鸡大肠杆菌病的诊断及防治

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1、第 1章 前 言鸡大肠杆菌病(Avian?Colibac il losis)是由埃希氏大肠杆菌 (Escherichia coli)引起的细菌性传染病。由于大肠杆菌普遍存在于自 然界和动物肠道中，属条件性致病菌，当机体抵抗力下降，特别是应激情况下细菌的致病性即可表现出来， 使感染的鸡发病，本病常为某些传染病的并发病或继发病，因而临诊表现 形式十分复杂多样。本病在畜牧生产中发生广泛，也较难防治，是目前养鸡业中常见、多 发、死亡率高、危害极大的一种疾病。特别是近年来，随着畜禽养殖小区 的不断建设，规模化、集约化养鸡业的蓬勃发展，因为鸡的大肠杆菌病不 断蔓延，发病率持续上升，从而导致鸡只的死亡、种鸡

2、及蛋鸡的产蛋率下 降、种蛋孵化率降低、鸡只生长发育受阻、肉和蛋品质下降、治疗费用增 加等，给规模化、集约化养鸡生产造成了严重的经济损失，其对养禽业发 展构成的威胁极大，成为养鸡生产中最主要的疫病之一。因此，采取有效 措施防治鸡大肠杆菌病，减少损失，是集约化养鸡业迫切需要解决的重要 问题。本次试验无菌采取疑似大肠杆菌病的病、死鸡的心血、肝、脾、肾 进行病原菌的分离、生化鉴定和药敏试验。生化鉴定结果显示引起试验鸡 只发病的病原为大肠杆菌，药物敏感性试验结果显示，我地区大肠杆菌对 硫酸安普霉素、阿米克星敏感，曾经对致病性大肠杆菌敏感的药物出现了 不敏感和不同程度的耐药，提示在以后的肉鸡生产中应慎用抗

3、生素，在使 用药物治疗大肠杆菌病时，要充分利用药敏试验，为鸡大肠杆菌病的防治 提供科学的理论依据，大肠杆菌是条件性致病菌，防制该病的关键在于加 强饲养管理，做好各个环节的卫生消毒，落实好卫生防疫措施，减少各种 诱发因素。【病原】大肠埃希氏杆菌(Escherichia?coli)为革兰氏阴性的短小杆 菌，不形成芽胞，有的有荚膜，大小为23umX0.6um, 般有周鞭毛， 大多数菌株具有运动性。郝永清(1996)应用透射电镜观察到1，致病性大肠 埃希氏菌在体外适宜条件下培养可产生菌毛，而非致病性菌株未见菌毛产 生。致病菌具有菌毛及不同的血凝活性。不同地区有不同的血清型，同一 地区不同鸡场有不同血清

4、型，甚至同一鸡场同一鸡群可以同时存在多个血 清型，在家禽中常见的主要血清型有01、02、O36和078等血清型2。近年 研究结果表明，目前我国已报道的鸡的致病性大肠埃希氏杆菌血清型50 多 个。大肠埃希氏杆菌在自然界中分布极广，可以说凡是有哺乳类动物和禽 类活动的环境，其空气、水源和土壤中均有本菌存在的可能。大肠埃希氏 杆菌对外界环境因素的抵抗力属中等，对物理和化学因素较敏感，55Clh 或60C20min被杀死，120C高温消毒立即死亡。在畜禽舍内，大肠杆菌在 水、粪便和尘埃中可存活数周或数月之久。本菌对石炭酸和甲酚高度敏感 但粘液和粪便的存在会降低这些消毒剂的效果。【流行病学】 本病一年四

5、季均可发生，尤以冬季及夏季多发。常与慢 性呼吸道病，新城疫病，法氏囊，传染性支气管炎，马立克，支原体，沙 门氏菌，传然性鼻炎，球虫，腹水综合症等混合感染。但与饲养管理水平 环境卫生，防治措施的效果，应激等因素密切相关。发病日龄一般幼雏和 中雏发生较多。发病较早的为4日龄、7 日龄和 910 日龄，通常以1 月龄 前后的幼鸡发病为多，日龄较大的鸡因不同原因也会发生本病。发病率和 死亡率较高。虽然因血清型及菌株的毒力、有无并发或继发病、采取措施 是否及时有效而差异颇大，但调查表明，该病发病急;发病率为11%69%； 死亡率为3.8%72.9%；致死率为40.2%90.3%。病程因日龄、饲养 管理水

6、平、环境卫生、防治措施的效果及有无继发其它疫病等因素的影响2-7d不等，雏鸡一般发现拉稀粪12天死亡，大鸡病程稍长。病鸡和带菌 鸡是主要的传染源，病原通过传染的蛋壳，病鸡的分泌物便被污染的饲料 饮水食具垫料及粉尘而传播，鼠是本病的携带者。传播途径主要有：消 化道：饲料和饮水为本菌污染，尤以水源被污染引起发病最为常见；呼 吸道：沾有本菌的尘埃被易感鸡只吸入，进入下呼吸道后侵入血流而引起 蛋壳穿透种蛋产出后为粪便等脏物沾污，在蛋温降至环境温度的过程中, 蛋壳表面污染的大肠杆菌很容易穿透蛋壳进入蛋内，这种种蛋常于孵化后 期引起死胚，或刚孵出的小鸡即发生本病；交配：患本病的公、母鸡与 易感鸡交配可以传

