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Northern blot一:前期准备工作:1:使用专门提取miRNA天根试剂盒提取的RNA,来做northern blot :2:检查所需的实验药品是否齐全 3:所用的试管以及培养皿均需灭菌4:DEPC水要配好,1L纯水加500ulDEPC,过夜摇匀,摇匀后灭菌后使用。5:使用DEPC水,用来配电解液1TBE及10*TBE,润洗玻璃器皿,转膜槽,电泳槽二:主要试剂:提取miRNA试剂盒 天根提 small miRNA试剂盒 型号是:N2602 ,罗氏:( Anti-Digoxigenin-AP, Fab fragments,DIG Wash and Block Buffer Set,DIG Easy Hyb Granules)Roche,RPN 303B,GE操作方法步骤:1:上样量在34ug small miRNA与Ambion life的2*loading混合在一起,在实验的整个过程中使用的水,都是灭菌后的DEPC水。2:变性在沸水中煮沸2min,立即放冰上2min。 3:用14聚丙烯酰胺胶液跑电泳4:电泳在冰浴中进行,用1*TBE作为电泳缓冲液,5:跑的时间大约在34小时左右,loading 蓝色跑到底