常用染色液的配制

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1、常用染色液的配制1. 吕氏(Loefflev)美蓝染色液A 液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%K0H溶液取 A 液 30ml、B 液 0.1ml 与 100ml 蒸馏水混合。2. 石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入 95%酒精,继续研磨使其溶解、 配成 A 液。B 液:5%石炭酸溶液取 A 液 10ml、B 液 90ml 混合即可。一般可将此溶液稀释 5-10 倍使用 但稀释液易变质失效,一次不宜多配。3. 革兰氏(gram)染色液(1) 草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Cry

2、stal violet)95%酒精溶液B 液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液 取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。(2) 路哥氏(Lugol)碘液:碘片l.Og、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部 溶解后,加够水即成。(3) 95%酒精溶液(4) 蕃红(沙黄) 复染液:2.5% 蕃红(Safranine 0)95% 酒精溶液。取此液 10ml 与 90ml 蒸馏水混匀即成。4. 芽孢染色液(1) 5% 孔雀绿(Malachi te green)溶液。(2) 0.5%蕃红溶液。(3) 苯酚品红溶液称取

3、11g 碱性品红溶于 100ml 无水酒精中。再取上述溶液 10ml 与 100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。(4) 黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。5. 荚膜染色液(1) 黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入40%甲醛 0.5%(v/v)作防腐剂。(2) 蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。6. 鞭毛染色液A 液:单宁酸 5.0g、FeC131.5g、蒸馏水 100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。配

4、好后应当日使用, 次日即效果差, 第三日则不能使用。B液:2%AgNO3溶液待AgNO3溶解后,取出10ml备用。向其余的90ml AgNO3中滴入浓NH4OH,使之成为很浓厚的悬浮液,再继续滴加NH4OH,直到新形成 的沉淀又重新刚刚溶解为止。再将 10ml 德用的 AgNOa 溶液慢慢滴入 此时会出理薄雾,轻轻摇动后,薄雾状沉淀又消失,再滴入AgNO3溶 液直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重,此染液可使用一周;如雾重, 则银盐沉淀出,不宜使用。7. 乳酸石炭酸棉蓝染色液石炭酸2.0g、甘油40ml、乳酸(密度1.21)20ml、蒸馏水20ml、棉蓝(Cotton bl

5、ue)0.05g石炭酸在蒸馏水中加热溶解,然后加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,使其溶解即 成。8. 富尔根氏(Feulgen)核染色液(1) 席夫氏(Schiff)试剂将1g碱性复红加于200ml煮沸的蒸馏水中,振荡5分钟,冷却至50C左右过滤。加入1.0M HC1 20ml,摇匀。待冷至25C时,加Na2S205(偏 重亚硫酸钠)3g,摇匀后装在棕色瓶中,用黑纸包好,放于暗处过夜, 此时试剂应为淡黄色(如为粉红色则不能用) 。再用中性活性炭过滤, 其滤液振荡 1 分钟后再过滤, 滤液置于冷暗处备用。注意:过滤需在避 光条件下进行。在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥, 以消除还原性

6、 物质。(2) Schandium 固定液A 液:饱和升汞水溶液, 取 50ml 升汞水溶液加 95%酒精 25ml。B 液 : 冰醋酸取A液9ml加B液1ml,混匀后加热至60C。(3) 亚硫酸水溶液10%偏重亚硫酸钠水溶液 5ml 、1M HC1 5ml 、蒸馏水 100ml 。9. Albert 氏异染颗粒染色液A液:甲苯胺蓝0.15g、孔雀绿0.2g、95%酒精2ml、蒸馏水100ml先将甲苯胺 蓝及孔雀绿溶解于酒精中,再加蒸馏水及冰醋,放置24小时,以滤纸过滤即可。B液:先将碘化钾3g溶于10ml蒸馏水中,再加碘片2g,待溶解后,加蒸馏水至 300ml。10. Neiser 氏异染颗

7、粒染色液A液:美蓝1g溶于95%酒精2ml后,加冰醋酸5ml及蒸馏水95ml,用滤纸过 滤。B液:斯麦褐0.2g溶于100C蒸馏水100ml中,过滤。11. Ponder 氏异染颗粒染色液甲苯胺蓝0.1g、一号天青0.1g、美蓝0.1g、95%酒精5ml、蒸馏水120ml、 冰醋酸 1ml。12. 苏丹黑-B染色液苏丹黑-B(Sudan black B)0。5g 溶于 100ml70%的酒精中。13. 苏丹III染色液苏丹III(SudanIII)的95%酒精饱和液。14. 碘液(肝糖颗粒染色用)碘片lg、碘化钾3g、蒸馏水100ml。先将碘化钾溶于蒸馏水中,再加碘片溶解后即可。15. 石炭酸

8、蕃红染色液蕃红0.1kg溶于10ml95%酒精中,再加入30%石炭酸90ml。16. 乳酸石炭酸棉蓝染色液石炭酸10g、乳酸10ml、甘油20ml、蒸馏水10ml、棉蓝(cottolue) 0.02g 将石炭酸加在蒸馏水中加热溶解,然后加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,使其溶解即 成。17. 酸性酒精盐酸(密度1.19)3ml、95%酒精97ml。18.0.1%美蓝染色液吕氏美蓝染色液46 ml加蒸馏水54 ml。19. F-5酸性坚膜定影液水(52C)600 ml、大苏打(硫代硫酸钠)240、亚硫酸钢15g、醋(28%) 48ml、 硼酸(硫酸铝钾)15g。加冷水至1000 ml。20. Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液75ml、福尔马林(40%甲醛)25ml、冰醋酸5ml先将苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福尔马林和冰醋酸摇匀即成。lg苦味 酸可制成 75ml 饱和水溶液。

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