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1、第十七章基因重组和基因工程习题一、单项选择J1 .限制性核酸内切酶切割DNA后发生A.5磷酸基和3羟基基团的末端C.5羟基和3羟基基团的末端E.以上都不是2.可识别并切割特异DNA序列的酶是A.非限制性核酸外切酶C.限制性核酸外切酶B.5磷酸基和3磷酸基团的末端D.3磷酸基和5羟基基团的末端B.限制性核酸内切酶D.非限制性核酸内切酶E.DXA酶3 .有关限制性核酸内切酶，以下哪个描画是错误的？A.识别和切割位点通常是48个bp长度B.C.在识别位点切割磷酸二酯键D.E.只能切割含识别序列的双链DA分子4 .在重组DMA技术中催化构成重组DNA分子的酶是大少数酶的识别序列具有回文结构只能识别和切
2、割原核生物DNA分子A.解链酶C.DXA衔接酶E.拓扑酶5 .对基因工程载体的描画，以下哪个不正确？A.可以转入宿主细胞C.可与目的基因相连E.有挑选标志6 .克隆所依赖的DNA载体的最基本性质是A.卡那霉素抗性C.自我复制才干E.自我转录才干7 .重组DNA技术中常用的质粒DXA是A.病毒基因组DNA的一局部C.细菌染色体DNA的一局部E.真核细胞染色体DNA的一局部8 .以下哪种物质普通不用作基因工程的载体？A.质粒B.DNA聚合酶D.内切酶B.有限制酶的识别位点D.是环状DNA分子B.青霾素抗性D.自我表达才干B.细菌染色体外的独立遗传单位D.真核细胞染色体外的独立遗传单位B.噬菌体C.
3、哺乳植物的病毒E.大肠杆菌基因组9.关于pBR322质粒描画错误的选项是A.有一些限制酶的酶切位点C.含有来自大肠杆菌的lacZ基因片段D.逆转录病毒DNAB.含有1个ori.D.含个级木青寄素抗性基因E.含四环素抗性基因。10.以mRNA为模板催化cDNA分解需求以下酶A.RNA聚合酶C.Kkmow片段E.DNA酶11.催化聚合酶链反响需求以下酶A.RNA聚合酶C.TaqDNA聚合酶E.限制性核酸内切酶12 .关于PCR的描画以下哪项不正确？A.是一种酶促反响C.扩增产物量大E.扩增的对象是RNA序列13 .在基因工程中，DW重组体是指A.不同来源的两段DNA单链的复性C.不同来源的DNA分
4、子的衔接物E.两个不同的结构基因构成的衔接物14 .基因工程操作中转导是指A.把重组质粒导入宿主细胞C.把DNA重组体导入原核细胞B.DNA聚合酶D.逆转录酶B.DNA聚合酶D.逆转录酶B.引物决议了扩增的特异性D.扩增的对象是DNA序列B.目的基因与载体的衔接物D.原核DNA与其核DNA的衔接物B.把DNA重组体导入真核细胞D.把外源DXA导入宿主细胞E.以噬菌体或病毒为载体构建的重组DXA导入宿主细胞15.重组DNA的挑选与鉴定不包括哪一方法A.限制酶酶切图谱鉴定B.PCR扩增鉴定C.显微注射D.蓝白挑选E.抗药挑选二、多项选择J1 .在分子克隆中，目的DNA可来自A.原核细胞染色体DNA
5、B.真核细胞染色体DNAD.聚合酶链反响B.克隆载体的构建C.目的DNA与载体的衔接D.将重组体导入受体菌E.重组DNA分子转化受体菌的挑选3 .分子克隆又称A.基因克隆B. DNA克隆C.单克隆抗体制备D.构建基因组DNA文库E.基因重组4 .参与聚合酶链反响体系的组分有A. DXA引物B.目的DAC.三磷酸脱氧核昔D. Taq DNA聚合酶E. RNA聚合酶5 .从基因组DA文库或cDNA文库分别、扩增某一感兴味基因的进程就是A.基因克隆B.分子克隆C. DNA克隆D.构建基因组DNA文库E.重组DNA技术6 .可用作克隆基因载体的DNA有A.细菌质粒DXAB.真核细胞基因组DNAC.病毒
