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1、蛋白质含量测定（凯氏定氮法）1原理蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使 蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离， 用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系 数，即为蛋白质含量。2试剂及其配制硫酸钾（分析纯）、五水硫酸铜（分析纯）、浓硫酸（分析纯）、40%NaoH溶 液（400g/L）、蒸馏水0.1N盐酸标准溶液：量取9mL盐酸加适量水稀释至1000mL。4%硼酸：取40g硼酸加水适量溶解后，定容至1000mL容量瓶中。指示剂:甲基红0.1g，漠甲酚绿0.1g，混合定容至100ml 95%乙醇中，在滴定 中加23滴于硼酸中。
2、3仪器消化炉、半自动凯氏定氮仪、天平（0.1mg、0.1g）4分析步骤4.1称1g（精确至0.1mmg）左右样品于消化管中；4.2加7g硫酸钾和0.8g五水硫酸铜；4.3加12mL浓硫酸，慢慢地摇动，将样品用酸浸湿；4.4将涤气装置接在支架中的消化管上，将水抽气泵水龙头全开；4.5将装有涤气装置的消化管连支架放入消化器中；4.6 5min后调小抽气泵水流，使酸恰好吸入涤气罩头；4.7继续消化直至全部样品变为透明的蓝绿色澄清液体，根据样品种类，消 化时间大约在3060min之间（将温度升到420C时开始计时）；4.8消化完毕，将装有涤气装置的消化管连支架一起从消化器中取出冷却 15-20min；
3、4.9在每个消化管中加入25mL蒸馏水；4.10将30mL接受液加入锥形瓶再加2滴甲基红-漠酚绿指示剂，放入蒸馏 器升起持瓶台后，使馏出液出口浸入接受液；4.11将消化管放入蒸馏器，关上安全门；4.12加60mL 40% NaoH加入消化管后进行蒸馏；4.13接受瓶中的溶液呈绿色，表示有碱-氨存在。4.14用标准盐酸溶液滴定馏出液至蓝/灰色为滴定终点，记录盐酸溶液用 量，同时做试剂空白试验。除不加样品外，从消化开始操作完全相同，记录空白 试验消耗盐酸标准溶液的体积。5结果计算粗蛋白(十基 ) =NX(Vi-V2)X0.1X14.007XF/m(1-M%)式中：NHCl标准溶液的浓度，mol/LV 一滴定样品吸收液时消耗盐酸标准体积，mL1V 一滴定空白吸收液时消耗盐酸标准体积，mL2m一样品质量，gM试样水分百分率F一氮转换为蛋白质的系数
