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1、本方法适用于保健食品中植物甾醇的测定本方法谷甾醇和豆甾醇的检出限为0.02口 g本方法线性范围为0.10.5mg/ml1. 方法提要试样中的谷甾醇和豆甾醇经提取后在高效反相色谱c18柱分离，用紫外检测器检测，以外 标法定量谷甾醇和豆甾醇的含量。2. 仪器高效液相色谱仪，带紫外检测器。3. 试剂除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。（1）异丙醇：色谱纯。（2）乙腈：色谱纯（3）乙醇。（4）P 一谷甾醇对照品：Fluka公司（纯度N90%）（5）豆甾醇对照品：Fluka公司（纯度N90%）（6）谷甾醇和豆甾醇混合标准溶液：精度称取月-谷甾醇和豆甾醇对照品0.0100g
2、，移入10ml容量瓶中，加入乙醇，超声波振荡助溶，并用乙醇定容到10ml，此为浓度1.0mg/ml的 标准储备液。4. 测定步骤（1）样品处理：称取均匀样品0.25g （精确到0.1mg），置于50ml容量瓶中，加入40ml乙醇，超声波振荡60min取出，冷却后用乙醇定容至刻度，摇匀后经0.45口 m微孔膜过滤，清液 待分析。（2）标准工作曲线绘制：精度吸取月-谷甾醇和豆甾醇标准溶液（1.0mg/ml） 1.0、2.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。分别取10口 l标准工作系列溶液进样分析，以测得的8-谷甾醇和豆甾醇的峰面积，分别对月-谷甾醇和豆甾醇的浓度绘制标准曲线
3、。（3）色谱条件色谱柱：ODSC18液相色谱柱，4.6mm X 250mm，5p m。流动相：乙月青+异丙醇（70 + 30，V/V）。流速：1ml/min。柱温：室温。紫外检测波长：210nm。（4）样品测定：取样品滤液10口 l进液相色谱仪分离测定，根据色谱峰保留时间定性，以外 标峰面积法进行定量。5、结果计算根据待测样品色谱峰面积，由标准曲线回归方程式的样液中8 一谷甾醇和豆甾醇含量，计算出样品中的 含量。样品中8 一谷甾醇和豆甾醇含量按下式进行计算CXVX100X=mX100式中X-样品中8 一谷甾醇和豆甾醇含量（g/100g）；C一进样液中8 一谷甾醇和豆甾醇的浓度（mg/ml）；V一样品的定容体积（ml）；m一样品的取样量（g）式中X-样品中8 一谷甾醇和豆甾醇含量（g/100g）；C一进样液中月一谷甾醇和豆甾醇的浓度（mg/ml）；V一样品的定容体积（ml）；m一样品的取样量（g）
