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1、普通生物物学实验验讲义（20111年版）绍兴文理理学院生生命科学学学院普通生物物学课程程组编移液器的的使用方方法按照下列列步骤可可以用移移液器正正确而准准确地移移取液体体：1. 选择一支支量程合合适的移移液器。大多数可调式移液器只能在特定量程范围内准确移取液体，不能移取低于说明书上最低的液体。一定不要试图移取超过最大量程的液体，否则会损坏移液器。常用移液液器有三三种量程程：1000ml1mll，100ml1000ml，00.5 ml10ml。2. 设置移液液量。通通过旋钮钮设置刻刻度：刻刻度一般般由三-四四个数字字组成，从从上往下下读或从从左往右右读，用用黑色的的调节轮轮调节容容积（图图2-4
2、4）。这这三个数数字是容容积的前前三位数数，由移移液器的的最大容容积（标标在推动动按钮上上面）决决定。3. 将新的一一次性枪枪头装在在吸液杆杆上。二二者要相相匹配，并并且安装装正确。用用力推动动，并轻轻轻旋转转枪头使使之套紧紧，否则则，移取取的液体体体积将将少于设设定的体体积，溶溶液也会会从枪头头上往下下滴。枪枪头通常常装在盒盒子里，使使用方便便。如果果需要无无菌条件件，则整整个过程程都要按按无菌操操作进行行。4. 检验移液液量。用用移液器器吸取一一定体积积的去离离子水，放放在天平平上称重重，假设设1mgg水体积积为1uul （1mm3），测量误差应在1%的范围内。对于微量液体，可多次移取，如
3、移取20次50ul的去离子水，质量应为100mg。如果移液器不准，吸液量显著多于或少于设定体积，可改用校准的移液器，或将移液刻度相应地调大或调小，进行校准（实际移液量比移液器的显示值更重要）。如果移液器不精确，每次移取的体积变化更大，就要进行维修，校准。5. 吸取一定定体积的的液体。手握移液器，按下推动按钮，直到遇到一个阻力（第一止点），观察所吸液体页面，将枪头垂直浸入液体中（注意不能过深以致液体沾到移液器），缓慢平稳地松开拇指，同时观察吸入液体有无气泡，停1S左右，待液体吸入后，取出移液器。枪头外壁不应附有液滴。6. 目测吸入入枪头的的液体体体积是否否合理。如100ul体积约占P20型枪头容
4、积的一半。如果移液器保持竽握取， 枪头安装正确，则不应有液滴滴下。7. 释放液体体。将枪枪头头部部靠在器器壁上，约约成100200倾角。慢慢慢按下下推动按按钮直到到终点，完完全排出出液体，保保持推动动按钮至至终点的的状态取取出移液液器。8. 退下枪头头。按下下卸枪头头按钮（有有的移液液器不带带卸枪头头器），退退下枪头头。如果果枪头被被污染了了，可直直接退到到盛有消消毒液功功废液的的容器里里。如果果不重复复取液，更更换新的的枪头，重重复上面面的第（55）（88）步。移移液器必必须卸掉掉枪头后后才能放放在移液液器架上上。实验一普普通光学学显微镜镜的构造造、使用用方法及及观察【实验目目的】1. 了了
5、解显微微镜的构构造和各各部分的的作用，掌掌握显微微镜的使使用技术术和保养养措施2. 学学会简易易临时玻玻片的制制作方法法和生物物绘图方方法【实验原原理】（一）显显微镜的的主要构构造普通光学学显微镜镜的构造造主要分分为三部部分：机机械部分分、照明明部分和和光学部部分。1.机械械部分（1）镜镜座：是是显微镜镜的底座座，用以以支持整整个镜体体。（2）镜镜柱：是是镜座上上面直立立的部分分，用以以连接镜镜座和镜镜臂。（3）镜镜臂：一一端连于于镜柱，一一端连于于镜筒，是是取放显显微镜时时手握部部位。（4）镜镜筒：连连在镜臂臂的前上上方，镜镜筒上端端装有目目镜，下下端装有有物镜转转换器。（5）物物镜转换换器
