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1、青岛农业大学毕 业 论 文（设计）题 目:酵母工程菌表达的几丁质酶分离纯化及酶学性质研究 毕业论文（设计）诚信声明本人声明：所呈交的毕业论文（设计)是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，论文中引用他人的文献、数据、图表、资料均已作明确标注,论文中的结论和成果为本人独立完成，真实可靠，不包含他人成果及已获得青岛农业大学或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。论文（设计）作者签名: 日期: 年 月 日毕业论文(设计)版权使用授权书本毕业论文（设计)作者同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文(设计）的复印件和
2、电子版，允许论文（设计）被查阅和借阅。本人授权青岛农业大学可以将本毕业论文（设计)全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本毕业论文（设计）。本人离校后发表或使用该毕业论文(设计）或与该论文（设计)直接相关的学术论文或成果时，单位署名为青岛农业大学。论文(设计）作者签名： 日期: 年 月 日指 导教 师 签 名: 日期： 年 月 日毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文）,是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果.尽我所知,除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的
3、研究成果，也不包含我为获得 及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。作者 签名： 日 期： .指导教师签名： 日 期： 使用授权说明本人完全了解 大学关于收集、保存、使用毕业设计(论文)的规定，即：按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务;学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文;在不以赢利为目的前提下,学校可以公布论文的部分或全部内容.作者签名： 日 期： .。.学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导
4、师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担.作者签名: 日期： 年 月 日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权 大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。涉密论文按学校规定处理.作者签名:日期： 年 月
5、 日导师签名: 日期： 年 月 日指导教师评阅书指导教师评价：一、撰写（设计)过程1、学生在论文(设计）过程中的治学态度、工作精神 优 良 中 及格 不及格2、学生掌握专业知识、技能的扎实程度 优 良 中 及格 不及格3、学生综合运用所学知识和专业技能分析和解决问题的能力 优 良 中 及格 不及格、研究方法的科学性;技术线路的可行性；设计方案的合理性 优 良 中 及格 不及格5、完成毕业论文(设计)期间的出勤情况优 良 中 及格 不及格二、论文(设计）质量、论文（设计）的整体结构是否符合撰写规范?优 良 中 及格 不及格、是否完成指定的论文（设计）任务（包括装订及附件）？优 良 中 及格 不及
6、格三、论文(设计)水平1、论文(设计)的理论意义或对解决实际问题的指导意义 优 良 中 及格 不及格2、论文的观念是否有新意?设计是否有创意？优 良 中 及格 不及格3、论文（设计说明书）所体现的整体水平 优 良 中 及格 不及格建议成绩:优 良 中 及格 不及格(在所选等级前的内画“)指导教师: (签名） 单位: (盖章)年 月 日 / 评阅教师评阅书评阅教师评价：一、论文（设计)质量1、论文（设计）的整体结构是否符合撰写规范？ 优 良 中 及格 不及格2、是否完成指定的论文（设计）任务（包括装订及附件）？ 优 良 中 及格 不及格二、论文(设计）水平、论文(设计)的理论意义或对解决实际问题
7、的指导意义 优 良 中 及格 不及格2、论文的观念是否有新意?设计是否有创意？ 优 良 中 及格 不及格3、论文（设计说明书）所体现的整体水平优 良 中 及格 不及格建议成绩： 优 良 中 及格 不及格（在所选等级前的内画“)评阅教师: (签名） 单位： （盖章）年 月 日教研室(或答辩小组）及教学系意见教研室(或答辩小组)评价：一、答辩过程1、毕业论文（设计)的基本要点和见解的叙述情况优 良 中 及格 不及格2、对答辩问题的反应、理解、表达情况 优 良 中 及格 不及格3、学生答辩过程中的精神状态 优 良 中 及格 不及格二、论文（设计）质量1、论文(设计）的整体结构是否符合撰写规范? 优
8、良 中 及格 不及格2、是否完成指定的论文（设计)任务(包括装订及附件）? 优 良 中 及格 不及格三、论文(设计)水平1、论文(设计)的理论意义或对解决实际问题的指导意义 优 良 中 及格 不及格2、论文的观念是否有新意？设计是否有创意？优 良 中 及格 不及格3、论文（设计说明书）所体现的整体水平 优 良 中 及格 不及格评定成绩: 优 良 中 及格 不及格（在所选等级前的内画“”）教研室主任（或答辩小组组长）： (签名)年 月 日教学系意见:系主任: （签名）年月 日目录摘要1Abstat.2引言1 材料与方法41.1实验材料11。1 供试菌株4。 试剂4.13 培养基及有关溶液的配制5
9、11. 主要仪器设备7。2 实验方法12。 酵母工程菌的培养和几丁质酶的诱导分泌表达71。22 N-乙酰氨基葡萄糖（NG）标准曲线的建立71.2。 酵母工程菌产酶曲线的测定1.24几丁质酶的分离纯化81。5几丁质酶的DSPAGE检测81.26 几丁质酶的酶学性质2 结果与分析. N乙酰氨基葡萄糖标准曲线102。2 酵母工程菌产酶曲线的测定112。3 几丁质酶的SS-PAGE检测1124几丁质酶反应的最适温度122。5 几丁质酶反应的最适pH值132。6 几丁质酶的热稳定性137 几丁质酶的pH稳定性132.8 不同金属离子对酶活性的影响142.9 变性剂、蛋白抑制剂和有机溶剂对几丁质酶活性的影
10、响142.10 几丁质酶底物特异性测定153 结论与讨论53.1 结论15。2 讨论63。 展望17致谢17参考文献18酵母工程菌表达的几丁质酶分离纯化及酶学性质研究生物科学专业 李云翔 指导教师 咸洪泉摘要：本文转几丁质酶基因的酵母工程菌株ahi1K进行诱导分泌表达,分离纯化发酵液中的几丁质酶，测定它的酶学性质。结果表明该酶的最适反应温度为0 ，在35 以下相对稳定，最适反应pH值为5。,在pH 5-.5之间稳定。2+、Ag+、Hg2+ 和SDS对酶活性有明显的抑制作用，该酶能特异性降解胶体几丁质.本研究结果为该酶的研究和开发利用提供了科学依据.关键词：酵母工程菌;表达；几丁质酶;酶学性质P
11、rfcationndCharatritiof CitinaseSecrte bYast gering StriStudetmjorngi biiene Yuniang Tutor XianHongqunAbtrat： In wrk， the east engieein strain GStahi- trnsformed wih chitinase eas nced to exre,urifyte hitinase of ermtatin, to deeints enzymolgy crcteization. It s provedth the pial tmperare f thhitinae was 50 anthe htinas activity was elativey stable w t tempraturews udr 5 The opial pHale wa 5.5 an heciiae activty w