7、播本病；经蛋传播：患有大肠杆菌性输卵管炎的母鸡，在蛋的形成过程中本 菌即可进入蛋内，造成本病经蛋垂直传播。【临床症状及病变】 鸡大肠杆菌没有特征的临床表现，根据症状和病 变可能分为多种病型：大肠杆菌败血症，脐炎，肝周炎，气囊炎，大肠杆 菌性肉芽肿，关节炎，卵黄性腹膜炎，输卵管炎，全眼炎，脑炎，肠炎。 但以大肠杆菌败血症，气囊炎，脐炎，卵黄性腹膜炎为多见。其他类型较 少发生，共同症状为病鸡精神萎靡，缩头闭眼，饮水增多，采食减少，羽 毛粗乱消瘦，侵害呼吸道后出现呼吸困难粘膜发绀；侵害消化道后出现腹 泻，排绿白色或黄绿色性稀粪便，侵害关节后表现为跗关节肿大，在关节 的附近有大小不一的水泡和脓疮，病鸡

8、跛行；侵害眼时，眼前房积脓有黄 白色的渗出物，眼睑肿胀，甚至失明，出现神经症状，头颈震颤仰头，扭 头，陆续出现死亡。1败血症型：5-9周龄肉鸡常发此病，夏季多发，病雏呼吸困难，精 神不振，下痢粪便呈白色或黄绿色食欲减退或拒食腹部胀满。解剖时可闻 到特殊臭味腹腔内大块黄色块状渗出物，肝脏肿大，呈紫红色或铜绿色， 表面有散在的白色小坏死灶，纤维性心包炎，心包浑浊增厚，心包腔内充 满大量淡黄色液体，心包膜及心外膜上白色纤维蛋白附着，严重者可见心 包膜与心外膜粘连，肠粘膜弥漫性出血，整个肠管呈紫红色，肾脏体积肿 大，呈紫红色肾脏出血，水肿，死亡率一般为 5%-20% 。2脐炎：俗称“大肚脐”，主要发生

9、在出壳初期，病雏脐孔红肿并常 有破溃，后腹涨大，呈红色或青紫色，精神沉郁少食或拒食，粪便呈黄白 色，稀薄，腥臭，病雏 1-2 内死亡或被淘汰。剖检脐孔开张，卵黄吸收不 良，或卵黄没有吸收，卵囊充血出血，囊内卵黄液黏稠或稀薄多呈黄绿色3肝周炎：肝脏肿大，有时可见散在的淡黄色坏死灶，肝包膜略有增 厚，与霉形体混合感染的病鸡，多见肝脏肿大，肝包膜增厚，不透明呈黄 白色，易剥脱，在肝的表面形成的这种纤维素性膜局部发生，严重的整个 肝被此膜包裹，此膜易剥落后肝呈紫褐色。4气囊炎：主要发生于4-12周龄的雏鸡，但6-8周龄发病率最高， 本病通常是大肠杆菌和其他病原微生物例如霉形体，传染性支气管炎，新 城疫

10、，混合感染所致。死亡主要发生在发病的头几天，如果耐过最初的感 染，可迅速康复，但少数持续丧失食欲的病鸡消瘦，最后死亡。气囊炎也 是常见的转化腹膜炎等病之一，其表现为气囊浑浊、囊壁增厚呈灰黄色囊 腔内又数量不等的黄色纤维性渗出物或干酪样物，更为严重者可见腹气囊 肌肉层内形成包腔内可大量黄白色块状渗出物。5肉芽肿：较少看到主要侵害雏鸡或成年鸡，以小肠，盲肠浆膜肠系 膜可见到肉芽肿结节，肠粘连不易分离，心、肝脏面发现大小不一的肉芽 肿结节。镜检：结节中央为大量核碎裂的坏死区，其外环绕上皮样细胞带 多核巨细胞少见，最外层为纤维组织包裹，其间有异嗜性粒细胞侵润。6关节炎型：多见于幼稚感染后慢性经过，可见

11、跗关节和趾关节肿大， 跛行，两腿向外展，关节附近有大小不一的水泡，穿刺后，可见黄色浑浊 液体向外流出，关节腔中纤维蛋白渗出，浑浊的关节囊滑膜肿胀增厚。7卵黄性腹膜炎：较多的成年鸡可见到腹部膨大下垂，直立呈企鹅姿 势，多是由卵巢，卵泡和输卵管感染发炎，进一步发展卵黄性腹膜炎，故 鸡病大多数突然死亡，剖开腹腔可见，腹腔中充满大量淡黄色腥臭的液体 和破溃的卵黄，腹腔表面常覆盖了一层蛋黄色凝固的块状纤维性渗出物， 卵黄液广泛地布于肠道表面，稍慢死亡的鸡腹腔内又多量纤维表样物粘在 肠道和肠系膜上腹膜发炎粗糙，肠粘连，大量腹水，肠浆膜散在针头大小 的点状出血，卵泡中的卵泡变形，破裂呈灰色，褐色或酱色等不正