6、(旋旋转器)：接于于棱镜壳壳的下方方，可自自由转动动，盘上上有34个圆圆孔，是是安装物物镜部位位，转动动转换器器，可以以调换不不同倍数数的物镜镜，当听听到碰叩叩声时，方方可进行行观察，此此时物镜镜光轴恰恰好对准准通光孔孔中心，光光路接通通。（6）镜镜台(载载物台)：在镜镜筒下方方，形状状有方、圆圆两种，用用以放置置玻片标标本，中中央有一一通光孔孔，我们们所用的的显微镜镜其镜台台上装有有玻片标标本推进进器(推推片器)，推进进器左侧侧有弹簧簧夹，用用以夹持持玻片标标本，镜镜台下有有推进器器调节轮轮，可使使玻片标标本作左左右、前前后方向向的移动动。（7）调调节器：是装在在镜柱上上的大小小两种螺螺旋，
7、调调节时使使镜台作作上下方方向的移移动。粗调节节器(粗粗螺旋)：大螺螺旋称粗粗调节器器，移动动时可使使镜台作作快速和和较大辐辐度的升升降，所所以能迅迅速调节节物镜和和标本之之间的距距离使物物象呈现现于视野野中，通通常在使使用低倍倍镜时，先先用粗调调节器迅迅速找到到物象。细调节节器(细细螺旋)：小螺螺旋称细细调节器器，移动动时可使使镜台缓缓慢地升升降，多多在运用用高倍镜镜时使用用，从而而得到更更清晰的的物象，并并借以观观察标本本的不同同层次和和不同深深度的结结构。2照明明部分装在镜台台下方，包包括反光光镜，集集光器。（1）反反光镜：装在镜镜座上面面，可向向任意方方向转动动，它有有平、凹凹两面，其
8、其作用是是将光源源光线反反射到聚聚光器上上，再经经通光孔孔照明标标本，凹凹面镜聚聚光作用用强，适适于光线线较弱的的时候使使用，平平面镜聚聚光作用用弱，适适于光线线较强时时使用。（2）集集光器(聚光器器)位于于镜台下下方的集集光器架架上，由由聚光镜镜和光圈圈组成，其其作用是是把光线线集中到到所要观观察的标标本上。聚光镜镜：由一一片或数数片透镜镜组成，起起汇聚光光线的作作用，加加强对标标本的照照明，并并使光线线射入物物镜内，镜镜柱旁有有一调节节螺旋，转转动它可可升降聚聚光器，以以调节视视野中光光亮度的的强弱。光圈(虹彩光光圈)：在聚光光镜下方方，由十十几张金金属薄片片组成，其其外侧伸伸出一柄柄，推
9、动动它可调调节其开开孔的大大小，以以调节光光量。3.光学学部分（1）目目镜：装装在镜筒筒的上端端，通常常备有223个个，上面面刻有55、100或155符号以以表示其其放大倍倍数，一一般装的的是100的目镜镜。（2）物物镜：装装在镜筒筒下端的的旋转器器上，一一般有334个个物镜，其其中最短短的刻有有“10”符号号的为低低倍镜，较较长的刻刻有“40”符号号的为高高倍镜，最最长的刻刻有“1000”符号号的为油油镜，此此外，在在高倍镜镜和油镜镜上还常常加有一一圈不同同颜色的的线，以以示区别别。在物镜上上，还有有镜口率率(N.A.)的标志志，它反反应该镜镜头分辨辨力的大大小，其其数字越越大，表表示分辨辨
10、率越高高，各物物镜的镜镜口率如如下表：物镜 镜口口率(NN.A.) 工作作距离(mm)10 0.25 5.4040 0.65 0.39100 11.300 00.111表中的工工作距离离是指显显微镜处处于工作作状态(物象调调节清楚楚)时物物镜的下下表面与与盖玻片片(盖玻玻片的厚厚度一般般为0.17mmm)上上表面之之间的距距离，物物镜的放放大倍数数愈大，它它的工作作距离愈愈小。显微镜的的放大倍倍数是物物镜的放放大倍数数与目镜镜的放大大倍数的的乘积，如如物镜为为10，目镜镜为100，其放放大倍数数就为11010=1000。（二）显显微镜的的使用方方法1低倍倍镜的使使用方法法（1）取取镜和放放置：
