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1、超氧化物歧化酶(SOD)提取液简介：超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是含金属辅基的酶，能催化超氧化物 阴离子发生岐化作用，生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶。 由于超氧自由基是不稳定的的自由基，寿命极短，SOD活性一般用间接方法测定，并利用 各种呈色反应来测定SOD活力，其中显色剂有NBT(四氮唑蓝)、WST-1、WST-8等。Leagene超氧化物歧化酶(SOD)提取液主要用于裂解组织样本、细胞样本，提取样品 中的过氧化物酶。该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。组成：编号 名称一-CS0395Storage超
2、氧化物歧化酶(SOD)提取液500mlRT使用说明书1份自备料：1、蒸馏水2、离心管或试管3、匀浆器或研钵4、低温离心机操作步骤(仅供参考):1、植物组织样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取， 按植物组织：超氧化物歧化酶(SOD)提取液二的比例，加入预冷的超氧化物歧化酶(SOD)提 取液，冰浴情况下充分捣碎或研磨，用超氧化物歧化酶(SOD)提取液冲洗研钵或匀浆器，合 并冲洗液至该离心管，补加超氧化物歧化酶:SOD)提取液至10ml，离心 10min，取上清液 (SOD粗提液)用于酶活性的测定。2、动物组织样品：动物用含有 20U/ml Hepar in的生理盐水(
3、0.9% NaCI con tai ning 20U/ml Heparin)灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg组织加入500pI SOD检 测缓冲液的比例，用玻璃匀浆器在4弋或冰浴匀浆，离心10min，取上清液(SOD粗提液) 用于酶活性的测定。3、血浆或含红细胞的样品：从待测样品中分理出的血清或血浆不应有溶血，如果含有应去 除红细胞后检测，如超过检测范围，用超氧化物歧化酶(SOD)提取液稀释后检测。血清去除 红细胞的简易方法如下：用抗凝管收集血液，颠倒混匀，取至少500pI全血，4弋3000g离心5min,转移上清至另一新的1ml离心管中，适量生理盐水稀释后待测。亦可采用红 细胞裂
4、解液去除红细胞，如Leagene ACK红细胞裂解液等。4细胞样品：对于贴壁细胞，由于后续用于酶活性的测定，避免使用胰酶消化细胞。可以 使用细胞刮或EDTA处理细胞并收集细胞，细胞用无菌的PBS或生理盐水洗涤1次，按照 每106细胞加入超氧化物歧化酶(SOD)提取液的比例，用玻璃匀浆器在4C或冰浴匀浆，离 心10min，取上清液(SOD粗提液)用于酶活性的测定。5、上述样品准备完毕后可以BCA蛋白定量检测试剂盒测定蛋白浓度，通常10-20pg蛋白 的细胞或组织匀浆液样品其中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差 异会比较大，该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20-100
5、pg蛋白量通常已经足 够用于后续检测。根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量，用超氧化物歧化酶(SOD)提取液适当 稀释样品。例如小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为10%)上清，通常需要 稀释10-100倍，准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定， 可以-20C冻存，但建议尽量当天完成测定。计算：组织或植物粗酶液获得率(%)=上清液体积(ml)/组织或植物质量x100%注意事项：1、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂，同时需避免反复冻融。2、所测样本的值高于标准曲线的上限，用超氧化物歧化酶(SOD)提取液稀释样品后重新测定。3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期：12个月有效。相关产品：产品编号名称CS0001ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)DC0032Masson三色染色液DF0135多聚甲醛溶液(4% PFA)NR0001DEPC 处理水(0.1%)PS0013RIPA裂解液(强)TC1167尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)
