《磁珠偶联抗原方法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《磁珠偶联抗原方法（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、磁珠偶联抗原活化移取 0.5mL （10mg） 的 BioMagPlus 羧基磁珠至 15mL 尖头离心管内，并放置在磁分离架上直到上清液 变完全透彻后，用吸管小心移弃上清。加 5mL of MES 缓冲液充分混匀洗涤 . 将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后 . 用吸管小心移弃上清。 重复 Step 2, 三次. 最后一次洗涤后, 重悬磁珠于 5mL 的 MES 缓冲液中。活化试剂（）， 剧烈振荡摇匀。室温下，将离心管置于旋转混匀仪上活化反应 30 分钟。反应过程中，注意不让磁珠沉淀聚积在一起。将 离心管放在磁分离架上直到上清液变清后.用吸管小心移弃上清。重复 Step 2, 四次。蛋白偶
2、联计算需要偶联的蛋白，抗体量.一般地，每mg活化的羧基磁珠可以偶联20-500ug的蛋白（抗体）。可适 量添加一些载体蛋白，如BSA Fraction V,增加反应体系中的总蛋白量，从而可以起到一定的封闭作用。 保证抗体偶联的正确方向。将蛋白加至 5mL MES 缓冲液中。（吸取50pL蛋白液于950pL的MES缓冲中.配成1： 20的稀释液.标记为偶联反应前蛋白液置于一旁 用于后面的偶联率计算。）将剩下的蛋白液加到装有活化磁珠的离心管内，剧烈振荡混匀，室温下，将离心管置于旋转混匀仪上偶联 反应 16-24 小时。（将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后用吸管小心收集上清.标记为偶联后蛋白液，
3、用于计算偶联 率。）重悬磁珠于5mL MES缓冲液中，振荡摇匀。将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后.用吸管小心移 弃上清。重复 Step 6, 一次加 5mL 的淬灭液，振荡摇匀，室温下，将离心管置于旋转混匀仪上 30 分钟。将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后用吸管小心移弃上清。洗涤和贮存偶联后的磁珠加5mL洗涤缓冲液并剧烈振荡摇匀。将离心管放在磁分离架上直到上清液变清后用吸管小心移弃上清。重复 Step 1, 三次。最后一次洗涤后, 重悬磁珠于 2mL 洗涤缓冲液内，此时磁珠的浓度约为5 mg/mL.置于 2-8 摄氏度保存。0.05M MES配方：2- （N-吗啉代）乙磺酸，用超纯水配制即可
