上海交通大学遗传学果蝇杂交实验方案

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1、果蝇杂交实验方案1.实验的目的及原理:1.1 验证基因伴性遗传的规律1.2 验证基因连锁与交换规律并计算重组值1.3 伴性遗传基本原理果蝇 XY 性染色体 雌蝇 XX 雄蝇 XY1.4 三点测验验证连锁遗传规律 基因在染色体上线性排列2.实验材料:2.1 黑腹果蝇,Drosophila melanogaster2.2 黑腹果蝇生活史2.3 黑腹果蝇的饲养方法2.3 研究的性状及显隐性3. 实验技术流程亲本的纯种培养杂交亲本的确定杂交的遗传式 后代的性状观察与记录 实验结果的分析与讨论4. 实验的步骤4.1 亲本的纯种培养4.1.1 亲本饲养瓶的准备 野生型和白眼突变型(正反交)4.1.2 果蝇

2、的麻醉与转瓶4.2 杂交 1(伴性遗传的观察)4.2.1 杂交用饲养瓶的准备4.2.2 亲本处女蝇的挑选第八天, 19:00,待培养瓶中出现蛹并且呈黑色时,将两个品系的亲代果蝇麻醉 弃去,野生型品系继续培养待用;第九天, 7:00,将孵化的突变型果蝇麻醉后分出雌蝇,至另一培养瓶,培养处女 蝇待用。19:00,继续挑选出雌雄蝇,放入处女蝇培养瓶中。此后每12 小时挑选 一次,直到挑选出 10 只处女蝇。4.2.3 雄性果蝇的挑选麻醉野生品系,挑出10只雄果蝇,放入处女蝇培养瓶中,杂交15C培养;4.2.4 F1 代生长情况的观察上述杂交果蝇培养八天后,将亲代果蝇麻醉弃去;四至五天后F1成蝇出现,

3、观察子一代性状并记录,移出10对至另一管培养4.2.5 F1 代性状的观察记录及统计4.3 杂交 2(子一代杂交)4.3.1 杂交用饲养瓶的准备4.3.2 杂交亲本的挑选与转瓶子一代中收集10对果蝇, 15摄氏度继续培养。4.3.3 F2 代生长情况的观察 培养8天后,麻醉子一代除去。4-5 天后,观察子二代果蝇4.3.4 F2 代性状的观察记录及统计4.4 杂交 3(连锁与交换的观察)4.4.1 杂交用饲养瓶的准备4.4.2 杂交亲本的挑选与转瓶 选择野生型和白眼小翅的突变型作为亲本4.4.3 F2 代生长情况的观察 上述杂交果蝇培养八天后,将亲代果蝇麻醉弃去;四至五天后F2成蝇出现,观察子

4、一代性状并记录4.4.4 F2代性状的观察记录及统计 5实验的结果与分析5.1 果蝇的饲养及出现的问题1. 果蝇杂交实验的成败在于挑处女蝇。果蝇由蛹孵化为成虫后, 12 小时内不会交 配,此段时间挑选的雌果蝇都是处女蝇,超过计划12小时,培养瓶内的雌蝇可 能已经交配,而雌果蝇交配一次可多次产卵。所以,做雌果蝇杂交实验一定要严 格掌握,挑选确定的处女蝇;2. 培养瓶和培养基要保持干燥,避免麻醉后的果蝇被黏住无法动弹;3. 棉花塞大小适当,塞在瓶口上不宜太松,以避免在培养和搬动过程中掉落,使 果蝇逃逸,可以包一层纸增加其稳定性;5.2 杂交 1,基因伴性遗传观察的结果与分析5.3 杂交2,基因伴性遗传观察的结果与分析5.4杂交3,连锁与交换的观察的结果与分析

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