中性粒细胞跨内皮细胞迁移机制摘要：中性粒细胞的募集是感染以及炎症性疾病的免疫反应过程中一个不 可缺少的组成部分中性粒细胞外渗过程包含一个通过紧密协调血管 壁内皮细胞间的粘附作用的顺序所安排的复杂的多步级联反应中性 粒细胞和内皮细胞包含的粘附受体和信号分子可调节进入炎症或感 染部位的嗜中性粒细胞的募集本综述将集中讲述嗜中性粒细胞募集 的最后一步,也就是通过内皮细胞的中性粒细胞的迁移在血液和固有免疫的第一条防线中，短命的中性粒细胞是最丰富的白 细胞中性粒细胞可以通过特异性受体检测到细菌组成成分如脂多糖（LPS ）和fMLP ；这些特异性受体包括Toll-样受体和G-蛋白偶联受体 ⑴这个过程导致中性粒细胞迁移活动的上调，使中性粒细胞在几 小时之内积聚到急性炎症部位除了对细菌和真菌病原体起到防御作 用之外，中性粒细胞也是一种辅助性T型1细胞（Thl细胞）相关（2） 炎症浸润的标志中性粒细胞的释放可能导致组织损伤的部位募集细 胞毒性介质，从而促进自身免疫和慢性炎症中性粒细胞浸润是类风 湿关节炎，血管炎，炎性肠道疾病和慢性肺疾病的一种特征性标志（3; 4）因此，中性粒细胞外渗到炎症，血管损伤或感染部位需要有一个 严密的调节过程。
中性粒细胞的募集需要一个粘附和迁移的多级级联 反应，这个过程需要三种粘附受体，即选择素，整合素和免疫球蛋白 超家族黏附受体，所介导的这些步骤是：（一）最初选择素介导的 轧制，（二），趋化因子诱导激活（三）整合素依赖性的稳定的粘附和 随后的跨内皮迁移（5-7 ）然而，最近的证据已经促使原来的三步粘 附级联反应的扩展，包括新独立的步骤，如整合素介导的紧随中性粒 细胞逮捕的血管内爬行此外，跨内皮迁移（也称为血细胞溢出）可 发生在旁细胞和跨细胞活动中（10 ）在炎症组织中进一步的内皮下 间质白细胞的迁移主要由P 1和0 2整合素家族成员介导，P 1整合素 成员包括：与间质连接的a 10 1-，a 20 1和a s0 1-整合素；0 2整 合素成员包括：纤维蛋白原结合的Mac - 1 （ 11-13 ）白细胞相关膜结合蛋白酶或分泌蛋白酶以及粘多糖降解酶促进这一过程，这些酶帮 助中性粒细胞浸润细胞外基质（11; 14 ）在介绍了中性粒细胞内皮 的相互作用的不同步骤之后，本综述将集中在讲述嗜中性粒细胞募集 的最后一步，即跨内皮迁移中性粒细胞募集的多步过程在轧制过程中，中性粒细胞与内皮细胞表面之间经历了一个短暂 的相互作用，这可使作用慢下来。
轧制相互作用的最后一秒是可逆的， 由于它们受弱的选择素结合的介导，如E -，P -或L型选择素以及它们 的碳水化合物配体和P -选择素糖蛋白-1（PSGL-1）,轧制相互作用的 最后一秒是可逆的，（15）内皮细胞选择素的表达和曝露，如顶点 内皮细胞表面的P -和E -型选择素，是一个紧密调节过程P -选择素 存储在Weibel - Palade 小体，而且可以迅速易位到由几种刺激物激活 的内皮细胞的细胞腔表面截然不同的，E -型选择素不是连续表达 的，它是每隔几个小时之后再重新合成的（15 ）P -选择素/PSGL-1 相互作用主要参与了最初的共享（16），而缓慢的和更稳定的轧制由 E -选择素介导（17 ）有证据表明，最初的轧制和随后粘附在功能上 至少在两个层面是相互关联的：（一）有证据表明相关抗原-1整合素， 尤其是当它处于低亲和力构象时，参加缓慢轧制粘连随后相关抗原 -1的活性构象促进轧制状态的逮捕（18，19 ）二）第二，除了对 于流动中性粒细胞来说的“刹车”功能之外，轧制作用允许中性粒细 胞感觉到趋化因子的作用，与硫酸乙酰肝素蛋白多糖通过内皮细胞的 细胞膜有关该趋化因子衍生信号对启动强烈的粘附步骤（20 ）是至 关重要的。
