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1、微生物实验报告题目：霉菌的形态观察姓名：余振洋学号：200900140156系年级：09生科3班组别：周三4组 同组者：张刚刚、岳永胜、俞华军、谢英健时间：2010年11月10日一、【实验目的】1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法2、了解四类常见霉菌（曲霉、毛霉、青霉、根霉）的基本形态特征二、【实验原理】1、霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一 定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝） 及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常 比细菌和放线菌粗得多（约310Mm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，
2、因此，用低倍显微镜即可观察。2、观察方法观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法 和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。3、载玻片培养观察法（小室培养法）用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌 即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将 载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态， 还便于观察不同发育期的培养物。三、【实验器材】1、菌种：曲霉（Aspergillus sp.），青霉，根霉（Rhizopus sp.），毛霉（Mucor sp.），培养7d的马
3、铃薯琼脂平板培养物2、培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表）3、仪器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等四、【操作步骤】1、载玻片培养观察法（小室培养法）（1）、培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖， 包扎后于110C灭菌2030分钟，烘干备用。（2）、琼脂薄片的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各67ml注入另两个灭菌平皿中，使之凝固成薄层。通过无菌操作，用解剖刀 将其切成1cmx1cm的琼脂块，并将其移至上述培养室 中的载玻片上（
4、每片放两块）。(3)、接种：通过无菌操作，用接种环从斜面培养物上挑取很少量的孢子，接种 于培养小室中琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块 上。(3) 、培养：通过无菌操作，在培养小室中的圆滤纸上加23ml灭菌的20 %的甘油(用于保持平皿内的湿度)，盖上皿盖，27C正置培养一 周。(4) 、镜检：根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜。五、【注意事项】1、载玻片培养观察中，注意无菌操作，接种量要少，同时尽可能将分散的孢子 接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察。六、【实验结果及绘图】菌种曲霉根霉毛霉青霉营养菌丝具有菌丝无隔、多菌丝无隔、多菌
5、丝有横分隔；气生菌核、分枝状，核、分枝状，隔，分生孢丝的一部分形有匍匐菌丝和无假根或匍匐子梗亦有横成长而粗糙的假根。在假根菌丝。菌丝体隔，光滑或分生孢子梗，的上方直立地上直接生出单粗糙。基部顶端膨大成球生长出一至数生、总状分枝无足细胞，状顶囊，表面根孢囊梗，其或假轴状分枝顶端不形成辐射出一层或顶端膨大成球的孢囊梗。各膨大的顶两层小梗，小形孢子囊。囊分枝顶端着生囊，其分生梗上着生成串的基部有囊球形孢子囊，孢子梗经过形态特征的球形分生孢托，中间有球无囊托。多次分枝，子。分生孢子形或半球形囊产生几轮对梗生于足细胞轴。囊内产大称或不对称上，并通过足量孢囊孢子，的小梗，形细胞与营养菌有性生殖时由如扫帚，
6、称丝相连。不同性别的菌为帚状体。丝或匍匐菌丝小梗顶端有上生出配子 囊，配子囊双 双异宗配合形 成一接合孢 子。孢子。四种霉菌形态特征表【绘图】毛霉菌10x10毛霉菌局部放大图球状顶囊及孢子梗10x40根霉菌 10x10根霉菌假根10x40青霉菌10x10青霉菌10x10七、【思考题】1、黑曲霉和黑根霉在形态特征上有何区别？答：根霉属：菌丝无隔，菌丝体产生匍匐枝，匍匐枝末端长有假根。曲霉属：菌丝体分枝并具有横隔，分生孢子从分化了的菌丝（具有厚壁的足 细胞）上直立长出。分生孢子的形状、大小、颜色和纹饰都是鉴别 曲霉种的重要依据。【附表】马铃薯培养基配方（PDA）马铃薯200g葡萄糖（蔗糖）20g琼脂2225g水1000mlPH自然马铃薯去皮，切成块煮沸2030min，然后用1层及6层纱布过滤，再加糖及琼 脂，溶化后补水至所需量，110C灭菌2030min。
