多重耐药菌鉴别及分析

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1、多重耐药菌:1.怎么确诊多重耐药菌?方法?2.你们多重耐药菌都报哪些?怎么报?3.对检出率较高的多重耐药菌是否做同源性分析及耐药基因检测?4.怎样总结多重耐药菌分析?多长时间公布一次?你们医院多重耐药菌联席会能定期召开吗?根据群里的讨论,总结如下:所谓多重耐药菌:是指对临床使用的三类或三类以上的抗菌药物同时呈现耐药的细菌。多重耐药MDR:对三类或三类以上抗菌药物每类中至少一种的获得性而非天然的不敏感中介或耐药泛耐药*DR:对除了1-2类抗菌药物之外的所有其他抗菌药物种类每类中至少有一种不敏感,也就是只对1-2类抗菌药物敏感。全耐药PDR):对所有抗菌药物种类中的所有药物不敏感。不同菌属的抗菌药

2、物类别及代表性药物,见以下5个表:表1定义MDR、*DR、PDR葡萄球菌属的17类抗菌药物类别及代表性药物氨基糖苷类庆大霉素安莎霉素类利福平抗MRSA的头孢菌素头孢洛林抗葡萄球菌的-酰胺类苯唑西林或头孢西丁*氟喹诺酮类环丙沙星左氧氟沙星叶酸代抑制剂复方磺胺甲噁唑夫酸夫酸糖肽类万古霉素替考拉宁特拉万星甘氨酰环素类替加环素林可酰胺类克林霉素脂肽类达托霉素大环酯类红霉素噁唑烷酮类利奈唑胺氯霉素类氯霉素膦酸类磷霉素链阳菌素类奎奴普丁/达福普汀四环素类四环素多西环素米诺环素表2 定义MDR、*DR、PDR肠球菌属的11类抗菌药物类别及代表性药物氨基糖苷类不包括链霉素庆大霉素高水平链霉素链霉素高水平碳青霉

3、烯类亚胺培南屎肠球菌*美罗培南多尼培南氟喹诺酮类环丙沙星左氧氟沙星莫西沙星糖肽类万古霉素替考拉宁甘氨酰环素类替加环素脂肽类达托霉素噁唑烷酮类利奈唑胺青霉素类氨苄西林链阳菌素类奎奴普丁/达福普汀粪肠球菌*四环素类米诺环素多西环素*屎肠球菌对碳青霉烯类固有耐药,粪肠球菌对链阳菌素类固有耐药,定义细菌耐药时要从上表分别剔除。表3 用于定义肠肝菌科MDR、*DR、PDR的抗菌药物类别及代表性药物氨基糖苷类庆大霉素雷氏、斯氏普罗威登斯菌妥布霉素雷氏、斯氏普罗威登斯菌阿米卡星奈替米星雷氏、斯氏普罗威登斯菌抗MRSA的头孢菌素头孢洛林只核准用于E.coli、肺克、产酸克雷伯菌抗假单胞类属青霉素+酶抑制剂替卡

4、西林/克拉维酸赫氏埃希菌哌拉西林/他唑巴坦赫氏埃希菌碳青霉烯类厄他培南亚胺培南美罗培南多尼培南非广谱头孢菌素类:第一、二代头孢菌素头孢唑啉弗氏柠檬酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、蜂房哈夫尼菌、摩氏摩根菌、氏变形杆菌、普通变形杆菌、雷氏和斯氏普罗威登斯菌、黏质沙雷菌头孢呋辛摩氏摩根菌、氏变形杆菌、普通变形杆菌、黏质沙雷菌广谱头孢菌素类:第三、四代头孢菌素头孢噻肟或头孢曲松头孢他啶头孢吡肟头霉素类头孢西丁弗氏柠檬酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、蜂房哈夫尼菌头孢替坦弗氏柠檬酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、蜂房哈夫尼菌氟喹诺酮类环丙沙星叶酸代抑制剂复方磺胺甲恶唑甘氨酰环素类替加环素单环-酰胺类氨曲南青

