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1、2014年全国职业院校技能大赛“植物组织培养”赛项规程一、赛项名称赛项编号： G-058 赛项名称：植物组织培养 英语翻译： Plant tissue culture 赛项组别：高职组 赛项归属产业：农业 二、竞赛目的通过本项目竞赛，使高职学生能熟练进行优良品种和无病毒苗木的快速繁育和培育，培养学生的团队合作能力，不断提升学生的职业能力；引领农业职业院校适应园艺技术发展趋势，促进园艺类专业建设与教学改革；推进学院与相关企业深度合作，更好地实现工学结合的人才培养模式，为园艺行业培养高素质技术技能型人才。三、竞赛内容与时间1.竞赛内容本赛项要求选手在规定时间内完成MS母液的配制、MS培养基的配制和
2、马铃薯组培苗继代培养的无菌操作三项操作。每项比赛时间40分钟，每项之间休息10分钟。（1）MS母液配制（占总成绩的35%）根据提供试剂配制相应溶液。（2）MS培养基的配制（占总成绩的30%）根据提供的母液进行计算，并将结果填入表中。利用提供的母液和材料，以MS+ 0.01 mg/L NAA+ 3%蔗糖+ 0.7%琼脂，pH为5.8，配制培养基500ml，并均匀分装到12个培养瓶，不进行灭菌。（3）马铃薯组培苗继代培养的无菌操作（占总成绩的35%）选手进场后准备10分钟，而后在30分钟内，按无菌操作规范要求完成马铃薯试管苗的继代培养，要求每瓶转接至少15株苗（含15株），茎段长1-2cm，带1-
3、2叶片，扦插到培养基中，均匀分布，无交叉污染等动作。2.竞赛时间比赛分A、B两组，上下午各一组。表1 竞赛时间安排表A组B组8:00抽签决定工号12:30抽签决定工号8:15进入赛场12:45进入赛场8:309:10MS母液配制13:0013:40MS母液配制9:2010:00MS培养基配制13:5014:30MS培养基配制10:1010:50无菌操作14:4015:20无菌操作四、竞赛方式本赛项为团体赛。每组参赛学生2名，须为同校在籍学生。由各省、自治区、直辖市教育行政部门商农业行政部门，在本区域内设置园艺类相关专业的涉农高职院校全日制在籍学生中（参赛选手年龄须不超过25周岁，即2014年7
4、月1日前不满26周岁），经选拔组成1个代表队参加比赛，每队限报1名指导教师，指导教师须为本校专兼职教师。本赛项本次竞赛不邀请境外代表队参赛。凡在往届全国职业院校技能大赛中获一等奖的选手，不再参加同一项目同一组别的赛项。在本赛项竞赛的前一天下午，以省为单位进行抽签，确定技能竞赛的场次；在竞赛前半小时，选手进行抽签，确定技能竞赛的工位号。五、竞赛试题本赛项为公开赛题。在规定时间内完成规定的MS母液配制、MS固体培养基的配制及马铃薯组培苗继代培养。1.MS母液配制根据表2配方进行计算（扩大倍数和母液体积按照大赛要求填写），将结果填入表中，并配制相应溶液。表2母液配制配方母液配制母液成分规定量(mg/
5、L)扩大倍数称取量(mg)母液体积(ml)配制1L培养基吸取量（ml）钙盐CaCl2.2H2O440微量元素KI0.83激素NAA0.01mg/ml2.MS培养基的配制根据表3进行计算，并将结果填入表中。请利用提供的母液和材料，以MS+ 0.01 mg/L NAA+ 3%蔗糖+ 0.7%琼脂，pH为5.8，配制培养基500ml，并均匀分装到12个培养瓶，不进行灭菌。（表3中浓度由参赛者按照大赛提供的母液标签填写）表3 MS培养基配制母液浓度/扩大倍数配制体积（ml）母液吸取量（ml）称取量（g）大量元素钙盐母液磷酸盐溶液铁盐微量元素有机物萘乙酸（NAA）蔗糖 琼脂粉写出灭菌操作步骤：3.马铃薯
