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1、沭阳县人民医院检验科临床检验室SYSMEX KX-21血细胞分析仪作业指导书文件编号：Q-1版本：第一版页号/总页数：1/9 SYSMEX KX-21血细胞分析仪作业指导书1. 检验目的SYSMEX KX-21血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。2. 检测原理2.1 白细胞、红细胞及血小板采用电阻抗法进行计数。即在细胞检测器微孔的两侧各有一个电极，两电极间通有恒定电流，经过稀释液（电解质溶液）稀释的血样（血细胞）在通过检测器微孔时，产生了一个电脉冲；脉冲的高低代表
2、细胞体积的大小，脉冲的个数代表细胞的数量。2.2 血红蛋白浓度采用无氰HGB测量法（氧合血红蛋白法）进行测量。即在稀释的血样中加入溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红蛋白，后者在瞬时间被转化生成氧合血红蛋白，在555nm处其吸光度与只有稀释液时的吸光度相比较以求出HGB。3. 标本3.1 临床护士抽取病人静脉血1-2ml置于含EDTA-3K的真空管内抗凝；3.2 采血后立即送到检验科血细胞化验室；3.3 血量不够1ml或血液凝固、溶血或脂血标本不能做检测。4 设备和试剂4.1 SYSMEX KX-21血细胞分析仪(主机号：A3878)；新仪器安装后首先要鉴定，具体步骤见仪器手册。4.2 试剂：包括稀
3、释液、溶血剂和清洁液。4.3 购买的试剂应放室温保存，注意防尘、防潮。4.4 开封后的试剂应尽快用完，超过有效期的试剂不能使用。5 校准步骤5.1 SYSMEX KX-21 血细胞分析仪安装或大修后需要进行校准；5.2 SYSMEX KX-21血细胞分析仪检测结果中的全部或某一项不准确，需要进行校准；5.3 仪器在进行校准前必须对检测器、血红蛋白测量池等管道液路系统进行彻底清洗，操作过程详见SYSMEX KX-21血细胞分析仪使用手册。5.4 SYSMEX KX-21血细胞分析仪的校准包括末梢血和全血两套系统，操作过程详沭阳县人民医院检验科临床检验室SYSMEX KX-21血细胞分析仪作业指导
4、书文件编号：Q-1版本：第一版页号/总页数：2/9见该仪器使用手册。 6 操作步骤6.1 试剂检查：开机前检查试剂是否够量，有无混浊变质，管道有无扭结，清空废液桶。6.2 开机与本底检测：打开UPS电源开关，等待60秒钟后，再打开主机电源开关，仪器进行系统检查后进行试剂本底测试，试剂本底必须满足下列要求：WBC0.3109/L、RBC 0.021012/L、HGB2g/L、PLT10109/L。6.3 末梢血测量：6.3.1用加液注射器吸取CELLPACK稀释液500ul加入到试管中，将采集的20ul末梢血注入到稀释液中,充分混匀制成稀释血样。6.3.2确认当前LCD画面为准备测量状态。按下
5、键，将画面变换至变换模式画面，选择 预先稀释（PD） ，按 键后，进行检测模式的切换，回到主画面。6.3.3将混匀的稀释血样，放在进样针下,按 键进行计数，结果自动打印。6.4 全血测量：测量之前，确保确认当前LCD画面处于全血模式（WD）下，将临床送检的合格抗凝静脉血标本编号后放入试管架中，测试前将血液颠倒混匀后,放在进样针下，按 键进行计数，结果自动打印。6.5 标本号码的输入：按下面板上SAMPLE No 键，标本号码激活，这时输入需要的标本号码，如：24 按ENTER 键确认，LCD画面进入准备测量状态。6.6清洗与关机：检测完毕后，按下SHUTDOWN键，仪器进入关机画面，将清洗液放
6、在吸样针下，按 键，仪器自动吸引清洁液，对整个测量系统进行清洗。约5分钟清洗结束，即可关掉主机。7 质量控制7.1 科内自制质控物7.2 质控措施（见科内室内质控）8 干扰因素8.1严重的黄疸或脂血使血红蛋白结果假性增高；8.2红细胞冷凝集可使红细胞、白细胞和血小板计数结果假性减低，MCV假性增高；8.3冷凝球蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高；8.4有血小板凝集使血小板计数结果假性减低。沭阳县人民医院检验科临床检验室SYSMEX KX-21血细胞分析仪作业指导书文件编号：Q-1版本：第一版页号/总页数：3/99 计算 按仪器设计原理，只对红细胞常数（红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白量
7、、红细胞平均血红蛋白浓度）进行计算，可根据RBC、HGB及HCT结果求出。9.1 红细胞平均体积（MCV） 根据RBC及HCT，由下式求出。9.2 红细胞平均血红蛋白量（MCH）根据RBC及HGB，由下式来求出。9.3 红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）根据HCT及HGB，由下式来求出。 9.4 RDW由血细胞分析仪测量获得，是反映周围血红细胞体积异质性的参数。当红细胞通过小孔的一瞬间，计数电路得到一个相应大小的脉冲，不同大小的脉冲信号分别贮存在仪器内装计算机的不同通道，计算出相应当体积及细胞数，统计处理而得RDW。10 生物参考值区间和极限值10.1 血细胞生物参考值区间10.1.1白细胞：