6、DNAD.酵母人工染色体E.噬菌体DNA7 .将重组DMA分子导入受体细菌的方法有A接合B .转座C.感染D.转染E.转化C.人工分解的DNAE.真核细胞mRNA反转录取得的cDNA2 .重组DNA技术基本进程包括A.目的基因的获取B.电穿孔D.脂质体载体法8 .转染真核细胞的方法有A.磷酸钙共沉淀法C.DEAE葡聚糖法E.显微注射法9 .下述操作能够用于基因工程进程的是A.DA的制备和酶解B.不同来源DNA的拼接c.重组DNA导入受体细胞D.细菌的生长和繁衍E.核酸分子杂交10 .关于质粒DNA的表达正确的选项是A.是基因组DNA的组成局部B.具有独立复制功用C.含有抗生素抗性基因D.含有感
7、兴味的目的DNAE.具有编码蛋白质的功用三、填空题1、DNA重组技术主要触及两大中心技术：和o2、一个完整的基因克隆进程应包括：目的基因的获取，的选择与改造，的衔接，重组DNA分子受体细胞，出含感兴味基因的重组DNA转化细胞。3、限制性核酸内切酶是由发生的一类识别,并在识别位点切割键的核酸内切酶。4、迷信家感兴味的外源基因又称,其来源有、等几种途径。5、常用的目的基因与载体衔接的方式有、。6、依据采用的克隆载体性质不同，将重组DNA分子导入细菌的方法有一、等。7、基因组文库含有组织或细胞的信息，cDNA文庠含有组织或细胞的信息。8、载体的实质是,它应具有以下基本条件：、和O四、名词解释1.基因
8、工程2.DNA重组3.克隆4.DNA克隆5.目的基因6.基因载体7.质粒8.限制性核酸内切酶9.基因文库10.cDNA文库11.转化12.转导13.转染五、问答题1 .载体应具有以下基本条件2 .常用的工具酶有哪些？其主要用途是什么？3 .重组DNA技术常包括哪些基本步骤：4 .常用的目的基因的获取方法有哪些？5 .常用的目的基因与载体的衔接方法有哪些？5 .何谓限制性核酸内切酶？写出大少数限制性核酸内切酶识DNA序列的结构特点。6 .解释质粒，为什么质粒可作为基因载体。参考答案一、单项选择题1. A2.B3.D4.C5.D6.C7.B8.E9.C10.D11. C12.E13.B14.E15
9、.C二、多项选择题1 .A、B、C、D、E2.A、B、C、D、E3.A、B、E4.A、B、C、D5.A、B、C6.A、C、D、E7.C、D、E8.A、B、C、D、E9. A、B、C、D、E10.B、C三、填空题1 .DNA重组、克隆2 .载体、目的基因与载体、导入、挑选3 .细菌、双链DNA中的特定碱基序列、磷酸二酯4 .目的基因、制备基因组文库、构建cDNA文库、PCR扩增、人工分解DNA技术5 .黏性末端衔接、平头末端衔接、人工接头法、同源多聚尾衔接法6 .转化、转导7 .DNA、mRNAo8.DNA、具有独立复制才干、具有多克隆位点、具有挑选标志、具有足够的容量、能导入受体细胞四、名词解
