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1、常用pH缓冲溶液的配制和pH值序号溶液名称配制方法pH值1氯化钾-盐酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl 与 25.0 ml 0.2 mol/L KCl 混合均匀后，加水稀释至100 ml1.72氨基乙酸-盐酸在500 ml水中溶解氨基乙酸150 g,加480 ml浓盐 酸，再加水稀释至1L2.33一氯乙酸-氢氧化钠在200 ml水中溶解2 g 一氯乙酸后，加40 g NaOH, 溶解完全后再加水稀释至1L2.84邻苯二甲酸氢钾-盐酸把25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与6.0 ml0.1 mol/L HCl混合均匀，加水稀释至100 ml3.65邻苯二甲酸氢钾-氢
2、氧化 钠把25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与17.5ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml4.86六亚甲基四胺-盐酸在200 ml水中溶解六亚甲基四胺40 g,加浓HCl 10ml, 再加水稀释至1L5.47磷酸二氢钾-氢氧化钠把 25.0 ml 0.2 mol/L 的磷酸二氢钾与 23.6 ml 0.1mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml6.88硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L的硼酸-氯化钾与4.0 ml 0.1mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml8.09氯化铵-氨水把0.1 mol/
3、L氯化铵与0.1 mol/L氨水以2： 1比例 混合均匀9.110硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L的硼酸-氯化钾与43.9 ml 0.1mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml10.011氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠把49.0 ml 0.1 mol/L氨基乙酸-氯化钠与51.0 ml0.1 mol/L NaOH混合均匀11.612磷酸氢二钠-氢氧化钠把 50.0 ml 0.05 mol/L NaHPO 与 26.9 ml 0.1 mol/L24NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml12.013氯化钾-氢氧化钠把 25.0 ml 0.2 mol/L KCl
4、与 66.0 ml 0.2 mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml13.0、常用溶液的配制(一)溶液配制注意事项1. 药品要有较好的质量试剂分为优级纯(保证试剂，Guaranteed reagent, G. R.)、分 析试剂(Antalytical reagent, A. R.)化学纯(Chemical pure, C. P.)和实验试剂(Laboratory reagent, L. R.)等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液 用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。2药品称量要精确。3. 配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH
5、在5.57.0 之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双 蒸馏水或去离子水。4. 配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。 （二）0.067 （1/15） Mol/L 磷酸缓冲液1. 1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KHP0 , A. R.） 9.08g，用蒸馏24水溶解后，倾入1000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1000ml ）。2. 1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（NaHPO，A.R. ） 9.47g （或者24Na2HPO42屯0 11.87g）用蒸馏水溶解后，
6、放入1000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度 （1000ml）。3. 按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。附表1磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH1/15Mol/L Na HPO1/15Mol/L KH POpH1/15Mol/L Na HPO1/15Mol/L KH PO242424245.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410
7、.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0(三)0.15Mol/L PB 液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/L Na HPO (ml)0.15Mol/L NaH PO (ml)24246.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0Na HPO 2H O
8、 分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含 26.7g/L。2 4 2Na HPO 12H O 分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含 53.7g/L。2 4 2NaH PO H O 分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含 20.7g/L。2 4 2NaH PO 2H O 分子量=156.03 0.15Mol/L 溶液含 23.4g/L。242(四) 0.2Mol/L PB缓冲液附表3 0.2mol/L PB缓冲液配制法pH0.2 Mol/L Na HPO (ml)0.2Mol/L NaH PO (ml)24245.88.092.06.012.387.76.218.
9、581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/L Na HPO 2 H O 溶液 35.61g/L242Na HPO 12 H O 溶液含 71.64g/L2420.2Mol/LNaH PO H O 溶液含 27.60g/L242NaH PO 2 H O 溶液含 31.21g/L242欲配0.1Mol/L PB缓冲液则在0.2Mol/L PB缓冲液的基础上加屯。稀释1倍即可。欲配制PBS 液时，则在溶液中加0.85%的NaC
10、l溶液即可。(五) 无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)(0.15Mol/L PH 7.2)NaCl 8.0gKCl 0.2gNaHPO 1.15g24(如为 Na HPO 12HO,则为 2.89g)242KHPO 0.2g24将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115C高压灭菌10min15min,存 在4C冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。（六）硼酸盐缓冲液（Borate saline buffer）1. 硼酸（H BO ）330.2Mol/L 硼酸：硼酸 12.37g 加水至 1 000ml。2. 硼砂（Na BO ）2470.05Mol/L
11、 硼砂：硼砂 19.07g 加水至 1 000ml。 附表4不同pH的0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法pH0.05Mol/L 硼砂（ml）0.2Mol/L 硼酸（ml）pH0.05Mol/L 硼砂（ml）0.2Mol/L 硼酸（ml）7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0（七）巴比妥缓冲液1. pH8.2离子强度0.05Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥钠 47.6g蒸馏水 3 000ml1.17N HCl 55.0ml（1.17 N HCl=193ml 浓 HCl 加 1 807ml 蒸馏水）
12、 将4.76g巴比妥钠溶于3 000ml蒸馏水。加 1.17 N HCl 55ml。 用HCl调节pH到& 2,并加蒸馏水至4 265ml。2. pH8.4 0.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥 1.84g巴比妥钠 10.30g加蒸馏水至 1 000.00ml3. pH8.6 0.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥 1.66g巴比妥钠 12.76g加蒸馏水 1 000.00ml（八）0.2Mol/L醋酸盐缓冲液 见表附表5附表5 0.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法pH0.2Mol/L0.1Mol/LpH0.2Mol/L0.1Mol/L23C37CTris (ml)HCl (ml)23C37CTr
13、is (ml)HCl (ml)9.108.952558.067.902527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5（九）三羟甲基甲烷一盐酸缓冲液（TrisHC1缓冲液）不同 pH，0.05Mol/L25ml0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷加x mlO.INHCl，加水稀释至100ml （见下表） 附表6 TrisHCl缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)23C37C23C37C9.108.962558.057.902527.58.928.78257.57.967.822530.08.748.602510.07.877.732532.58.
