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1、发酵液中磷的测定目的建立一个发酵液中磷的检验操作规程。范围适用于需进行磷检测的发酵液等。职责化验室人员对本文实施负责。方法一、实验原理在酸性溶液中，PO 3-与钼酸铵作用，生成磷钼酸铵,当加入还原剂米吐尔4时， 高价钼还原成低价钼(蓝色)符合比尔定律， 可用分光光度计在 650nm 比 色测定。反应式如下：2H3PO4+24(NH4)3MoO4+21H2SO4 2(NH4)3 PO412 MoO3+21(NH4)3SO4+24H2O(NH4)3 PO4I2 MOO3 (MoO4 4MoO3) H3PO4(钼兰)二、实验试剂钼酸铵溶液：称取 20g 钼酸铵， 溶解于 200ml 水中，如混浊过滤
2、，然后 倒入 300ml 浓硫酸与 200ml 水的混合冷却液中，边加边搅拌。混合均匀后， 置于棕色玻璃瓶中，冰箱内保存。米吐尔溶液：称取o.7g米吐尔，无水亚硫酸钠3.5g，分别置于两个烧 杯中，加少量的水，使二者完全溶解，混合到一块，再加入亚硫酸氢钠 153.5g 加水溶解后，稀释到700ml，摇匀过滤后，置于棕色玻璃瓶中，冰箱内保存。10%三氯醋酸：称取50g三氯醋酸加水至500ml，溶解后，摇匀即可。三、实验方法1标准曲线的制定精确称取 105 度干燥 4 小时恒重的 KH PO 0.4384g 于 1000ml 容量瓶中，24加 0.05mol/L 的 H2SO4 20ml ，溶解后
3、加水稀释至刻度线，摇匀。此液含磷量 为 100mg/L 。精确吸取该液 1 ml 于 100 ml 容量瓶中，加水稀释至刻度线，摇 匀，此液含磷量为 1mg/L。KH PO （以磷为浓度lmg/L），取8支洁净的25ml比色管分别注入0-7 ml 24KHPO溶液，依次往比色管中加入lml钼酸铵，1ml米吐尔，用水定容到10ml,24放水浴锅中煮20分钟，冷却测其吸光度，做标准曲线。 2发酵液中磷的测定取发酵液2.5ml，力口 10%三氯醋酸5 ml，水解10分钟，定容50ml,过 滤，取滤液1 ml,加入lml钼酸铵，1ml米吐尔，用水定容到10ml,放水浴 锅中煮20分钟，冷却测其吸光度。