8、 成年人静脉血：3.510.0109/L； 手指血：4.010.0109/L； 新生儿 ：15.020.0109/L； 6个月2岁 ：11.012.0109/L； 10.1.2红细胞 成年男性：4.35.861012/L； 成年女性：3.775.171012/L； 新生儿 ：6.07.01012/L； 10.1.3血红蛋白沭阳县人民医院检验科临床检验室SYSMEX KX-21血细胞分析仪作业指导书文件编号：Q-1版本：第一版页号/总页数：4/9成年男性：135180 g/L； 成年女性：115155 g/L； 新生儿 ：180190 g/L； 10.1.4红细胞压积 成年男性：0.4000.5
9、17； 成年女性：0.3670.467； 10.1.5血小板：100-300109/L 10.1.6 MCV ：80100fL； 10.1.7 MCH ：27.234.3 pg； 10.1.8 MCHC：320360 g/L； 10.1.9 RDW ： 0.145 10.1.10 PCT：男性 0.1830.041；女性 0.1980.042； 10.1.11 MPV：男性 10.071.78fL；女性 10.241.58fL； 10.1.12 PDW：16.8%0.63%； 10.2 血细胞极限值10.2.1 白细胞 0.5109/L10.2.2 红细胞 1.01012/L 10.2.3 血
10、红蛋白 30g/L 10.2.4 血小板 20109/L 11 实验室解释11.1 白细胞计数结果异常11.1.1 白细胞生理变化：11.1.1.1 年龄：初生儿白细胞较高，一般在15109/L左右，个别可高达30109/L以上。通常在34天后降至10109/L左右，约保持3个月，然后逐渐降低至成人水平。初生儿外周血白细胞主要为中性粒细胞，到第69天逐渐下降至与淋巴细胞大致相等。以后淋巴细胞逐渐增多，整个婴儿期淋巴细胞数均较高，可达70%。到23岁后，淋巴细胞逐渐下降，中性粒细胞逐渐上升，到45岁二者又基本相等，形成中性粒细胞和淋巴细胞变化曲线的两次交叉，至青春期时与成人基本相同。11.1.1
11、.2日间变化：白细胞数在静息状态时较低，活动和进食后较高；早晨较低，沭阳县人民医院检验科临床检验室SYSMEX KX-21血细胞分析仪作业指导书文件编号：Q-1版本：第一版页号/总页数：5/9下午较高；一日之间最高值与最低值之间可相差1倍。运动、疼痛和情绪变化、一般的体力劳动、冷热水浴、日光或紫外线照射等，均可使白细胞轻度增多，而剧烈运动、剧痛和激动可使白细胞显著增多。如剧烈运动，可于短时间内使白细胞高达35109/L，以中性粒细胞为主；当运动结束后迅即恢复原有水平 。这种短暂的变化，主要是由于循环池和边缘池的粒细胞重新分配所致。11.1.1.3妊娠与分娩：妊娠期常见白细胞增多，特别是最后1个
12、月，常波动于(1217)109/L之间，分娩时可高达34109/L。分娩后25日内恢复正常。由于白细胞的生理波动很大，只有通过定时和反 复观察才有意义。11.1.2.白细胞病理变化：11.1.2.1增高11.1.2.1.1急性感染：急性化脓性感染时，白细胞增高程度取决于感染微生物的种类、感染灶的范围、感染的严重程度、患者的反应能力。如感染很局限且轻微，白细胞总数仍可正常，但分类检查时可见分叶核百分率有所增高；中度感染时，白细胞总数常增高大于10.0109/L，并伴有轻度核象左移；严重感染时，白细胞总数常明显增高，可达20.0109/L以上，且伴有明显的核象左移。11.1.2.1.2严重的组织损
13、伤或大量血细胞破坏：在较大手术后1236小时，白细胞常达10.0109/L以上，其增多的细胞成分以中性分叶核粒细胞为主。急性心肌梗塞后12天内，常见白细胞数明显增高，借此可与心绞痛相区别。急性溶血反应时，也可见白细胞增多。11.1.2.1.3急性大出血：在脾破裂或宫外孕输卵管破裂后，白细胞迅速增高，常达(2030)109/L。其增多的细胞也主要是中性分叶核粒细胞。11.1.2.1.4急性中毒：化学药物如安眠药、敌敌畏等中毒时，常见白细胞数增高，甚至可达20109/L或更高，代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒及慢性肾炎尿毒症时，也常见白细胞增多，均以中性分叶核粒细胞为主。11.1.2.1.5肿瘤性增多
14、：白细胞呈长期持续增多，最常见于粒细胞性白血病，其次也可见于各种恶性肿瘤的晚期。此时不但总数常达(1020)109/L或更多，且可有较明显的核左移现象，而呈所谓类白血病反应。11.1.2.2减低:11.1.2.1 某些感染：某些革兰氏阴性杆菌如伤寒杆菌感染时，如无并发症，白细胞数均减少甚至可低到2109/L以下。一些病毒感染如流感时白细胞亦减少，可沭阳县人民医院检验科临床检验室SYSMEX KX-21血细胞分析仪作业指导书文件编号：Q-1版本：第一版页号/总页数：6/9能是由于在细菌内毒素及病毒作用下使贴壁的即边缘池粒细胞增多而导致循环池中粒细胞减少所致，也可能与内毒素抑制骨髓释放粒细胞有关。11.1.3.2 某些血液病：如典型的再生障碍性贫血时，呈“三少”表现。此时白细胞可少到1109/L以下，分类时几乎均为淋巴细胞，乃因中性粒细胞严重减少所致的淋巴细胞相对增多。小部分急性白血病其白细胞总数不高反而减低，称非白血性白血病（aleukemic leukemia），其白细胞可1109/L，分类时也呈淋巴细胞相对增多，此时只有骨髓检查才能明确诊断。11.1.3.3 慢性理、化损伤：电离辐射（如X线等）、长期服用氯霉素后，可因抑制骨髓细胞的有丝分裂而致白细胞减少，故于接触和应用期间每周应作一次白细胞计数。11.1.3.4 自身免疫性疾病：如系统性红斑狼疮等，由