在激活步骤中，趋化因子包括白细胞介素-8 ；化学刺激物包括补 体C5a，白三烯LTB4，血小板活化因子和细菌的衍生的甲酰化肽基， 通过转换低亲和力，选择素介导进入高亲和力作用，整合素介导的强 烈的粘附，诱导快速的中性粒细胞粘附（6;20; 21 ）中性粒细胞粘 附于血管内皮细胞是由整合素，VLA- 4 （ a 4 p 1 ）Mac - 1的（aMp2）和LFA- 1 （ aLp2）的相互作用介导的，作用于中性粒细胞的免疫球蛋白超家族成员如细胞ICAM- 1和ICAM-1和 VCAM-1，或作用于内皮细胞表面的高级糖基化副产物受体（22 ） 这些内皮反受体是组成型表达（细胞ICAM- 1和ICAM- 2 ， rage）或 进一步上调（ICAM - 1，RAGE ），或者被诱导（VCAM - 1 ）（ 22，23 ） 中性粒细胞外渗和免疫反应过程中整合素介导的粘附的重要性已由 几个从事小鼠一个或多个白细胞整合素缺陷（24-27 ），或白细胞粘附 缺陷综合征在男性中缺乏P 2整合素研究的研究人员所证明（22，28 ）在外渗过程中，白细胞整合素的活动主要由构象变化和集群调节，然 而白细胞整合素的表达只会受到轻微影响。
通过“内至外”的信号激活 整合素，这个过程主要受趋化因子介导，涉及几条路径，包括小GTP 酶，（29 ），以及整合素的胞质尾巴的与肌动蛋白结合蛋白相互作用， 从而诱导整合素构象的改变（30 ）小GTP酶Rap1调节调节相关抗原 -1亲和力（32-35 ）鸟嘌吟核苷酸交换因子（GEFs）,如CALDAG - GEFI（钙anddiacylglycerolregulated GEFI ） （ 36， 37 ）， VAV1 （ 38 ），激活Rap1的参与调制白细胞整合亲和力CALDAG - GEFI缺陷导致在 人类和小鼠体内趋化因子诱导的中性粒细胞的捕捉的减少（36，38 ） 此外，肌动结合蛋白如塔林蛋白（30; 39 ）或a -辅肌动蛋白（40 ）以 及14-3-3蛋白（41 ）已显示以p链为目标来激活整合素塔林蛋白是 一种包含两个功能区，一个球状头部和棒状域的细胞骨架蛋白塔林 蛋白的头部被认为可诱导相关抗原a L和p 2细胞质尾巴的分离以及导 致相关抗原-1高亲和力的构象的产生（42，43 ）中性粒细胞粘附到血管内皮细胞能通过整合素介导由外到内的 信号进一步增强，该信号因整合素聚类和构象改变或因整合素结扎而 发生。
在起初的捕捉之后，两个Src样蛋白酪氨酸激酶可以介导相关 抗原-1和Mac - 1诱导粘附稳定性，因为他们的抑制加速了处于流动 条件下壁中性粒细胞（44）的分离GEFs VAV1 and VAV3也有相似 的功能（38 ）此外，在 Wiskott-Aldrich 综合征蛋白（WASp）缺陷中 的中性粒细胞显示肌动蛋白的缺陷，细胞骨架的缺陷和紧随初始逮捕 的整合素的积聚只有在流动条件下，WASp-缺陷表型才可见（45） 被牵连到白细胞后粘附增强过程中的另外一个因素是桩蛋白，它与a 4-整合链的细胞质功能区相互作用（46 ）中性粒细胞跨内皮迁移经过强烈的粘附反应之后，中性粒细胞爬过内皮细胞表面到最近 的利用整合素Mac-1和LFA - 1的交界处，这个过程被称为运动（8 最近，关于中性粒细胞在体内爬行已提出证据（9）跨内皮迁移主要 以旁路方式发生，即在胞间交叉点处特别是，三个细胞交界处，以 及内皮交叉点处的地方基底膜表达较低水平的基质蛋白（48）,已被提 议作为迁移的中性粒细胞在体内的外渗优先领域此外，最近证据表 明，中性粒细胞和其他的白细胞可能以一跨细胞的方式进入血管外组 织，即通过内皮细胞（12，49，50 ）。
