电转化大肠杆菌实验

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电转化大肠杆菌所需试剂和器材:无水乙醇;70%乙醇;双蒸水;感受态细菌(-80C冰箱);LB培养 基;抗生素(根据实验目的选择);1.5ml ep管;电转杯;电转仪操作步骤:1. 将电转杯以此用双蒸水、70%乙醇、无水乙醇充分清洗(很重 要,否则电转杯短路,实验就会失败!),置于空气中充分晾干 后,放于冰上;2. 将待电转DNA与感受态细菌混合,加入电转杯的缝隙处。(除 了腺病毒同源重组外,均使用1mm电转杯)3. 选择电转仪的Mannul选项,调节电压为1.8KV,按 Pulse键进 行电转;用无抗生素的LB培养基500 Al冲洗电转杯中细菌,随 后转入含抗生素的LB培养基中培养或涂布在抗生素平板上筛 选单菌落。注意事项:1. 电转杯要充分预冷2. 在进行腺病毒的重组实验室,要选用2mm内径的电转杯,其它 均使用1mm内径的电转杯。

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