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1、DMi 8倒置荧光显微镜具体操作及说明第一部分， 显微镜机身按钮说明A,机身右侧1, 荧光减光片:（用于降低荧光激发的照射强度。完全推进去最亮，完全拉出来最弱）2，荧光光圈:（用于调整荧光光斑照射大小，推进去最小，拉出来最大）3，荧光挡光板：（用于开/关荧光光路，当只观察透射光明场时需要把此推进遮挡住荧光照射，同时荧光滤块转盘转至无滤块，观察荧光时 需要把此杆拉出来，让荧光照射进光路）4，目镜/照相机光路切换拉杆:（推进去只能目镜观察，拉出来照相机观察）5，荧光滤块转盘:（当进行荧光观察是转动此转盘切换荧光通道，根据照射出的色彩来判断具体光路，紫色照射激发蓝光染料，相应的蓝 色激发绿色，绿色激
2、发红色，橙色激发红色波段）1, 透射光强调节旋钮:用于调节透射照射强度。2, 调焦旋钮：用于调节焦距高低，左右各一个3, 荧光滤块转盘：用于调节荧光滤块通道，左右各一个C,透射光柱顶部，STOP：用于遮挡透射光路的通和断，当进行荧光观察时需要推上STOP遮挡住光路, 避免干扰荧光观察。D,聚光镜部分1,孔径光阑：用于透射光光圈调整，白光观察是调节到1 -8之间的位置，可以得到亮度不同，景深分辨率也不同的白光视野，具体需要根据 不同物镜和样本厚度而定。当进行相差观察是需要调节转盘 1 至 PH 位置，然后再转动转盘 2，选择相应的相差环。2，相差环转盘|：用于相差环转换,PH0对应5倍，PHI对
3、应10倍、20倍物 镜，PH2对应40倍和63倍物镜。当白光观察时，需要转至非 PH012 的任意位置。第二部分，软件操作说明1，打开桌面-操作程序f 界面进入Copyfight QLeksCMS Gn*HLeka Application Suite X2，进入主页面：材5Q环览.向MlWLlW-n；werPT帖序伽4出D甘fifl血咱尬r-W 砒T: WW 卿R FM :22UUpnSlUtii一，明场（白光）的拍摄方法A， 拍摄图片：首先调节显微镜亮度和焦距，使视野中得到清晰的相差或白光的图像 - 拉出机身右侧的光路切换拉杆,让光路由目镜切换到摄像头上。，可得到上图的界面4t点击软件最上一
4、栏点击左下角动态图像调节垠光:100J00得到亮度和色彩最佳的图像点击下方拍图完毕。B， 拍摄的图片导出：可显示拍摄到的照片清单，选中要导出的图片,鼠标右键剪切arl+x复制Ctri+C导出董新校准图像属性在新育看器中打开 应用图像谡置全关闭选择导出。得到如下图界面-指定最上面文件路径点击保存即可完成图片导出。若对导出图片添加标尺，可在上图界面勾选微米刻度选项。fOx左上匝部中阿右上打龙b:12 f确定设置相应的标尺显示位置/字体颜色/大小等参数，点击确认，即可。点击调整曝光时间昵光:IMjOO荧光信号不够亮时提咼增益大约3-6之间盛：OL0二，荧光图片的拍摄方法显微镜上操作：事先打开荧光光源
5、，明场下找到样本焦点 f 关闭明场光路，打开荧光光路 f 转动荧光滤块转盘，找到目标荧光通道（例如紫外通道激发DAPI） f 调整 焦点 f 快速切换光路由目镜到摄像头。软件操作部分:景条，由底往上拖动,拖至荧光背景暗色，荧光图像较清晰即可点击完成单道图像采集。果图像背景噪音较大可以降低背景噪音，方法如下 f 在图像左侧有如下图中的 背255255G荧光如下处理功能介绍点击打开项目可显示拍摄到的照片清单,按住键盘上“c trl多色荧光图像叠加（merge ）：创建集合刪除M叠加层勢切Ctri+X复嗣arl+c导出键，鼠标左键选中要叠加的多张图片 f 选中后，鼠标右键f 在打开项目下的图片清单中就可以显示了覆盖层的图片 f 右键导出merge 后的图片，导出方法同上。细胞辅助计数功能：图片拍摄好之后f 点击图片上方按钮，单机图片区域f 弹出对话确认 f 鼠标左键单击相应的细胞，系统会自动计算出总共的细胞个数，完成辅助 计数功能。荧光定量功能：拍摄完荧光图片后，打开项目中选择目标处理的图片，单击最上一栏中鼠标左键沿目标细胞中心画出横线 f 单击页面最左侧页面中间部位会出现图标和统计栏目，分别会显示相应的荧光强度等系列参数，并可QQ2以导出相应的Excel格式数据。如图
