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1、新生胶囊对肿瘤模型动物扶正祛邪作用的讨论【摘要】目的验证新生胶囊扶正祛邪的主要药理作用。方法试验选用IR小鼠、BALB/品系裸鼠，建立S180肉瘤肿瘤模型和G-803肿瘤模型，观察口服灌胃新生胶囊对肿瘤小鼠肿瘤的抑制作用，选用S180腹水肿瘤模型小鼠观察新生胶囊对小鼠生命存活时间的影响。结果新生胶囊能显著抑制S180荷瘤小鼠和BALB/裸鼠G-803移植瘤的生长，与肿瘤模型组比拟差异有显著性P0.05。小鼠灌胃新生胶囊，对S180腹水肿瘤小鼠生命存活时间与模型组比拟差异无显著性P0.05。但与环磷酰胺合用，可以延长S180腹水肿瘤小鼠存活时间，生命延长率为33.2%38.86%，提示新生胶囊与
2、环磷酰胺合用对S180腹水小鼠存活时间有协同增效作用的趋势。新生胶囊还具有一定的扶正作用，对注射环磷酰胺引起的小鼠免疫功能降低有一定的改善，对血流中碳粒的吞噬廓清才能有一定的增强作用。进步吞噬指数K，增加血清溶血素含量，与模型组比拟差异有显著性P0.05。结论新生胶囊具有一定的扶正祛邪、增强机体免疫功能的作用。【关键词】新生胶囊;S180肉瘤肿瘤模型;G-803肿瘤模型;扶正祛邪新生胶囊是由黄芪、乳香、没药等多味中药组成的中药复方制剂，具有清热解毒、活血消癥、散结止痛的成效，临床上用于食管癌、胃癌及恶疮肿毒等症的辅助用药。为验证其主要药理作用，我们选用IR小鼠、BALB/品系裸鼠，建立S180
3、肉瘤肿瘤模型和G-803肿瘤模型，观察新生胶囊扶正祛邪的药理作用，并以参芪颗粒、注射用环磷酰胺为阳性对照，试验结果如下。1材料1.1动物小鼠：IR品系，等级：SPF清洁级；裸鼠：BALB/品系，等级：SPF。由北京维通利华实验动物技术提供。供应源答应证号：SXK京20020003。1.2药物新生胶囊批号：20220118，含量：每克原药提取物相当3.68g生药。提供单位：北京中医药大学。注射用环磷酰胺消费单位：江苏恒瑞医药股份，产品批号：0208211。临用时用生理盐水配成所需浓度。参芪颗粒消费单位：江西山高制药，临用时用0.5%羧甲基纤维素钠配成所需浓度。1.3瘤株小鼠S180瘤株由中医研究
4、院中药研究所提供；小鼠G-803瘤株由中国医学科学院肿瘤研究所动物室提供。1.4仪器与试剂TU-1901双光束紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司制造。2试验方法2.1祛邪作用的研究2.1.1对小鼠S180肉瘤瘤体生长的影响2肿瘤模型建立于超净工作台中，取S180肉瘤瘤液，以生理盐水稀释，显微镜下计算1l瘤液中活体瘤细胞数，用生理盐水稀释成所需浓度1.6107个/l，按每只小鼠0.2l接种于右腋皮下。取上述安康IR品系小鼠75只每次同性别，体重1921g，无菌条件下，于右侧腋下接种上述配置的S180肿瘤瘤液0.2l，24h后随机分成5组，模型组，新生胶囊大、中、小剂量组，环磷酰胺阳
5、性对照组，每组15只分组和给药剂量见表1。每天各组小鼠灌胃相应药物0.5l/20g，连续给药8天。阳性对照组小鼠隔日腹腔注射环磷酰胺20g/kg。共4次，模型组灌胃同体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液。于末次给药24h后处死小鼠，称体重并剥离皮下瘤块，称瘤重，计算各组瘤体重量，并按以下公式计算抑瘤率，以抑瘤率30%为有效。抑瘤率=1-T/100%T为给药组瘤重，为对照组瘤重以上实验重复3批。表1新生胶囊对S180肉瘤瘤体生长的影响注：与模型组比拟,*P0.01,*P0.052.1.2对BALB/小鼠G-803肉瘤瘤体生长的影响2取上述安康BALB/品系雌性裸鼠50只，体重1316g，无菌条件下，于