12、常色泽 有的卵泡皱缩，滞留在腹腔中的卵泡，如果时间较长即凝固或硬块，破裂 的卵黄则凝结或大小不等的碎片，输卵管粘膜发炎，针头状出血点淡黄色 纤维性渗出沉着，器官腔中也有蛋白色纤维性凝片。8输卵管炎：产蛋鸡常发生慢性输卵管炎，鸡冠萎缩，剖检可见输卵管高度扩张，粘膜充血，管腔内有不等量的干酪样物，严重时输卵管内积有较大块状物，输卵管变薄，块状物呈黄白色表面不光滑，切面呈轮层状较干燥有的腹腔内可见有灰白色的软壳蛋，主要表现为产蛋量不高和产蛋高峰上不去，产蛋高峰维持时间短，蛋重下降，蛋壳表面有大小不一的血 点，鸡群死淘率增加。9全眼炎：是急性败血症恢复期的一种症状，常为单侧，或双侧散发， 眼脸肿胀，有

13、白色干酪样渗出物，眼粘膜潮红、流泪、角膜浑浊，严重者 失明，眼球萎缩，镜检：全眼都有单核性细胞浸润，脉络膜充血，视网膜 完全破坏。10脑炎型：雏鸡及产蛋鸡多发，脑膜充血，出血。脑实质水肿，脑 膜剥离，脑壳软化，中性细胞和单核细胞浸润，脉络膜充血，视网膜完全 破坏，侵害大脑时出现神经症状，表现头颈震颤，角弓反张，呈阵发性发 作。11肠炎型：鸡消化不良，鸡体消瘦，腹膜充血、出血，肠浆膜变厚 形成慢性肠炎，有的可形成慢性腹膜炎，病鸡表现腹泻，拉黄绿或黄白稀 粪，食欲下降，消瘦。第 2 章 试验材料与方法2.1 病料来源2010 年 9 月高密某孵化场送检的疑似大肠杆菌的病料若干，病死鸡死亡时间不超过

14、 24h。2.2 采取病料病料采集。从新鲜尸体中无菌操作采样。采集心脏和肝脏.注射器自心脏采血 1ml 用于细菌分离培养和肉汤增 殖。用烧过的外科手术刀片烧烙脏被膜后。再用灭菌棉拭子或接种 3 环刺 入肝实质取肝样做分离培养。如出现脓性纤维素性渗出物，则用棉拭子从 心包腔、气囊以及关节腔中取样做细菌分离。2.3 涂片镜检无菌挑取病鸡的肝脏直接涂片，进行革兰氏染色 。2.4 细菌分离培养无菌采集病死鸡的心肝组织，分别接种在普通琼脂平板、麦康凯、双SS各一个，37C恒温培养24h培养观察后。挑取表面光滑，边缘整齐，灰 白色半透明的单个微隆起小菌落，划线接种肉汤中，在37C恒温培养24h， 三糖铁琼

15、脂培养，将可凝菌落接种于三糖铁琼脂斜面培养基上，接种时先 涂布于斜面，再刺接种于管后观察 3 。2.5 生化试验2.5.1 糖发酵试验取可疑菌分别接种葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和蔗糖发酵管，37C 培养23d，观察结果。2.5.2 吲哚试验取可疑菌接种蛋白胨水，37C培养23d，加入吲哚指示剂，观察结果4 。2.5. 3MR试验和VP试验取可疑菌接种葡萄糖蛋白胨水，37C培养23d，分别加入MR和VP指 示剂，观察结果。2.5.4枸橼酸盐试验取可疑菌接种枸橼酸盐培养基上，37C培养1824h,观察结果2.5.5硫化氢试验取可疑菌接种醋酸铅琼脂，37C培养1824h,观察结果。2.6药敏试验

16、用常规纸片法进行。直接挑取已分离出的菌落3铂金耳，置于装有34 mL生理盐水中，制成混悬液，再用灭菌的棉花拭子沾取菌液直接涂布于 新鲜普通琼脂平板上，将药物纸片均匀贴布于培养基表面，纸片间距不能 小于20 mm，37C培养24 h,观察抑菌结果。测量药物纸片的抑菌圈直径。抑菌圈直径大于20 mm者为高度敏感，抑菌圈直径1620 mm为中度敏感， 抑菌圈直径1115 mm者为低度敏感，抑菌圈直径小于10 mm者为耐药。第 3 章 试验结果分析3.1镜检结果 取标本片用油镜观察中等大小两端钝圆的革兰氏阴性杆菌，无芽胞菌 株有肉芽、鞭毛和菌毛，可活泼运动。3.2细菌分离鉴定结果：经37C恒温培养24h后，形成中等大小圆形，微凸起边缘整齐直径为1-3mm表面光滑湿润，呈浅灰色，透明菌落。麦康凯琼