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1、1.3.5.3 抗氧化活性分析（1） DPPH 清除力1,1-二苯基-2-苦基肼（l,l-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH）是一种稳定自 由基，在可见光区有特征吸收，利用其在可见光区吸光值的变化可以有效评价物 质的抗氧化活性。本实验分别取 0.005 mL、0.01 mL、0.02 mL、0.03 mL、0.04 mL 的样品，加入蒸馏水稀释到0.2 mL，加入3 mL 0.06 mM的DPPH （溶于无水乙 醇中），手动混匀，室温下避光反应0.5 h，然后在517 nm处测定其吸光值，设 定无水乙醇为空白对照组，0.5 g/L BHA为阳性对照。DPPH清除率计
2、算如下：DPPH 清除率（%）=（1-A /A ）X100%样品 空白式中： A 样品吸光值， A 为对照组吸光值样品空白（ 2 ）还原力物质还原能力即以该物质将Fe3+还原为Fe2+的能力为衡量指标，该能力与抗 氧化活性有关。分别取 0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.3mL、0.4 mL、0.5 mL 的样 品，用蒸馏水稀释至0.5 mL,加入2.5 mL磷酸盐缓冲溶液（0.2 M, pH 6.6）和 2.5 mL 1% （w/v）铁氰化钾溶液，将混合物在50oC反应20 min,再加入10%三 氯乙酸（w/v）， 4000 r/min，离心10 min，取上清2.5 mL加入
3、2.5 mL蒸馏水和 0.5 mL 0.1%铁氰化钾反应10 min，在700 nm处测定其吸光值，蒸馏水为空白对 照，0.5 g/L BHA为阳性对照。（ 3）螯合力过渡金属离子Fe2+可以催化活性氧自由基的形成及促进脂质的过氧化作用， 从而对细胞和组织造成损伤，如果将这些金属离子耦合即可消除其催化作用，提 高抗氧化活性。分别取0.03 mL、0.05 mL、0.07 mL、0.09 mL、0.1 mL样品用蒸 馏水稀释至2.5 mL，然后加入0.05 mL 2 mM FeSO4， 0.1 mL 5mM菲啰嗪溶液， 反应10 min，在562 nm处测定吸光值，蒸馏水作为对照组，0.28 g/mL的柠檬酸 作为阳性对照。Fe2+螯合力计算公式如下：Fe2+螯合力（%）=（1-A /A ）X100%样品 空白式中： A 样品吸光值， A 为对照组吸光值样品空白
