与肿瘤相关,但其是否与糖尿病肾病发病相关尚少见报道。,上皮细胞间叶细胞转化,.是糖尿病进展性肾损害的重要环节之一,也是细胞外基质积聚、肾间质纤维化发生开展的核心环节之一。肾小管上皮细胞转分化,即肾小管上皮细胞失去其特有的细胞表型和特征,转化为肌成纤维细胞的过程,主要表现为.钙粘素.等上皮细胞标志物表达降低或消失,纤维结合蛋白、.等间充质细胞标志蛋白表达增高。转化生长因子 .,是公认的致纤维化因子,它在糖尿病肾病肾组织中表达增高,尤其在间质细胞和近端肾小管上皮细胞。.可通过各种信号通路发。此外,挥其对细胞外基质蛋白的影响,使胶原蛋白和纤维连接蛋白表达增加【.还可通过减少基质金属蛋白酶和增加组织金属蛋白酶抑制物产生而减少的降解。/通过增加.表达使纤连蛋白表达增高,介导糖尿病肾病肾小管间质纤维化【】。可见与糖尿病肾病肾脏纤维化密切相关,在动物实验【及基于家系【】基因研究均说明基因多态
