《甘肃省地方标准--马铃薯种薯茎尖脱毒和组培苗繁育技术规程》由会员分享，可在线阅读，更多相关《甘肃省地方标准--马铃薯种薯茎尖脱毒和组培苗繁育技术规程（10页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、DB62/T1703 2009DB62ICS：65.0200B 611备案号：甘 肃 省 地地 方 标 准准DB622/T117033 20009马铃薯种种薯茎尖尖脱毒和和组培苗苗繁育技技术规程程20099 044 20 发布 22009905 155实施甘肃省质质量技术术监督局局发 布布前言本标准由由甘肃省省农牧厅厅提出。本标准起起草单位位：甘肃肃省种子子管理总总站、定定西市旱旱作农业业科研推推广中心心、甘肃肃省农科科院马铃铃薯研究究所。本标准主主要起草草人：常常宏、第第红君、蒲蒲育林、王王一航、戴戴铮、王王瑞英、杨杨培达、齐齐恩芳马铃薯种种薯茎尖尖脱毒和和组培苗苗繁育技技术规程程1 范围本
2、标准规规定了马马铃薯种种薯的定定义、有有害生物物、生产产体系、质质量要求求、茎尖尖脱毒流流程和组组培苗繁繁育技术术要求。本标准适适用于马马铃薯种种薯茎尖尖脱毒和和组培苗苗的生产产。2规范性性引用文件件下列文件件中的条条款通过过本标准准的引用用而成为为本标准准的条款款。凡是是注日期期的引用用文件，其其随后所所有的修修改单（不不包括勘勘误的内内容）或或修订版版均不适适用于本本标准，然然而，鼓鼓励根据据本标准准达成协协议的各各方研究究是否可可使用这这些文件件的最新新版本。凡凡是不注注日期的的引用文文件，其其最新版版本适用用于本标标准。GB 773311 马马铃薯种种薯产地地检疫规规程 GB 1181
3、333 马马铃薯脱脱毒种薯薯NY/TT 1221220006 马铃铃薯脱毒毒种薯繁繁育技术术规程3 术术语和定定义下列术语语和定义义适用于于本标准准。3.1 马铃薯薯种薯符合GBB 1881333规定相相应质量量要求的的原原种种、原种种和大田田用种。3.2 组培苗苗马铃薯优优良品种种的块茎茎，经茎茎尖剥离离病毒、组组织培养养获得的的，经质质量检测测后不带带有PVVX、PPVY、PPVS、PPLRVV、PVVA、PPVM和和马铃薯薯纺锤块块茎类病病毒，用用于生产产原原种种或原种种的再生生苗。3.3 原原种种 prre-eelitte用育种家家种子、脱脱毒组培培苗或试试管薯，在在防虫网网、温室室等
4、隔离离条件下下生产，经经质量检检测达到到GB 181133要要求的马马铃薯种种薯。3.4 原种 eliite用原原种种作种薯薯，在良良好隔离离环境中中生产的的，经质质量检测测达到GGB 1181333要求求的种薯薯。3.5 一级种种薯（大大田用种种）quualiifieed 在相对隔隔离环境境中，由由原种作作种薯生生产的，经经质量检检测后达达到GBB 1881333要求的的，用于于生产二二级种薯薯或商品品薯的种种薯。3.6二二级种薯薯（大田田用种）qualified 在相对隔隔离环境境中，由由一级种种薯作种种薯生产产的，经经质量检检测后达达到GBB 1881333要求的的，用于于生产商商品薯的
5、的种薯。3.7 外部缺缺陷畸形、次次生、龟龟裂、虫虫害和机机械损伤伤的薯块块。4 有害生生物4.1非非检疫性性限定有有害生物物4.1.1 病病毒马铃薯XX病毒马铃薯YY病毒马铃薯AA病毒马铃薯SS病毒马铃薯MM病毒马铃薯卷卷叶病毒毒4.1.2 细细菌马铃薯青青枯病菌菌马铃薯湿湿腐病马铃薯软软腐病马铃薯黑黑胫病菌菌4.1.3 放放线菌马铃薯普普通疮痂痂病4.1.4 真真菌马铃薯晚晚疫病马铃薯干干腐病马铃薯黑黑痣病4.1.5 虫虫马铃薯块块茎蛾4.2 检疫性性有害生生物4.2.1 类类病毒马铃薯纺纺锤块类类病毒4.2.2 细细菌马铃薯环环腐病菌菌4.2.3 植植原体马铃薯丛丛枝植原原体4.2.4
6、线线虫马铃薯白白线虫马铃薯金金线虫4.2.5虫马铃薯甲甲虫5 种薯生产产体系种薯生产产体系包包括两个个阶段：即在设设施条件件下生产产组培苗苗、原原原种和在在田间自自然条件件下生产产原种、一一级种薯薯和二级级种薯。种种薯（苗苗）的质质量检验验将针对对上述两两个阶段段不同环环节产出出的产品品进行。种薯生产产体系流流程见图图1。组培苗原原种原种一级种薯二级种薯图1 种薯生生产体系系流程图图6 质量要求求6.1种种薯分级级种薯级别别分为原原原种、原原种、一一级种薯薯和二级级种薯。6.2质质量要求求种薯生产产产地检检疫应符符合GBB 73331规规定。一一旦发现现检疫性性病虫害害，应立立即向检检疫部门门