11、显显微镜平平时存放放在柜或或箱中，用用时从柜柜中取出出，右手手紧握镜镜臂，左左一手托托住镜座座,将显显微镜放放在自己己左肩前前方的实实验台上上，镜座座后端距距桌边112寸寸为宜，便便于坐着着操作。（2）对对光：用用拇指和和中指移移动旋转转器(切切忌手持持物镜移移动)，使使低倍镜镜对准镜镜台的通通光孔(当转动动听到碰碰叩声时时，说明明物镜光光轴已对对准镜筒筒中心)。打开开光圈，上上升集光光器，并并将反光光镜转向向光源，以以左眼在在目镜上上观察(右眼睁睁开),同时调调节反光光镜方向向，直到到视野内内的光线线均匀明明亮为止止。（3）放放置玻片片标本：取一玻玻片标本本放在镜镜台上，一一定使有有盖玻片片
12、的一面面朝上，切切不可放放反，用用推片器器弹簧夹夹夹住，然然后旋转转推片器器螺旋，将将所要观观察的部部位调到到通光孔孔的正中中。 （4）调调节焦距距：以左左手按逆逆时针方方向转动动粗调节节器，使使镜台缓缓慢地上上升至物物镜距标标本片约约5毫米米处，应应注意在在上升镜镜台时，切切勿在目目镜上观观察。一一定要从从右侧看看着镜台台上升，以以免上升升过多，造造成镜头头或标本本片的损损坏。然然后，两两眼同时时睁开，用用左眼在在目镜上上观察，左左手顺时时针方向向缓慢转转动粗调调节器，使使镜台缓缓慢下降降，直到到视野中中出现清清晰的物物象为止止。如果物象象不在视视野中心心，可调调节推片片器将其其调到中中心(
13、注注意移动动玻片的的方向与与视野物物象移动动的方向向是相反反的)。如如果视野野内的亮亮度不合合适，可可通过升升降集光光器的位位置或开开闭光圈圈的大小小来调节节，如果果在调节节焦距时时，镜台台下降已已超过工工作距离离(55.400mm)而未见见到物象象，说明明此次操操作失败败，则应应重新操操作，切切不可心心急而盲盲目地上上升镜台台。2高倍倍镜的使使用方法法（1）选选好目标标：一定定要先在在低倍镜镜下把需需进一步步观察的的部位调调到中心心，同时时把物象象调节到到最清晰晰的程度度，才能能进行高高倍镜的的观察。（2）转转动转换换器，调调换上高高倍镜头头，转换换高倍镜镜时转动动速度要要慢，并并从侧面面进
14、行观观察(防防止高倍倍镜头碰碰撞玻片片)，如如高倍镜镜头碰到到玻片，说说明低倍倍镜的焦焦距没有有调好，应应重新操操作。（3）调调节焦距距：转换换好高倍倍镜后，用用左眼在在目镜上上观察，此此时一般般能见到到一个不不太清楚楚的物象象，可将将细调节节器的螺螺旋逆时时针移动动约0.511圈，即即可获得得清晰的的物象(切勿用用粗调节节器!)如果视野野的亮度度不合适适，可用用集光器器和光圈圈加以调调节，如如果需要要更换玻玻片标本本时，必必须顺时时针(切切勿转错错方向)转动粗粗调节器器使镜台台下降，方方可取下下玻片标标本。3油镜镜的使用用方法（1）在在使用油油镜之前前，必须须先经低低、高倍倍镜观察察，然后后
15、将需进进一步放放大的部部分移到到视野的的中心。（2）将将集光器器上升到到最高位位置，光光圈开到到最大。（3）转转动转换换器，使使高倍镜镜头离开开通光孔孔，在需需观察部部位的玻玻片上滴滴加一滴滴香柏油油，然后后慢慢转转动油镜镜，在转转换油镜镜时，从从侧面水水平注视视镜头与与玻片的的距离，使使镜头浸浸入油中中而又不不以压破破载玻片片为宜。（4）用用左眼观观察目镜镜，并慢慢慢转动动细调节节器至物物象清晰晰为止。如果不出出现物象象或者目目标不理理想要重重找，在在加油区区之外重重找时应应按：低低倍高倍油镜程程序。在在加油区区内重找找应按：低倍油镜程程序，不不得经高高倍镜，以以免油沾沾污镜头头。（5）油油镜使用用完毕，先先用擦镜镜纸沾少少许二甲甲苯将镜镜头上和和标本上上的香柏柏油擦去去，然后后再用干干擦镜纸纸擦干净净。（三）显显微镜使使用的注注意事项项1持镜镜时必须须是右手手握臂、左左手托座座的姿势势，不可可单手提提取，以以免零件件脱落或或碰撞到到其它地地方。2轻拿拿轻放，不不可把显显微镜放放置在实实验台的的边缘，以以免碰翻翻落地。3保持持显微镜镜的清
