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1、实验七丙酮酸含量的测定一、实验目的掌握植物组织中丙酮酸含量测定的原理和方法。二、实验原理植物样品中的组织液，用三氯乙酸去蛋白质后，其中所含的丙酮酸可与2,4二硝基苯肼作用，生成丙酮酸2,4二硝基苯腙，后者在碱性溶液中呈樱红色，其颜色可用分光光度计测量，与已知丙酮酸标准曲线进行比较，即可求得样品中丙酮酸的含量。三、实验器材与试剂1、.实验器材分光光度计；研钵；具塞刻度试管：20mL8;容量瓶：100mL2;移液管：1mL15mL4;量筒：10mL1;离心机；天平；大蒜、大葱或洋葱2、试剂（1）8%三氯乙酸（当日配制置冰箱中备用）2）1.5mol/L氢氧化钠（3）0.1%2,4一二硝基苯底:称取2
2、.4一二硝基苯肥100mL溶于2mol/LHCl中配成100mL溶液，盛入棕色试剂瓶，保存于冰箱内。（4）丙酮酸钠四、实验操作步骤1 .丙酮酸标准曲线的制作:称取丙酮酸钠7.5mg于烧杯中，用8%E氯乙酸溶解，转入100mL容量瓶中，并用8%E氯乙酸定容，此液为60仙g/mL的丙酮酸原液。取6支试管，按下表数据配制不同浓度的丙酮酸标准液:管号123456内酮酸原液量（mD00.61.21.82.43.08%E氯乙酸量（mD3.02.41.81.20.60内酮酸浓度（卜g/mL）012243648601.5mol/L的氢氧化钠溶液，摇匀显色，在520nmfe长下比色。做标准曲线2 .植物样品组织液的提取:称取植物样品（大蒜、大葱或洋葱）5g,于研钵中加入少许石英沙及少量8%E氯乙酸，仔细研成匀浆，再用8%E氯乙酸洗入100mL容量瓶中（沙留在研钵内），定容至刻度。静置30min,取10mL浆液离心（4000r/min）10min,取上精液备用。3 .组织液中丙酮酸的测定1.5mol/L氢氧化钠溶液，摇匀显色。在520nm长下比色，记录吸光度，在标准曲线上查得丙酮酸的含量。五、结果处理样品中百酮酸含量（mg/g鲜重）=A式稀释倍数样品重如）1000式中：A一标准曲线中查得的丙酮酸克数。六、思考题：测定丙酮酸含量的基本原理是什么？