10、释1、是指在体外将DNA分子剪切偏重新拼接构成一个新的重组DNA分子，然后将它导入细菌或植物细胞内使之表达，发生出人类所需求的基因产物或改造新的生物种类。2、是指用酶学方法将不同来源的DNA停止切割、衔接，组成一个新的DNA分子的进程。3、克隆(clone)原指一个亲本细胞经无性繁衍发生有数个相反细胞的子代群体的进程。4、是指将重组DNA分子导入到适宜的受体细胞中，使其扩增和繁衍，以取得少量的相反的DNA分子，又称分子克隆或基因克隆。5、要分别和克隆的相应基因常称为目的基因。因目的基因片段需拔出载体，导入宿主细胞内停止复制或表达，所以对宿主细胞DNA而言，又称它为外源性基因或外源性DNA。6、
11、可以携带外源DNA进入受体细胞内停止复制或表达的DNA分子，被称为基因载体。7、是独立于细菌染色体之外，能自主复制的共价闭合环状双链DNA。8、是由细菌发生的一类能特异识别双链DNA中的特定碱基序列，并在识别位点切割磷酸二酯键的核酸内切酶（简称限制酶）。9、将一切的重组DNA分子都导入宿主细胞停止扩增，失掉分子克隆的混合体，这样一个混合体称为基因文库。10、从组织细胞中分别失掉纯化的mRNA,然后以mRNA为模板，应用逆转录酶分解其互补DNA,再复制成双链cDNA片段，与适当载体衔接后导入受体菌内，扩增，构建cDNA文库。11、是指以质粒为载体构建的重组DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其取
12、得新的表型的进程。12、以噬菌体或细胞病毒为载体构建的重组DNA导入受体细胞并取得新的表型的进程称为转导（transduction）。13、真核细胞自动摄取或主动导入外源DNA片段而取得新的表型的进程称为转染。五、问答J1、具有独立复制才干：具有多个限制酶的识别位点（多克隆位点）：具有遗传表型或挑选标志：有足够的容量以容纳外源DNA片段；可导入受体细胞。经过人工构建的载体，不但能与外源基因相衔接，导入受体细胞，还能应用自身的调控系统，使外源基因在宿主细胞中复制并表达。2、（1）限制性核酸内切酶：识别并特异切割DNA碱基序列；（2）DNApol【：催化缺口平移，制备高比度DNA探针；（3）Kle
13、now片段：分解cDNA第二条链，补齐或标志双链DNA3端：TaqDNA聚合酶：DNA体外扩增（PCR）；（5）逆转录酶：催化分解cDNA；（6）T4DNA聚合酶：聚合补平或标志DNA平末端或3凹端等：（7）DNA衔接酶：催化2条DNA链之间构成磷酸二酯键；（8）大肠杆菌DNA衔接酶：运用于黏端DNA或切口间衔接：（9）T4DNA衔接酶：运用于黏性或平末端DNA的衔接：（10）末端脱氧核甘酸转移酶：给载体或cDNA加上互补的同聚尾、加标志物；（11）碱性磷酸酶：防止载体自身衔接、32P标志5端；（12）T4多核甘酸激酶：5,端磷酸化、5端标志放射性核素，3、（1）分别制备目的基因一一分：（2）
14、切割目的基因和载体一一“切：（3）目的基因与载体的衔接接；（4）将重组DNA导入宿主细胞一一、转；（5）挑选并鉴定含重组DNA分子的受体细胞克隆一一筛；（6）克隆基因在受体细胞内停止复制或表达4、11）制备基因组文库；（2）构建cDNA文库：（3）PCR扩增目的基因：（4）人工分解DNA技术。5、黏性末端衔接：将靶基因片段和载体DNA经相反的限制酶区分切割，使它们两端发生相反的黏性末端。然后经黏性末端碱基配对，再经DNA衔接酶作用，共价衔接成新的重组DNA分子;（2）平头末端衔接:将平末端的DNA分子在T4DNA衔接酶催化下，使DNA分子的3OH和5P停止共价结合；（3）人工接头法：是指应用人工接头加在平端DNA片段的两端，然后用相应限制酶切割人工接头以发生黏性末端，再与带相反黏性末端的载体相连：同源多聚尾
