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1、斐林试剂与班氏试剂比较高中生物教材中的有关实验中用到了斐林试剂和班氏试剂，二者都可用于鉴定可 溶性还原糖，但两种试剂的配制、反应原理及使用方法均有所不同，教材只介绍了斐林试剂 的配制和使用方法，对班氏试剂的配制和反应原理没做任何解释。班氏试剂是如何配制的？ 与斐林试剂的配制、反应原理有何不同？学生对此有较多疑问，现解释如下。1. 斐林试剂的配制、使用方法及反应原理斐林试剂由甲液(0.1g/mlNaOH)和乙液(0.05g/mlCuSO4)组成，用于鉴定可溶 性还原糖，使用时将等量的甲、乙液混合均匀，取适量加入待测液:此时溶液呈蓝色。沸水 浴加热2min左右，即可观察到有砖红色沉淀生成，说明待测
2、液中有可溶性还原糖。甲、乙液混合时，生成了 Cu(OH)2，而新制的Cu(OH)2在还原性糖的作用下，被还原 为CU2O砖红色沉淀。实验过程中，必须先把甲、乙液等量单混合均匀，使Cu(OH)2充分生成。 如果先后或者分别把NaOH和CuSO4溶液加入到含有还原性糖的组织提取液中，其中的有机 酸会与NaOH迅速反应，使反应物中没有Cu(OH) 2或者Cu(OH) 2量不足，从而使还原性糖与 Cu(OH)2的反应不能进行或现象不明显，影响还原性糖的鉴定。2. 班氏试剂的配制、使用方法及反应原理班氏试剂一般用于尿糖的测定，有时也用于其他实验中可溶性还原糖的鉴定。配 制方法：取柠檬酸钠86.5g和无水
3、碳酸钠50g放入1000ml锥形瓶中，加水350ml，加热至 溶解。另取100ml锥形瓶加入硫酸铜8.65g，加水约50ml，加热溶解。待二者冷却至室温， 将硫酸铜溶液慢慢倒入前液，随时搅匀，并补足水量至500ml。使用时，取1ml班氏试剂加入试管，加入糖尿病患者的尿液0.1ml，混匀后沸水浴 加热，可观察到溶液开始为蓝色，后来出现黄绿色、土黄色或砖红色沉淀，分别反映出患者 尿液中糖含量的多少，结果见下表。沸水浴加热后的现象(g/dL)葡萄糖含量色透明蓝无加热时无变化，仅冷却后有少量沉淀微量，约0.5以下加热1min后即出现少量黄绿色沉淀少量，约0.51加热约1015s即再现土黄色沉淀中量，约
4、12加热时很快出现多量砖红色沉淀大量，约2以上班氏试剂在配制过程中，当把硫酸铜溶液倒入由柠檬酸钠和无水碳酸钠配制的溶 液中时，硫酸铜与碳酸钠和柠檬酸钠相遇，能产生出一种可溶性的又能离解出CU2+的可溶性 络盐，即柠檬酸钠此时能防止氢氧化铜沉淀的形成，做了一种亲水性掩蔽络合物形成剂。当 利用班氏试剂测定还原性糖时，还原性糖在这种碱性溶液中能将CU2+还原为Cu+，Cu+再与OH -合成黄色的CuOH，加热后，CuOH即变成砖红色的氧化亚铜（Cu2O）沉淀。综上所述，斐林试剂与班氏试剂在配制和使用上均有所不同，不能混为一谈。 另外，斐林试剂不稳定，必须现配现用，而班氏试剂配制好以后可较长时间保存。
