酱腌菜中亚硝酸盐含量的测定

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1、:腌菜中亚硝酸盐含量的测定由于肉制品生产企业在生产过程中乱加、误加亚硝酸盐而引起食物中毒,所以 强制检验肉制品生产企业加入硝酸盐与亚硝酸盐的含量起到非常重要的作用。肉 类罐头与肉制品最大使用量不得超过0.05克/公斤。除了肉类食品含有硝酸盐及 亚硝酸盐,果蔬制品、酱腌菜中也含有亚硝酸盐。:1.分光光度法在稀盐酸介质中,NO-与碱性品红发生重氮反应,用8羟基哇琳作偶联剂, 2在弱碱性条件下,生成茶红色偶氮染料来定量测定no2-含量。,最常用的方法是盐酸萘乙二胺法,也就是用分光光度计测定样品吸光度,分 光光度法以其设备简单、操作快捷、灵敏度高、结果直观的优点,深受欢迎。本 实验研究了以。-萘胺为显

2、色剂,利用紫外可见分光光度计测定肉制品中的亚 硝酸盐的含量的方法。结果证明,此方法简单、快捷、准确,是一种食品检测的 好方法。【实验原理】自样品中抽提分离出亚硝酸盐,亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸发生 重氮化反应生成重氮盐,此重氮盐再与a-萘胺试剂发生偶合反应,生成紫红色 偶氮化合物。其颜色的深度与样液中亚硝酸含量成正比,可比色测定。反应式如下:SO3Hh2oNO2+ H+H2NNSO3H +SO3HNH2x 1000401(mg/kg)m x x 肉制品中亚硝酸盐含量二二500 50式中:X为由测得的吸光度在标准曲线上对应的亚硝酸钠质量浓度(ug/mL);m为样品质量(g)。【实验部分】

3、 一、主要试剂及仪器(1)(2)(3)亚铁氤化钾溶液:称取10.619克亚铁氤化钾K4Fe(CN)6 - 3H2O溶于水, 并稀释至100mL。乙酸锌溶液:称取22.0克乙酸锌Zn(CH3COO)2 - 2H2O,加3mL冰醋酸 溶于水,并稀释至100mL。饱和硼砂溶液:5.0克硼酸钠(Na2BO410H2O)溶于100mL热水中,冷却备用。(4)对氨基苯磺酸溶液(0.4g/L):称取2.4g对氨基苯磺酸溶于50mL20%盐酸 中,避光保存。(5) 0.2%a-萘胺溶液(2g/L):称取1.000g盐酸萘乙二胺,以水定容50mL, 避光保存。(6) 亚硝酸钠标准溶液(200Ug/mL):精确称

4、取0.1003克于硅胶干燥器中干 燥24h的亚硝酸钠(优级纯),加水定容到500mL。(7) 亚硝酸钠标溶液(5 U g/mL):临用前,吸取此溶液2.5ml于100ml容量瓶 中,用水定容到100ml(8) 仪器:研钵UV8500紫外-可见分光光度计分析天平1 mL、2mL、 5mL、20mL移液管各1支 50mL烧杯1个,100ml烧杯1个 10ml量筒1个, 100ml量筒1个 500mL烧杯1个,500ml容量瓶4个 50mL容量瓶10个,100ml 容量瓶4个 滤纸、过滤装置一套 比色皿2个。二、实验操作 (1)样品处理样品中硝酸盐及亚硝酸盐的提取:称取经剁碎混合均匀的样品5克于10

5、0mL 烧杯中,加入硼砂饱和溶液12.5mL,以玻璃棒搅拌,然后用70C左右的水约 300mL,将其稀释转移到500mL容量瓶,沸水浴中加热15分钟,取出,转动,加 入5mL亚铁氤化钾溶液,摇匀,再加5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。冷却到室 温,用水定容,摇匀。放置片刻,去除上层脂肪,清液用滤纸过滤,前30ml滤 液弃之不用。(2)亚硝酸钠标准曲线的绘制用移液管精确吸取亚硝酸钠标准液(5ug/mL) 0.0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5mL(各含 0, 1, 2, 3, 4, 5, 7.5, 10, 12.5 u g 亚硝酸钠)于一组 50 m

6、L容量瓶中,各加水至约25mL,分别加2mL0.4g/ml对氨基苯磺酸溶液, 摇匀,静置35min后,各加入1mL 0.2% a -萘胺溶液,并用水定容到50mL, 摇匀。(浓度分别为 0.00,0.02,0.04,0.06,0.08,0.10,0.15,0.20, ug/ml)静置15min后,用20mm比色皿,用分光光度计在最大波长550nm下测定 吸光度,以蒸馏水为空白。以测得的各比色液的吸光度对应的亚硝酸浓度作曲 线。亚硝酸盐的测定取40mL待测液于50mL容量瓶中,加1mL0.4%对氨基苯磺酸溶液,摇匀。 静置35分钟后,加入1mL 02%a-萘胺溶液,定容,摇匀。比色测定,记录吸 光度。根据标准曲线方程算得相应的亚硝酸钠浓度(Ug/mL),计算试样中亚硝 酸盐(以亚硝酸钠计)的含量。

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