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1、NA电泳有关试剂及缓冲液的配制2M Tris-HAc100mM EDTApH8.5配 制 量：配制措施：1L1. 称取Tris碱242.3g，置于烧杯中2. 再称取EDTA固体29.3g或Na2EDTA2H2O固体37.2g3. 加入约700ml ddH2O，溶解完全4. 加入57ml的HAc，充足搅拌5. 用HAc调pH至8.56. 定容至1L，室温保存50TAE缓冲液pH8.5配方：890mM Tris-H3BO320mM EDTApH8.3配 制 量：配制措施：1L1. 称取Tris碱53.88g，EDTA固体2.93g或Na2EDTA2H2O固体3.72g，H3BO3 27.5g置于烧
2、杯中2. 加入约700ml的ddH2O，溶解完全3. 调pH至8.34. 定容至1L，室温保存5TBE 缓冲液pH8.3配方：10mg/ml EB配 制 量：配制措施：100ml1. 称取1g EB固体于专用容器中2. 加入100ml的ddH2O，搅拌数小时至溶解完全3. 转移至棕色瓶中，4避光保存注意：EB为强致癌物质，专用容器小心操作EB溴化乙锭配方：30mM EDTA36%(V/V)丙三醇0.05(W/V)溴酚蓝pH7.0配 制 量：配制措施：100ml1. 用移液器吸取6ml EDTA (500mM，pH8.0)加入约50ml ddH2O中2. 再吸取5ml 1%的溴酚蓝3. 量取36
3、ml丙三醇4. 用2N NaoH调pH至7.05. 定容至100ml，4保存6上样缓冲液Loading Buffer配方：10mM EDTA50%(V/V) 丙三醇0.25%(W/V) 溴酚蓝配 制 量：配制措施：100ml1. 用移液器吸取2ml EDTA (500mM，pH8.0)加入约40ml ddH2O中2. 再称取250mg的溴酚蓝3. 量取50ml丙三醇4. 定容至100ml，4保存10上样缓冲液Loading Buffer配方：1%(W/V)溴酚蓝配 制 量：配制措施：100ml1. 称取1g溴酚蓝置于烧杯中2. 加入约80ml的ddH2O，溶解完全3. 定容至100ml4. 转
4、移至棕色容器中5. 避光，4保存1%(W/V)溴酚蓝配方：10%(W/V) AP配 制 量：配制措施：50ml1. 称取5g过硫酸铵置于烧杯中2. 加入ddH2O定容至50ml3. 分装于1.5ml离心管中4. -20保存10%(W/V)过硫酸铵配方：29.0%(W/V) Acr1.0%(W/V) Bis配 制 量：配制措施：1L1. 称取丙烯酰胺固体290g置于专用的烧杯中2. 再称取10g甲叉双丙烯酰胺3. 加入约500ml ddH2O，充足搅拌，溶解完全后定容至1L4. 用0.45um滤纸过滤除杂5. 转移棕色瓶中，4避光保存注意：丙烯酰胺有毒，需小心操作，专用容器配制30%(W/V)丙
5、烯酰胺储液(DNA用)配方：. 0. EDA(pH=8）:在800ml蒸馏水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸钠(ED-a22H2O），充足搅拌,这时溶液为乳白色，加NOH调解H值至8.0，这时溶液颜色逐渐变为澄清。最后定容至L。高压灭菌。2. 5TBE:Trs碱54g;硼酸27.;.5M EDTA(H80),加蒸馏水定容至1L。高压灭菌。（但是我在实验中没有灭菌，实验成果影响不大)。1 TBE： XBE缓冲液与蒸馏水按 ： 4稀释就OK。配备措施措施1:1%的溴酚蓝将托盘天平上称取1溴酚蓝定溶于ml无水乙醇中,转移入滴瓶中,贴标签备用。措施2：05%的溴酚蓝配western bot用的2*S
6、DS上样缓冲液需要用到.%的溴酚蓝,2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。事实上，溴酚蓝在水中的溶解度不高,直接将0.1g溴酚蓝溶于10ml水是有困难的。下面是其较合适的配制措施:0.05%的溴酚蓝配制措施:取溴酚蓝.g，加0.mol/L氢氧化钠溶液3.l使溶解，再加水稀释至200l,即得。变色范畴p2.6(黄蓝绿）。只是不懂得加入NaOH会不会影响2-实验。估计影响不大,由于批示剂用量毕竟很少。措施3：%溴酚蓝加1水溶性钠型溴酚蓝于00m水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。有关词条甲醇、乙醇、苯、有机化学、氢氧化钠stern上样缓冲液配制整顿 6DS样品缓冲液4T
7、rCl/SDS,PH6.(0.2molL)7ml甘油30%（/V)30ml（3g）甘油密度为1.13g/m (0/4）SDS1%(m/V)1g溴酚蓝02(m/V)2mgDTT(05ol/L)0.3如果需要，加去离子蒸馏水至10ml;等量分装成0.5ml并于-70贮存 8Tis/SDS,PH6.8Tris-ase(ol/）6.0g0ml水中溶解后以mol/盐酸调至PH6.，补加至10m。Cl调至6.80.45um滤膜过滤，再加0.4gSDSSD04%(m/V)0.4g可保存1月丽春红S染色液丽春红S 0.2%SDS Langufr210l410mlTris-HClPH.80125 M1.25ml(1molL）0.5 2ml（1mol/L)DS40.4g或者(10%SD4l)8%0.8g2E25%10%DT3015 M15ml（1m/）0 M3ml(1mlL）Gyceol202ml30%lBromphenble.01%0.001g.0%0.0dH2O.25ml.ml 1. Prepre usng Tae, dustd wth l2 I2M i usd,omtDT.3 If DT is use, omit 2-ME