6、右侧肩后接种G-803肉瘤瘤块332，24h后随机分成5组：模型组，新生胶囊大、中、小剂量组，环磷酰胺阳性对照组，每组10只分组和给药剂量见表2。每天各组小鼠灌胃相应药物0.1l/20g，连续给药25天。阳性对照组小鼠每隔6天腹腔注射环磷酰胺20g/kg，共连续4次，模型组小鼠灌胃同体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液。于末次给药24h后处死小鼠，称体重并剥离皮下瘤块，称瘤重，计算各组瘤体重量，并按以下公式计算抑瘤率，以抑瘤率30%为有效。抑瘤率=1-T/100%T为给药组瘤重，为对照组瘤重以上实验重复2次。表2新生胶囊对G-803肉瘤瘤体生长的影响注：与模型组比拟,*P0.05，*P0.012.1
7、.3对S180腹水肿瘤小鼠生命存活时间的影响1取上述安康IR小鼠75只，按体重随机分为5组，无菌条件下，以生理盐水稀释S180腹水肿瘤细胞1.2107个/l，每只小鼠腹腔注射S180肿瘤腹水液02l，24h后按体重随机分为5组分组、给药剂量及方法同2.1.1，连续给药14天，观察记录各组小鼠存活的天数，并计算生存率。以上实验重复3次。见表3。表3新生胶囊对S180腹水肿瘤小鼠存活时间的影响注：与模型组比拟,*P0.012.2扶正作用的研究对小鼠免疫功能的影响2.2.1对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响取上述安康IR雌性小鼠60只，体重2022g，无菌条件下，于右侧腋下接种S180肿瘤细胞1.6107
8、个/l0.2l，24h后随机分成5组：模型组，新生胶囊大、中、小剂量组，环磷酰胺阳性对照组，每组12只分组、给药剂量见表4。另设一组空白对照组，每天各组小鼠灌胃相应药物0.5l/20g，连续给药8天。阳性对照组小鼠隔日腹腔注射环磷酰胺20g/kg。共4次，模型组和空白对照组灌胃同体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液。于末次给药24h后处死小鼠，解剖，称取胸腺、脾脏重量，按以下公式计算器官系数。胸腺指数=胸腺g/体重g脾指数=脾脏g/体重g表4新生胶囊对荷瘤小鼠免疫器官的影响注：与模型组比拟,*P0.01;与空白组比拟,P0.012.2.2对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响3(小鼠碳粒廓清法取安康IR品
9、系小鼠78只，雌雄各半。按体重随机分为6组分组及给药剂量见表5，各组小鼠每天分别灌胃相应药物0.5l/20g体重，连续14天。除空白对照组外，其余各组小鼠分别于给药后第8天、10天小鼠腹腔注射环磷酰胺100g/kg，造成小鼠免疫功能低下模型，于末次给药后1h，每只小鼠尾静脉注射印度墨汁0.1l/10g体重，分别于注射后1in、5in从小鼠眼静脉丛取血20l，溶于2.5l0.1%Na23溶液中摇匀，照分光光度法，在680n处测定吸收度D值，最后将小鼠颈椎脱臼处死，分别称取肝脾重量。按以下公式计算廓清指数K和校正廓清指数(a)进展统计学计算。K=lgD1-lgD2T2-T1=3K体重/肝重+脾重表
10、5新生胶囊对小鼠RES吞噬功能的影响注：与空白对照组比拟，P0.01；与模型组比拟，*P0.052.2.3小鼠体液免疫功能的影响溶血素法取安康IR品系小鼠78只，雌雄各半。按体重随机分成6组分组、给药剂量见表6，每组13只。各组小鼠每天分别灌胃相应药物0.5l/20g体重，模型组、空白对照组灌胃同体积0.5%-Na溶液，连续给药14天。于给药后第7天，各组按0.2l/只腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液进展免疫。第8天、10天除空白对照组小鼠外其他各组小鼠每只腹腔注射环磷酰胺100g/kg，造成小鼠免疫功能低下模型。并于免疫后第7天，各组动物取血，将血清稀释100倍。取稀释血清，与5%鸡红细胞