5、霉素类氨苄西林弗氏柠檬酸杆菌、克氏柠檬酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、赫氏埃希菌、蜂房哈夫尼菌、克雷伯菌属*种、摩氏摩根菌、氏变形杆菌、普通变形杆菌、雷氏和斯氏普罗威登斯菌、黏质沙雷菌青霉素类+酶抑制剂阿莫西林/克拉维酸弗氏柠檬酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、蜂房哈夫尼菌、摩氏摩根菌、雷氏和斯氏普罗威登斯菌、黏质沙雷菌氨苄西林/舒巴坦弗氏柠檬酸杆菌、克氏柠檬酸杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、蜂房哈夫尼菌、雷氏普罗维登斯菌、黏质沙雷菌氯霉素类氯霉素膦酸类磷霉素多粘菌素类粘菌素摩氏摩根菌、奇异变形杆菌、氏变形杆菌、普通变形杆菌、雷氏和斯氏普罗维登斯菌、黏质沙雷菌四环素类四环素摩氏摩根菌、奇异变形杆菌

6、、氏变形杆菌、普通变形杆菌、雷氏和斯氏普罗维登斯菌多西环素摩氏摩根菌、氏变形杆菌、普通变形杆菌、雷氏和斯氏普罗维登斯菌米诺环素摩氏摩根菌、氏变形杆菌、普通变形杆菌、雷氏和斯氏普罗维登斯菌假设*中的*种病原体对*个代表性抗菌药物或这个类别抗菌药物固有耐药,则这个或这类抗菌药物需从列表中去除,定义这种细菌耐药时不能计算到当中。表4 用于定义PA的MDR、*DR、PDR的8类抗菌药物类别及代表性药物氨基糖苷类庆大霉素妥布霉素阿米卡星奈替米星抗假单胞菌属碳青霉烯类亚胺培南美罗培南多尼培南抗假单胞菌属头孢菌素类头孢他啶头孢吡肟抗假单胞菌属氟喹诺酮类环丙沙星左氧氟沙星抗假单胞类属青霉素+酶抑制剂替卡西林/

7、克拉维酸哌拉西林/他唑巴坦单环-酰胺类氨曲南膦酸类磷霉素多粘菌素类粘菌素多粘菌素B表5用于定义MDR、*DR、PDR不动杆菌属的9类抗菌药物类别及代表性药物氨基糖苷类庆大霉素妥布霉素阿米卡星奈替米星抗假单胞菌属碳青霉烯类亚胺培南美罗培南多尼培南抗假单胞菌属氟喹诺酮类环丙沙星左氧氟沙星抗假单胞类属青霉素+酶抑制剂替卡西林/克拉维酸哌拉西林/他唑巴坦广谱头孢菌素类头孢噻肟头孢曲松头孢他啶头孢吡肟叶酸代抑制剂复方磺胺甲恶唑青霉素类+酶抑制剂氨苄西林/舒巴坦多粘菌素类粘菌素多粘菌素B四环素类四环素多西环素米诺环素1、MRSA:对苯唑西林和或头孢西丁耐药的金黄色葡萄球菌2、VRE:琼脂筛选法能检测全部的

8、VRE型,为临床常规筛选VRE的既简便有可靠的方法;纸片扩散法需验证万古霉素mic、自动化药敏检测法及分子生物学法3、CR-ABA、CR-PAE:根据美国临床标准化委员会CLSI规定,抗菌药物敏感试验可采用K-B纸片扩散法或MIC法。对于*DRAB或PDRAB菌株建议采用MIC法测定药物敏感性,给临床提供更有价值的用药参考。对于*DRAB或PDRAB感染,推荐根据临床需要进展联合药敏试验,如琼脂棋盘稀释法可准确判断两药是否有协同、相加或拮抗作用,但该方法较为繁琐;也可采用K-B法,将待测药敏纸片放置相邻、距离适宜的位置,次日观察两个纸片间抑菌圈是否有扩大;或用Etest法,把Etest条在适宜

9、的位置穿插叠放,可粗略观察药物间是否有协同作用。4、CRE:纸片扩散法及MIC法,不管用哪种方法,都要求进展产碳青霉烯酶的验证方法,一般有三种方法:改进HOdge实验、EDTA协同实验、Etest条实验IMI和IMI+EDTA协同实验因为目前常见多重耐药菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA、耐万古霉素肠球菌VRE、产超广谱-酰胺酶ESBLs细菌、耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌CRE如产型新德里金属-酰胺酶NDM-1或产碳青霉烯酶KPC的肠杆菌科细菌、耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌CR-AB、多重耐药/泛耐药铜绿假单胞菌MDR/PDR-PA)和多重耐药结核分枝杆菌等。目前国大多医院在国家卫