事实上，当血管内爬行在体内 禁用时，跨细胞通路可能会变得更加突出（9 ）体外研究结果指出了 对于中性粒细胞来说，旁路途经占主导地位，然而，5 %的中性粒细 胞被发现使用发跨细胞途经（49 ）有趣的是，在中性粒细胞的迁移 过程中，长寿命的TNF- a预处理和ICAM - 1的超表达导致跨细胞途经 的相对贡献增加（51）对于旁通路，轮回中性粒细胞内皮交界处代表着主要障碍至少 有两种类型的交界处都参与了轮回：（一）由能促进钙依赖性的，同 种细胞间的接触维生素E -钙粘蛋白形成的粘附交界处（zonula粘 着）细胞之间的膜相关VE -钙粘蛋白和肌动蛋白细胞骨架的链接受 细胞内连环的介导二）紧密连接（闭锁小带），最重要的交界处， 形成了密切的细胞间黏附和由三种类型的跨膜蛋白组成，occludin, claudins和交界处粘附分子（JAM）,这是与细胞内如闭锁小带-1 （Z0-1）的 细胞骨架信号分子相链接的（52 ）1）维生素E-钙粘蛋白维生素E-钙粘蛋白充当过路白细胞的看门人，在体内，抗体抵抗 维生素E-钙粘蛋白的抗体增加内皮细胞单层通透性和中性粒细胞率 外渗（53 ），而在体外研究表明，在血球渗出过程中，维生素E-钙粘 蛋白的缺口瞬间形成（54 ）。
不过，目前还不清楚，在中性粒细胞的 迁移位点，维生素E-钙粘蛋白是否从细胞交界处消失对于该过程或结 果是不是一个先决条件的一个可能的解释是，中性粒细胞粘附血管 内皮细胞导致由维生素E-钙粘蛋白的磷酸化调节的维生素E-钙粘蛋 白介导的粘附部分的减少维生素E-钙粘蛋白以及丝氨酸665的胞质 尾的酪氨酸658 and 731的磷酸化已表明与维生素E-钙粘蛋白的功能 障碍有关（55;56）最近，ICAM-1介导中性粒细胞粘附内皮细胞可诱 导维生素E-钙粘蛋白酪氨酸磷酸化进而推进中性粒细胞轮回（57 ） 包括可以使&连环蛋白磷酸化的GTP酶Rael，活性氧，活性氧激活 富含脯氨酸的酪氨酸磷酸化激酶2的其他途经已经被认为是信号传导 介质（58;59 ）有趣的是，中性粒细胞弹性蛋白酶的产生能够降解细胞外部分的 维生素E-钙粘蛋白因此，中性粒细胞可能参与这一机制，以便他们 通过内皮细胞间交界处（60,61 ）然而，因为弹性蛋白酶缺陷或MMP- 9缺陷中性粒细胞在无流动跨内皮迁移中没有缺陷，使得中性粒细胞 蛋白酶参与的维生素E-钙粘蛋白的蛋白水解的重要性不是很清楚 （62 ）2）JAMS和相关分子JAMs是免疫球蛋白超家族成员，包括两个细胞外免疫球蛋白样功 能区域（63，64），由于最后羧基端的二类PDZ结构域结合基序，他 们在内皮细胞和上皮细胞紧密连接处被发现，这使他们与交界处相关 的PDZ-功能区相连的分子预先发生相互作用（63 ,64 ）。
包括血小板， 中性粒细胞，单核细胞和淋巴细胞（65 ）在内的不同的循环血细胞中 发现JAM-A，而JAM-B 和JAM-C的表达方式更多的限制表达在血小 板和B细胞亚群上的JAM-C （ 66-69 ）除了通过细胞膜末端区域的保 守序列使他们的倾向在同种交互方式中相互作用（70-72 ），JAM-A也 担任白细胞整合素的反受体：特别是，连接LFA-1的JAM-A （73;74）, 与VLA-4相关的JAM-B（75） 和与Mac-1相互作用的JAM-C （68）在中性粒细胞溢出过程中，JAM-A假设性作用的第一证据来源于 实验，该实验证明脑膜炎JAM-A的抗体抑制中性粒细胞募集（76 ） 在腹膜炎实验模型中，JAM-A 缺陷的小鼠表现出中性粒细胞募集能 力的下降但是，在这种模型中，骨髓细胞/中性粒细胞上专一的 JAM-A 在迁移过程中是必不可少的，而发现并不需要血管内皮细胞 上的JAM-A （ 77; 78 ）截然不同的是，在灌注损伤模型肝模型中， 内皮细胞JAM-A介导中性粒细胞的外渗（78 ）JAM-C与Mac-1的异嗜连接被发现可介导，特别是在低转换速 率的，强烈的血小板-中性粒细胞的相互作用（68 ）。
此外，可溶性的 JAM-C阻断中性粒细胞穿过内皮细胞和上皮细胞（79-81 ）在一肺部 炎症模型中中性粒细胞聚集受到针对JAM-C的阻断抗体的抑制，内皮 细胞特异性超表达的JAM-C可使积聚增加（81 ）然而，这些JAM-C。