11、、10%豚鼠血清(补体)作用后，离心，取上清液于540n处测定光密度D值，各组进展比拟，进展统计学计算。表6新生胶囊对小鼠血清溶血素含量的影响注：与空白组比拟,P0.01；与模型组比拟,*P0.05,*P0.012.3增效作用的研究与环磷酰胺合用对S180腹水小鼠存活时间的影响取上述安康IR小鼠90只，按体重随机分为6组，无菌条件下，以生理盐水稀释S180腹水肿瘤细胞1.2107个/l，每只小鼠腹腔注射S180肿瘤腹水液02l，24h后按体重随机分为6组，模型组，新生胶囊大、中、小剂量组，环磷酰胺5g/kg、20g/kg剂量组，各组每天灌胃给药药剂量及方法同2.1.1，同时新生胶囊各组隔日腹腔
12、注射环磷酰胺5g/kg体重，连续14天，观察记录各组小鼠存活的天数。以上实验重复2次。2.4统计学方法以SPSS统计软件，进展统计学处理。实验结果用平均值标准差(xs)表示，组间差异用t检验。3试验结果3.1祛邪作用的研究抗肿瘤作用研究3.1.1对小鼠S180肉瘤瘤体生长的影响试验结果说明：S180肿瘤模型小鼠口服新生胶囊大、中剂量组能显著抑制S180移植瘤的生长，与肿瘤模型组比拟差异有显著性P0.01。结果见表1。3.1.2对BALB/小鼠G-803肉瘤瘤体生长的影响试验结果说明：G-803肿瘤模型小鼠口服新生胶囊大、中剂量组能显著抑制BALB/小鼠G-803移植瘤的生长，与肿瘤模型组比拟差
13、异有显著性P0.05。结果见表2。3.1.3对S180腹水肿瘤小鼠生命存活时间的影响试验结果说明：S180腹水肿瘤小鼠口服新生胶囊小鼠的存活时间与模型组比拟差异无显著性P0.05。注射环磷酰胺组小鼠与模型组比拟差异有显著性P0.01，结果见表3。3.2扶正作用的研究对免疫功能的影响3.2.1对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响试验结果说明:与模型对照组比拟，新生胶囊大、中、小剂量对荷瘤小鼠胸腺、脾脏重量，差异无显著性(P0.05)。结果见表4。3.2.2对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响小鼠碳粒廓清法试验结果说明：小鼠灌胃新生胶囊3.15g生药/kg、1.58g生药/kg14天后，对环磷酰胺引起的免疫功
14、能低下，有进步K值廓清指数的作用，与模型组比拟差异有显著性P0.05，结果见表5。3.2.3对小鼠体液免疫功能的影响溶血素法试验结果说明：小鼠口服新生胶囊3.15g生药/kg、1.58g生药/kg、0.79g生药/kg，可进步血清溶血素含量，与模型组小鼠比拟差异有显著性P0.05，结果见表6。3.3增效作用的研究与环磷酰胺合用对S180腹水小鼠存活时间的影响结果说明:新生胶囊大剂量组小鼠合用环磷酰胺5g/kg，生命延长率为33.2%，38.86%提示新生胶囊与环磷酰胺合用对S180腹水小鼠存活时间有协同增效作用的趋势。结果见表7。表7新生胶囊与环磷酰胺合用对S180腹水肿瘤小鼠存活时间的影响注
15、：与模型组比拟,*P0.05,*P0.014小结新生胶囊是由黄芪、乳香、没药、重楼、人工麝香等中药组成的复方制剂，具有清热解毒、活血消癥、散结止痛的成效，临床上将用于食管癌、胃癌及恶疮肿毒等症的辅助用药。动物试验说明：(1)新生胶囊具有一定的祛邪作用。大、中剂量组能显著抑制S180荷瘤小鼠和BALB/小鼠G-803移植瘤的生长，与肿瘤模型组比拟差异有显著性P0.05。(2)小鼠灌胃新生胶囊，对S180腹水肿瘤小鼠生命存活时间与模型组比拟差异无显著性P0.05。但小鼠灌胃新生胶囊3.15g/kg同时注射环磷酰胺5g/kg可以延长S180腹水小鼠存活时间，生命延长率为33.2%38.86%，提示新生胶囊与环磷酰胺合用对S180腹水小鼠存活时间有一定协同增效作用趋势。(3)新生胶囊具有一定的扶正作用。小鼠灌胃新生胶囊，对注射环磷酰胺引起的免疫功能降低有一定的改善作用，对血流中碳粒的吞噬廓清才能有一定的增强作用。进步吞噬指数K、增加血清溶血素含量，与模型组比拟差异有显著性P0.05。5讨论肿瘤，尤其是恶性肿瘤是危害人民安康的重大疾病之一，临床上对肿瘤的治疗，无论是放疗