6、组培苗继代培养的无菌操作在30分钟内，按无菌操作规范要求完成试管苗的继代培养，每瓶至少转接15株苗（含15株），茎段长1-2cm，带1-2叶片，扦插到培养基中，均匀分布，无交叉污染等动作。六、竞赛规则1.参赛选手出场顺序、位置、比赛所用材料、工具由抽签决定，不得擅自变更、调整。2.参赛选手提前15分钟检录进入赛场，并按照指定位号参加比赛。迟到15分钟者，取消比赛资格。3.植物组织培养项目选手应在比赛试卷或实物标签上填写比赛号。试卷（或实物标签）上不得有任何暗示选手身份的标记，否则取消成绩。4.选手在比赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意。选手若需休息、饮水或去洗手间等，耗用时间
7、计算在比赛时间内。5.比赛在规定时间结束时，参赛选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延比赛时间。选手操作完成后，在实际操作现场记录表上签名确认，方可离开赛场。七、竞赛环境比赛在承办单位的植物组织培养实验室进行。本赛项赛场面积300 m2，工位数40个；赛场内安装监控设备；赛场走廊安装玻璃墙，透明、通亮，适合观摩。八、技术规范以教育部颁布的职业学校相关专业教学指导方案和国家职业标准花卉园艺师（三级）规定的技能要求为基础，操作过程可参照农业部行业标准花卉种苗组培快繁技术规程NY/T2306-2013执行。九、技术平台通过调研全国院校及组培生产工厂，竞赛选用通用的仪器设备，与学生就业接轨；选用经济、
8、实用的设备型号，公开招标。技能竞赛设备（每两人为一单元）：1.MS母液配制：氯化钙（CaCl2.2H2O），碘化钾（KI）、萘乙酸(NAA)、电子分析天平（品牌：上海越平；型号：FA1004；感量：0.0001g）1台、电炉1个、电子天平（品牌：奥豪斯；型号：SE602F；感量：0.01g）1台、烧杯（200ml）3个、容量瓶（500ml）1个、容量瓶（250ml）1个、容量瓶（200ml）1个、容量瓶（100ml）1个、玻璃棒3个、胶头滴管2个、洗瓶2个、5L广口瓶（装有蒸馏水）、95%酒精1瓶、0.1mol/L HCl 1瓶、抹布1块、称量纸2包、卷纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1
9、支、计算器1个。2.MS培养基的配制：电磁炉1个、MS母液6瓶、琼脂粉1瓶、蔗糖1瓶、搪瓷杯（1000ml）1个、培养瓶12个、烧杯（200ml）1个、2L广口瓶（装有蒸馏水）、洗瓶1个、量筒（500ml）1个、量筒（50ml）1个、移液管（10ml）1个、移液管（5ml）5个、0.1mol/L HCl 1瓶、0.1mol/L NaOH 1瓶、pH试纸（5.07.0）1包、吸耳球1个、镊子1个、玻璃棒1个、抹布1块、称量纸1包、卷纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1支、计算器1个。3.马铃薯组培苗继代繁殖的无菌操作：试管苗15瓶、培养基50瓶、双人单面工作台1台（品牌：上海咏星；型号：SW
10、-CJ-2A）、剪刀6把、镊子6把、酒精灯2个、无菌纸2包、酒精棉2瓶、一次性口罩3个、记号笔2个、火柴2盒。十、评分标准比赛评分由该项目裁判员统一评分，评分细则见表4。表4 评分细则序号考核内容考核要点分值1MS母液配制（35分）计算准确计算各种试剂所用量.10试剂称量采用直接称量法称样，称量方法正确，操作规范、熟练10溶液配制玻璃棒搅拌正确，试剂完全溶解，熟练定容准确，贴好标签10分工协作分工合理，相互协作，完成速度快52MS培养基配制（30分）计算准确计算各种试剂所用量9配制琼脂粉完全溶解，定容准确，pH值测定、调节正确，熟练操作11分装均匀分装，熟练操作，培养瓶表明洁净，贴好标签、标签
