《放射性标记方法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《放射性标记方法（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、放射性标记方法-正文用易于检测的一种或两种放射性核素给某种化合物分子打上“记号”的方法。作“记号” 的放射性核素，如果是该化合物分子中固有元素的同位素，一般称为同位素标记,否则称为 非同位素标记。标记后的化合物,除了具有特定的放射性并具有足够的比活度（见活度）和 放化纯度外，其化学和生物学性质与无标记的相应化合物相同，或在实用意义上非常近似。标记类型 根据放射性原子在分子中的分布情况，可分为以下五种：特殊标记，放 射性原子明确无误地分布在分子中已知的特定位置上；均匀标记，放射性原子以统计均匀 的形式分布在整个分子中；一般标记，放射性原子以一种不确定的形式分布在分子中； 标称标记，放射性原子被标
2、记的位置未经实验证实；双标记，在标记分子中出现两种不同 的放射性原子或在分子中两个不同的位置上出现同种放射性原子，或将单独标记的两种分子 加以混合。标记方法 20 世纪初，特别从40 年代起，人们一直在探索各种标记方法，如化学合 成法、生物化学法、同位素交换法、辐射合成法、热原子反冲标记法等，但常用的方法有化学合成法、生物化学法、同位素交换法（见表）。miHP好P IB轉礼tu克* 口 11F!t aa9*8M-canLnrui和Z册肝耐一申上H.HHHl：U-DUVVLi/rU比舁b 卑 n.taiH.l：3&1:-放射性标记方法标记方法的选择和分离、分析、储存方法的确定，取决于以下因素：所
3、用核素的种类 和它的起始原料、中间体的化学形式；标记类型对产物的比活度、放化纯度的要求;操 作过程中核衰变、自辐解、生物活性的保持，以及安全防护等。化学合成法 是制备氚、碳 14、磷 32、硫 35、碘 125等核素标记化合物的最有效的 方法，主要特点是应用传统的化学合成路线，在210毫摩尔微量操作条件下，采用最简短 的放射性操作程序来完成标记的化学反应。常用的起始原料有： 3HHO、 3H2、 NaBH33H、 Ba14CO3、 14CO、32PC1、32PS、32P0、32PH、35S0、H 35SO、H 35S 和 NaI。几种常用的化学合成反应如232 52 532343下：化学合成法
4、的优点是能控制标记原子在被标记分子中的位置（氚有例外）和产品的纯度、 比活度等，但它不能得到纯的光学异构体形式，故对生物大分子的标记显得无能为力。生物化学法 基于单细胞生物（如藻类）和植物（如离体叶片），以及粗制酶或纯酶的 应用，近年来已成为制备高比活度、高产额并能保持其天然构型的标记化合物的重要方法 主要用于碳14的标记，其次是磷32、硫35的标记。例如，将植物叶片置于14CO2气氛中培 养，通过光合作用可以生成碳14均匀标记的氨基酸、核苷酸和糖类等多种化合物。碳 14 生物化学法标记，一般可同时得到具有较高比活度的多种均匀标记的化合物，并 能保持其生物活性。缺点是不能用来制备其他标记类型的
5、标记化合物。在磷 32或硫35生物 化学法标记中，由于酶反应的专一性，标记反应可在极微量条件下进行，常用来制备具有较 高比活度并保持生物活性的特殊标记类型的化合物。同位素交换法同位素交换反应可用下式表示：e _ g盘厂“/辺1（尸號巳1）/&1该法特别有利于氚标记，80 年代初国际市场上许多品种的氚标记化合物是采用此法制得的。 该法也有利于碘 125、硫 35 的标记。同位素交换法操作简便，适宜于对天然化合物或结构 复杂的药物的标记，其缺点是放射性核素的利用率低，标记位置常常不可预知，比活度低， 产品纯化困难等。随着微波放电法和低压氚化粒子束等方法的应用和改进，该法可望有新的 进展。标记化合物
6、的纯化和分析 标记化合物的纯化、分析及其稳定性的研究是标记方法本 身的延续。评价任何一种标记程序（方法）的好坏，最重要的指标是是否具有能分离出高放 化纯度和化学纯度产物的能力。色谱法，如柱色谱、薄板色谱、纸色谱以及高效液相色谱等， 是一类常用的分离纯化标记化合物的方法。但它们对于结构类似的化合物的分离有时也会遇 到困难，因此产物纯度的确证仍需要直接的实验测试。标记化合物纯度的分析，指放化纯度、 化学纯度（两者通常都要求达到 95以上）的分析和标记的位置、生物活性等的测定。所 用的方法中，除了一般常规的熔点、沸点、折光、旋光、紫外、红外、核磁、气-液色谱外, 目前对于非挥发性样品的检定，最重要的是各种放射性色谱技术和反相同位素稀释法，而对 于挥发性样品的检定，则采用放射性气相色谱法及高效液相色谱法。最佳的方法为高效液相 色谱法与反同位素稀释法的匹配使用。对于放射性强度的测定和标记位置的确定，通常采用 放射性液体闪烁谱仪和核磁共振谱仪等手段。
