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1、樟树叶斑病的病原菌鉴定病原菌的分离采用常规的组织分离方法，置PDA培养基上与25 VB温培养， 于25 C培养箱中培养37d观察并发现方块样品刀口边缘处有菌丝长出。挑取 方块样品边缘的菌丝转接到新的PDA培养基中（按1:3转接），于25C培养箱中 培养35d，再挑取菌块边缘菌丝和上面同样方法反复转接，直到纯化为止（同 单孢分离等效）。将纯培养物转到PDA斜面培养基上培养，培养条件同上，待菌 丝覆盖培养基接近三分之二时转放入冰箱保种。致病性测定分别以病原菌的菌丝块和孢子悬浮液作为接种体对其在樟树上的致病性进 行测定。选择健康的樟树植株嫩叶片进行接种，叶片先用75%的酒精表面消毒， 接种后保湿24
2、h，每隔1-2d观察症状。发病后，从病斑再次分离病原菌，并与 原接种菌进行比较。病原菌形态学的特征观察1）病原菌的培养性状观察：将病原菌移接于PDA平板上，25oC培养5-8天， 记录菌落形态和颜色，检测分生孢子的形状和大小。2）孢子的萌发：以致病菌菌株为材料，用灭菌自来水将病原菌分生孢子制 作成孢子悬浮液，设葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖4种碳源，用灭菌水配置成 1%的营养液，取灭菌好的培养皿、滤纸、载玻片和盖玻片，在培养皿上贴好标签 放入滤纸、载玻片，在培养皿中倒入少量的灭菌水以达到保湿的效果，在载玻片 上滴入与标签上相对应的营养液，把制作好的孢子悬浮液滴入营养液中，盖上盖 玻片，用保鲜膜密封好防止杂菌侵染。置于25C的恒温箱培养，培养1-2小时 后，把载玻片放于显微镜下观察孢子的萌发状况们。病原菌的鉴定单独培养病原菌（25C培养箱中培养7d）待菌丝长好或长出孢子时，挑取 少许孢子或菌丝，用乳酸石碳酸液制成封片和载玻片培养观察。观察其分生孢子 和分身孢子梗附属丝、泡囊的形态等状况，结合染病状况及菌落特征按有关文献7-资料进行分类鉴定。
