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1、小鼠白细胞介素2(I-）试剂盒使用方法检测范围： 9T30 ng/ -200 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2（IL2）水平。用纯化的小鼠白细胞介素2（IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（I-2）,再与HRP标记的白细胞介素2（IL2)抗体结合，形成抗体抗原酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TB在HR酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（I-2）呈正相关。用酶标仪在nm
2、波长下测定吸光度(D值),通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素（IL)浓度。 试剂盒组成 130倍浓缩洗涤液20l瓶7终止液l瓶2酶标试剂6ml瓶8标准品（2400n/L)0.ml1瓶3酶标包被板1孔8条标准品稀释液1.5l瓶4样品稀释液6ml1瓶10说明书份显色剂A液1瓶1封板膜2张 6显色剂B液6l1瓶1密封袋1个标本要求 1标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-2保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下
3、列图表在小试管中进行稀释。1200 ng/5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液600 ngL4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液30 ng/L3号标准品150l的号标准品加入150l标准品稀释液15 ng/L2号标准品1的号标准品加入5标准品稀释液7 n号标准品50l的2号标准品加入150标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液l，然后再加待测样品10l（样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁，轻轻晃动
4、混匀。3. 温育:用封板膜封板后置温育3分钟。 4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水3倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50，空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50，再加入显色剂B50l，轻轻震荡混匀,37避光显色1分钟.10. 终止:每孔加终止液5l，终止反应（此时蓝色立转黄色)。11. 测定：以空白空调零，5n波长依序测量各孔的吸光度（O值)。 测定应在加终止液后1分钟以内进行。操作程序总结:计算 以标准物的浓度为横坐标,值为纵坐标,
5、在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的D值代入方程式，计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡-分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多,推荐使用排枪加样。4 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本O
6、D值大于标准品孔第一孔的值),请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(n5）。5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9本试剂不同批号组分不得混用。1. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存：;2-8。2有效期：6个月内容总结（1)小鼠白细胞介素2(IL2)试剂盒使用方法检测范围: 96T30n/ -120ng/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2(L-)含量(2）试剂盒组成 标本要求.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验