10、计委下发医院感染质量控制指标监测MRSA,VRE,CRE,CR-AB,CR-PA五种的根底上,结合自己医院的实际情况一般上报MRSA、CRE、VRE、CR-AB、CR-PA、ESBLs以及符合定义的其他阴性杆菌。报告的程序:发现多重耐药菌后,在报告单注:多重耐药,请隔离,再分别填写多重耐药报表院感科留档、多重耐药联系表微生物联系临床用,联系院感科及临床护理人员,做好登记转告相关医护人员,做好隔离措施,院感科根据耐药报表微生物提供去临床督查。处理流程方面,因各个医院的实际情况不同有所不同。*因ESBLs目前确实太多,给临床带来很多负担,不能一一都做到隔离,目前很多医院都只是纳入多耐菌的统计,而未

11、纳入隔离的要求。这方面或许不规,请专家指正!目前大多基层医院都没有投入设备做同源性分析及耐药基因检测。只有较少的大型医院、科研机构和CDC能做到。建议可以多方合作,甚至送第三方检测机构进展医院感染疑似爆发或医院感染爆发时的同源性分析。比方:检测多耐药的鲍曼的同源性及酰胺类和氨基糖甙类耐药基因,MRSA测多位点耐药基因。医院感染疑似爆发:指在医疗机构或其科室的患者中,短时间出现3例以上临床症候群相似、疑心有共同感染源的感染病例;或者3例以上疑心有共同感染源或感染途径的感染病例现象医院感染爆发:指在医疗机构或其科室的患者中,短时间发生3例以上同种同源感染病例的现象。细菌同源性研究分子生物学方法随机

12、引物多态性RAPDERIC-PCR脉冲场凝胶电泳PFGE多位点序列分析 MLST 多位点重复序列分析rep-PCR专家共识:PFGE是首选方法。RAPD重复性和实验室间可比性差。MLST分辨力不高。推荐:简单但适用的方法-随机引物多态性RAPDRAPD技术是以8-10bp的随机寡核苷酸片段作为引物,对基因组进展PCR扩增,扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳或PAGE电泳检测,研究DNA的多态性。优点:(1)不需要了解研究对象基因组的序列。(2)无需专门设计反响引物,随机设计长度为8-10个碱基的核苷酸序列就可应用。(3)操作简便,不涉及分子杂交、放射自显影等技术。(4)需要很少的DNA样本。(5) 能

13、够客观地提示供试材料之间DNA的差异。局限性:易受反响条件的影响,分辨力较低。假设有不对之处,请专家们指正!医院根据自己的实际定期召开一次多重耐药菌联席会,可由分管院长主持。医院感染管理科牵头,检验科、药学部、重点科室主任等参加,参会人员需到达全部委员的2/3,方为有效。会后可由医院感染管理科将议题及改进情况记录。分享一下满思金滕州中心人民医院的模式,假设有缺乏,请专家指正!1.感染管理科负责按时召集有关部门人员召开联席会议;制定会议议程;收集多重耐药菌医院感染有关资料;通报各科室多重耐药菌医院感染情况。2.药学部负责通报全院抗菌药物使用情况;根据多重耐药菌的耐药情况制定指导临床用药的实施意见。3.微生物实验室通报多重耐药菌的名称、耐药菌谱,多重耐药菌的科室分布,公布临床常见别离细菌菌株及其药敏情况等。4.与会人员共同讨论全院多重耐药菌医院感染趋势,制定预防与控制具体措施及合理使用抗菌药物的指导意见。补充下:可定期由院感科以此会议为容发布院感通告,以文件形式下发到各个科室,以备案以上总结源于临床微生物论坛15群的教师们积极讨论,感教师们的参与!希望此文的整理能给教师们带去些许帮助!参考资料:胡必杰教授主编多重耐药菌感染控制最正确实践微生物学MDR/*DR/PDR多重耐药菌国际标准定义权威版市院感质控中心

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