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1、生物实验:THP-细胞培养 T-是人外周血的单核细胞系，最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞，适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为：A2，A9,B5,DR1,DRw。工具原料 培养基:RPMI-164 (Inrogen 11875-9) 胎牛血清：etaloie Seum(B, GICO#109-141) 二甲亚砜：DMS (IGA D2650） 双抗 (Pcili/Streptomyci)（BC #540-122）方法/步骤1. 1细胞培养：TP-1细胞培养于含有0FS+%P/的RPMI-1640培养基中，培养环境为7，5CO2。可以每隔3-4天加一些新鲜的培养基，或直接
2、传代。2. 2细胞传代:当细胞密度达到约8105cels/左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x15 ces/ml。3. 3细胞冻存:取差不多x107个细胞，用1ml含有10%DSO的S重悬，转入冻存管，于-80冰箱过夜。第二天移入液氮中长期保存。ND注意事项 细胞养不好,可能的原因有，H-细胞特别依赖细胞浓度,ATC上0 5到106每M，是一个很高的密度，细胞少了就不太容易养好。 细胞株的来源很重要，如直接来源于ATC(Aerican TpeCulturCin 美国模式菌种保藏中心）生命力要强于国内细胞库的。 注意细胞的密度一定要高，介
3、于5105 10/M之间,增值的快。细胞数量太少,不适合THP-1生长,一般状态不好的TP1在培养了3天后数量仍然不多，继续培养一天或者两天,培养基严重泛黄,细胞数会增加。这一点不同于同是单核细胞系的93细胞。 HP-1细胞适合在细胞Ph环境偏酸性环境生长，对培养基变化非常敏感,所以 尽量使用相同Ph的640。 传代后切忌常移出培养箱观察，否则会影响细胞生长,状态变差,一般首先表现为细胞内颗粒变多。一般TP-1 生长相当快，对于状态已经不好的情况,建议传代后34天再观察,一般天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1)T-1细胞喜欢酸性条件,你不要老是换培养基。越酸的条件,细胞密度越大,细胞就长得越好;2)不要频繁换液,一般2-3次换液离心一次（只是补充培养基)3) 使用14(AT推荐）,注意加碳酸氢钠25g就可以了，宁酸勿碱; 4）注意冻存的时候密度大些,推荐用血清冻存。 复苏比较慢,建议开始用小瓶，不要用一次性的。内容总结(1）生物实验：THP- 细胞培养 H-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者(）其表面抗原LA型为:A2，A9，B5,DRw1，w(3)3细胞冻存:取差不多1x10个细胞,用ml含有1%DMS的FB重悬,转入冻存管，于-8冰箱过夜(4）传代后切忌常移出培养箱观察，否则会影响细胞生长,状态变差,一般首先表现为细胞内颗粒变多