11、内容准确5分工协作分工合理，相互协作，桌面整洁，完成速度快53无菌操作（35分）无菌操作无菌操作准备完全，熟练进行无菌操作，灭菌方式正确，接种速度较快，操作结束清理完全，标签书写准确16分工协作分工合理，相互协作，完成速度快。满30瓶，得8分，少一瓶扣0.5分，扣完为止，多一瓶加0.5分，最高加8分16文明操作与安全操作文明、安全，工作台场地清洁干净，用具摆放整齐3十一、评分方法技能比赛裁判数量79人，各裁判独立评分，评分汇总后，去掉最高分和最低分，取平均分作为比赛选手最终得分。整个项目由裁判长负责，保证比赛的公平、公正，赛项最终得分按100分制计分。十二、奖项设定本赛项为团体赛。竞赛奖项设定
12、为：一等奖占比10%，二等奖占比20%，三等奖占比30%。获得一等奖的指导教师由组委会颁发优秀指导教师证书。十三、赛项安全1.所有涉赛场所一律凭大赛执委会统一配发证件进入。2.进入所有涉赛场所人员一律不得携带包、食品、饮料等非执委会允许带入的物品。3.所有涉赛场所严禁吸烟。4.人员进入赛场后要严格阅读现场的应急安全疏散图，当发生紧急情况，听到疏散指令（警报声响）时，要迅速按疏散图撤离赛场。十四、申诉与仲裁本赛项在比赛过程中若出现有失公正或有关人员违规等现象，代表队领队可在比赛结束后2小时之内向仲裁组提出申诉。大赛采取两级仲裁机制。赛项设仲裁工作组，赛区设仲裁委员会。大赛执委会办公室选派人员参加
13、赛区仲裁委员会工作。赛项仲裁工作组在接到申诉后的2小时内组织复议，并及时反馈复议结果。申诉方对复议结果仍有异议，可由省（市）领队向赛区仲裁委员会提出申诉。赛区仲裁委员会的仲裁结果为最终结果。十五、竞赛观摩本项目允许观摩。1.本赛项公开观摩的对象本赛项公开观摩的对象为：全国各高等职业院校园艺类专业的专业负责人、骨干教师、各种业企业负责人、各农业行业或协会组织负责人、各出版社负责人等。2.本赛项公开观摩的方法为了不影响选手进行本项目的比赛，采取分批、分时的方法，分期到赛场指定观摩地点，通过玻璃墙来进行观摩。3.观摩时应遵守的纪律观摩时应服从组委会的统一安排，分批进入指定的赛场观摩地点；在观摩时，不
14、得大声喧哗；不得擅自进入赛场；不得对选手进行暗示；不得抽烟等。十六、竞赛视频通过摄录像，记录竞赛全过程，制作优秀选手采访、优秀指导教师采访、裁判专家点评和企业人士采访视频资料，突出赛项的技能重点与优势特色。为宣传、仲裁、资源转化提供全面的信息资料。十七、竞赛须知（一）参赛队须知1.发扬良好的道德风尚，听从指挥，服从裁判，不弄虚作假。2.坚决执行竞赛的各项规定，对比赛期间的意见和建议及时向执委会提出。3.比赛期间未经允许任何人不得进入比赛场地。（二）指导教师须知1.熟悉竞赛规程，妥善管理本队人员的日常生活及安全，遵守并贯彻执行大赛组委会的各项规定，做好赛前准备工作。2.严格遵守赛场的规章制度，佩
15、戴有效证件进入赛场指定区域，竞赛期间不得私自接触评委。3.指导教师应严格遵守大赛的统一安排，不得在非规定时间以任何方式与参赛选手进行沟通和交流，如有违反，比赛项目的成绩记为零分。 4.对不符合比赛规定的评判以及对工作人员的违规行为提前申述，必须在2小时内向仲裁组提交书面报告，否则不予受理。（三）参赛选手须知1.严格遵守技能大赛的规则、技能大赛纪律和安全操作规程，尊重评审和赛场工作人员，自觉维护赛场秩序。2.佩带参赛证件进入比赛场地，并接受评审员的检查。3.进入赛场前须将手机等通讯工具交赛场相关人员妥善保管。4.比赛过程中不准互相交谈，不准偷看暗示，不准擅自离开现场。5.比赛结束时间到达，应立即停止答题和操作，不得拖延比
