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1、第30课 动物细胞工程考试说明具体内容标准等级生物课程标准学习要求动物的细胞培养与体细胞克隆A简述动物细胞培养的过程、条件及其应用简述克隆动物的概念和原理简述体细胞核移植技术和体细胞克隆及其应用前景关注体细胞克隆技术的安全性和伦理性问题细胞融合与单克隆抗体 A简说出述动物细胞融合的方法和过程说出 单克隆抗体的制备过程及其应用认同细胞学基础理论研究与技术开发之间的关系关注细胞工程研究的发展和应用前景一、教学内容及考纲要求二、重要的结论性语句：1、动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础。2、原代培养阶段，培养的细胞最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适合用于药物测试、基因表达等实验研究。3、一般
2、情况下，传代培养1050次后，细胞增殖会明显减缓，甚至完全停止。少部分细胞的细胞核型发生变化，获得不死性。4、动物细胞培养需要严格的环境条件，包括无菌无毒、温度、pH、气体和营养物质（如葡萄糖、无机盐、氨基酸、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素和生长因子等。在使用合成培养基时还需加入动物血清等天然成分）。5、动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新胚胎，并最终发育为动物个体。6、细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。7、动物细胞融合技术的最重要的用途之一是制备单克隆抗体。8、单克隆抗体制备中，第一次筛选：用选择性培养基
3、筛选出杂交瘤细胞；第二次筛选：通过抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。9、杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生专一性抗体。10、单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强、灵敏度高，并能大量制备。三、重、难点知识归类、整理1、植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养培养原理细胞全能性细胞增殖培养基物理性质固体液体化学成分营养物质、激素营养物质、动物血清培养材料常用植物幼嫩部位或花药常用动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织培养结果培育成植株培育成细胞株或细胞系培养目的快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞产品等联系均为无菌操作,需要适宜的温度,pH值,O2等
4、条件2、植物体细胞杂交和动物细胞融合项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合方法酶解法去细胞壁后诱导原生质体融合胰蛋白酶处理使细胞分散后诱导细胞融合诱导手段离心、振动、电刺激、聚乙二醇诱导（同上）再加上灭活的病毒诱导用途获得杂种植株主要：制备单克隆抗体3、受精作用、原生质体融合、动物细胞融合受精作用原生质体融合动物细跑融合不同细胞类型精子与卵细胞体细胞体细胞细胞来源来自同一生物个体一般来自不同种的生物个体一般来自不同种的生物个体染色体数目变化2N2N1+2N22N1+2N2融合条件不需人工诱导需人工诱导需人工诱导同都有两个细胞融合成一个细胞，并且融合成这个
5、细胞的遗传物质都是由原来的两个细胞决定的4、试管动物与克隆动物试管动物（婴儿）:。通过体外受精和胚胎移植技术而产生的动物或婴儿，其实质是通过有性生殖而形成的后代。在这一技术过程中，精子和卵子从动物（人）体内取出来，在人工提供的生活条件下（通常是在试管中）进行受精，并让体外受精的受精卵在试管中发育，再把发育到一定阶段的胚胎移植到“代理母亲”动物（人）的子宫内继续发育直到诞生。 克隆动物：一般是指通过无性繁殖形成动物后代。将供体体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合，借助卵细胞的发育能力，经过培养发育成胚胎进而形成个体。克隆是指无性繁殖系，具体地说，是指从一个共同的祖先，通过无性繁殖的
6、方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。克隆也可指无性繁殖的过程。5、动物细胞工程与基因工程、胚胎工程的联系 动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞，因此基因工程离不开动物细胞的培养。克隆动物则是通过体细胞核移植形成的重组细胞发育成的胚胎也要经过胚胎移植等胚胎工程技术完成。四、例题解析：例1：下列关于细胞工程的叙述，错误的是A 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D 某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同例2：下列各图表
7、示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请根据图回答下列问题：请用箭头把代表各图解的字母按单克隆制备过程的顺序连接起来。在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有 、 的特性。由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了 和 的动物细胞工程技术手段。课堂练习一 、单选题：1为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液，选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.盐酸 D.胰脂肪酶2在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术3科学家用小鼠骨髓瘤细胞
8、与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞4动物细胞融合的目的中最重要的是A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞5能使动物细胞融合的特有的诱导因子是A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动6一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能 （ ）A有选择地繁殖某一性别的家畜 B繁殖家畜中的优秀个体C用于保存物种
9、D改变动物的基因型7单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是（ ）B淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞A B C D8植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是 A纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理酶的专一性 B植物组织培养和动物细胞培养细胞的全能性 C原生质体融合和动物细胞融合生物膜的流动性 D紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养细胞分裂9在下列自然现象或科学研究成果中，能为“动物细胞具有全能性”观点提供直接证据的是A壁虎断尾后重新长出尾部 B蜜蜂的
10、未受精卵细胞发育成雄蜂C用体外培养的皮肤治疗烧伤病人 D小鼠腺细胞的自我复制10利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者11下列哪一项属于克隆A将鸡的某个DNA分子片段整合到小鼠的DNA分子上B将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤
11、细胞D将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系二、多选题：12下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是（ ）AB淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体C体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖D单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显13（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是（ ）A.效应B细胞 BT淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D杂交瘤细胞三、非选题：14右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：（1）若A、B是植物细胞，在
12、细胞融合之前已用_ 处理，除去了；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是。融合完成的标志是。（2）若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用 技术把D培养成植株。（3）若A、B是动物细胞，一般取自 ，然后用 使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是 ，所形成的D称为 ，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有 。（4）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了 。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了_，图中B为 。（5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有 种（只考虑两两融合），用来培养的D
13、细胞应该是 。从中选择出它的方法是 培养，获得D后，常用的培养方法是培养液中培养和 。15.两场筹备了10年的“太空结合”首次在神舟八号飞船上举行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,新人在“产房”电融合仪内孕育新生命。160min后,中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。“太空娃娃”诞生和地面实验如图所示。请回答下列问题：(1)小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能融合在一起,体现了细胞膜具有_的特点。(2)若用于SARS的预防上,则宜采用_细胞。科学工作者正在研究治疗癌症使用的生物导弹是_。(3)B淋巴细胞和T淋巴细胞都是由_细胞形成的。这种相同细胞的后代,在形态、结构和生理功能上产生稳定差异的过程,叫做 _。(4)鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过_（有丝/减数）分裂方式大量繁殖。细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何特点？_；要观察融合后的细胞中的染色体形态、数目,可用一定浓度的