7、报告，并并由其根根据病虫虫害种类类采取相相应措施施。同时时该地块块所有马马铃薯不不能作为为种薯。组培苗经经质量检检测后不不带有PPVX、PPVY、PPVS、PPLRVV、PVVA、PPVM和和马铃薯薯纺锤块块茎类病病毒。7 脱毒流流程7.1培培养基制制备7.1.1培养养基分装装：培养养基分装装于器皿皿中。7.1.2消毒毒：器皿皿置于0.8kgg/cmm21.11kg/cm22消毒锅锅1200高压灭灭菌200minn。7.2 材料的的选择和和处理7.2.1取材材于经审审（认）定定品种的的健康腋腋芽或休休眠芽。7.2.2在生生长季节节选择具具有原品品种典型型特征的的单株材材料，收收获并通通过休眠眠
8、后，将将薯块在在温室或或培养箱箱内进行行催芽处处理。7.3 茎尖脱毒毒7.3.1无菌菌工作条条件：组组培室用用甲醛溶液液熏蒸后后，用紫紫外线灯灯照射440miin。工作人人员用肥肥皂水洗洗手，775%酒酒精擦拭拭消毒，操操作用具具置烘箱箱1800消毒。7.3.2病毒毒钝化：将马铃铃薯薯块块在366条件下下处理446周后制取取脱毒材材料，用紫外外线照射射脱毒材材料100 miin，或在培培养基中中加入病病毒唑，使使病毒失失活钝化化。7.3.3茎尖尖消毒：待芽萌萌发至22cm3cmm时，选选取粗壮壮的芽，用用解剖刀刀切下，芽芽段用无无菌水冲冲洗200 miin，再再用755%的酒酒精浸蘸蘸一下，放
9、放入无菌菌杯内用用0.11%的HHgcll水浸泡泡5 mmin或或10的次氯氯酸钠浸浸泡155 miin，用无菌菌水冲洗洗23次。7.3.4茎尖尖剥离及及接种：将茎尖尖放在无无菌滤纸纸上吸干干水分，在在3040倍倍解剖镜镜下用解解剖刀、解解剖针剥剥取带一一个叶原原基的茎茎尖（00.2mmm0.44mm），将生长长点迅速速按无菌菌操作程程序接入入培养基基中。7.4 组培苗苗培养7.4.1温度度1525，光照照强度220000Lx30000Lxx，光照照时间116h/d，培培养1220d1400d。7.4.2当看看到明显显生长的的小茎，叶叶原基形形成可见见的小叶叶，转入入无生长长调节剂剂的培养养基
10、中。7.4.3小苗苗继续生生长并形形成根系系，发育育成34个叶叶片的小小植株，就就可继续续扩繁。7.4.4病毒毒检测：以单株株为系进进行扩繁繁，苗数数达15502000株时，随随机抽取取34个样样本，每每个样本本1015株株，进行病病毒检测测，采用用GB 181133附附录A：酶联免免疫吸附附试验法法和附录录B：往往复双向向聚丙烯烯酰胺凝凝胶电泳泳法确认认不带有有PVXX、PVVY、PPVS、PPLRVV、PVVA、PPVM和和马铃薯薯纺锤块块茎类病病毒。8 组培培苗的繁繁育8.1 组培苗苗的繁育育8.1.1 培培养基制制备：将将MS培培养基配配制成液液，装入入器皿（MMS培养养基配方方见NY
11、Y/T11212220006附录录L表LL.1），置于于0.88kg/cm21.11kg/cm22消毒锅锅1200高压灭灭菌200minn。8.1.2组培苗苗处理：将组培培苗置于于超净工工作台上上，器皿皿表面用用75%的酒精精擦试消消毒，取取出组培培苗，按按单茎切切段，每每个段带带一片小小叶摆放放在培养养基面上上。8.1.3组培培苗培养养条件：温度11525，光照强强度20000LLx30000Lxx，光照照时间116h/d。8.2 组培苗苗的快速速繁育8.2.1 基基础苗繁繁育8.2.1.11按8.1.11、8.1.22配制培培养基和和处理组组培苗。8.2.1.22切段底底部（根根部）不不作为基基础苗，直直接转入入移栽用用苗培养养。其他他各段作作为基础础苗进行行繁殖。8.2.1.33 培养养温度11520，光照强强度20000LLx30000Lxx，光照照时间110h/d14h/d。8.2.1.44 培养养周期330d40dd。8.2.2移栽栽用苗的的繁育8.2.2.11按8.1.11、8.1.22配制培培养基和和处理组组培苗。8.2.2.22培养温温度15525，光照强强度30000Lx 40000Lx，光光照时间间14hh/d16h/d，采采用自然然光照培培养室进进行培养养。8.2.2.33 培养养周期115d20dd，苗长长出5叶叶、5ccm以上上即可移移栽。- 2 -
