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1、水质叶绿素a的测定1. 定义 叶绿素是植物光合作用中的重要光合色素。通过测定浮游植物叶绿素，可 掌握水体的初级生产情况，在环境监测中，可将叶绿素a含量作为湖泊富营养化 的指标之一。2. 水样的采集与保存可根据工作的需要进行分层采样或混合采样。湖泊、水库采样 500mL,池 塘300mL,采样量视妇幼植物分布而定。若浮游植物数量较少，也可采样1000mL。 采样点及采样时间同“浮游植物”。水样采集后应放在阴凉出，避免日光直射。最好立即进行测定的预处理，如需 经过一段时间（448h）方可进行预处理，则应将水样保存在低温（04C）避光 处。在每升水样中加入1%碳酸镁悬浊液1mL，以防治酸化引起色素溶
2、解。水样在冰 冻情况下（-20C）最长可保存30d。3. 仪器和设备3.1分光光度计。3.2真空泵。3.3离心机。3.4乙酸纤维滤膜（孔径0.45 m）。3.5抽滤器。3.6组织研磨器或其他细胞破碎器。3.7碳酸镁粉末。3.8 90%丙酮。4. 试验程序4.1以离心或过滤浓缩水样，在抽滤器上装好乙酸纤维滤膜。倒入定量体积的水样进 行抽虑，抽虑时负压不能过大（约为50kPa）。水样抽完后，继续抽1 2min,以减 少滤膜上的水分。如需短期保存12d时，可放入普通冰箱冷冻，如需长期保存（30d），则应放入低温冰箱（-20T）保存。4.2取出带有浮游植物的滤膜，在冰箱内低温干燥68h后放入组织研磨器
3、中，加入受凉碳酸镁粉末及23mL 90%丙酮，充分研磨，提取叶绿素a。用离心机 （30004000r/min）离心10min。将上清液倒入5mL或10mL容量瓶中。4.3在用23mL的90%的丙酮，继续研磨提取，离心10min,并将上清液再转入 容量 瓶中。重复12次，用90%的丙酮定容为5mL或10mL，摇匀。4.4将上清液在分光光度计上用1cm光程的比色皿，分别读取750nm、663nm、 645nm、630nm波长的吸光度，并以90%的丙酮作空白吸光度测定，对样品吸光度 进行校正。5. 计算方法叶绿索3的含量按如下公武计算；（1l.64x （Dg 币-D 妙）-2J6 只 （D 期* 卫丁牝）+也 1 * 轴门 右“叭式中V一水样体积CL）； D一光度；仍一一提取液宦容JG的体积tn3；5 匕色皿尤程Gmh6. 参考文献水质叶绿素a的测定水和废水监测分析方法（第四版）国家环境保护总局(2002 年)5.1.5 ()
