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1、大理学院2014届生物技术专业本科学生毕业论文铁皮石斛组培幼苗几种生长因素的研究Study of Some Factors on the Growth of Tissue Culture Seedlings of Dendrobium Candidum学 院 农学与生物科学学院 专 业 生物技术 姓 名 方瑞花 年级学号 2010161141 指导教师 施继惠 职 称 讲师 起止日期 2013.12月2014.4月 制表日期：2014 年 5 月 5 日推荐精选目 录一、中文题目、摘要、关键词.1二、英文题目、摘要、关键词.2三、前言.3四、正文.41、材料.42、实验方法.43、测定指标.4
2、4、实验结果.55、讨论与分析.86、结论.9五、参考文献.10六、总结与体会.12七、谢辞.13推荐精选铁皮石斛组培幼苗几种生长因素的研究方瑞花（大理学院农学与生物科学学院2014届生物技术班，云南大理 671003）指导教师：施继惠 讲师摘要：以铁皮石斛组培幼苗为材料，探究不同浓度的香蕉和土豆添加物及其不同浓度的（土豆、香蕉）混合添加物，不同基础培养基（MS和1/2MS），3种不同碳源对组培幼苗壮苗、生根的影响。结果表明：(1)添加物，20%香蕉15%香蕉、土豆混合物20%土豆；(2)1/2MS比MS培养基更适合组培幼苗的生长；(3)相同浓度条件下不同碳源效果为：白砂糖蔗糖葡萄糖。因此，铁
3、皮石斛幼苗最佳的壮苗培养基为：12MS+白砂糖20g/L+活性炭2g/L +20%香蕉+9gL琼脂，pH5.8-6.0关键词：铁皮石斛幼苗；添加物；碳源推荐精选Study of Some Factors on the Growth of Tissue Culture Seedlings of Dendrobium CandidumFang Rui hua（Department of Agriculture and Biology , Dali University ,Yunnan,Dali 671003, China）Instructor：Shi Ji huiAbstract：In this
4、article we study the effect of banana、potato and the mixture on cultivating strong seedlings and rooting of Dendrobiurn candidum. The effects of some factors by different medium and carbon source on the growth of tissue culture seedlings. The results showed:（1）The effect with additive on cultivating
5、 strong seedlings and rooting of the concentration was 20% banana 15% mixture with banana and potato 20% potato.（2）The medium of 1/2MS was the most suitable than the medium of MS on cultivating strong seedlings and rooting.（3）The order of Influence with strong seedlings and rooting when the same con
6、centration of carbon source was : white granulated sugar cane sugar glucose. The results showed : The most suitable medium for seedlings growth and rooting was 1/2MS+ white granulated sugar 20 g/L+ activated carbon 2g/L+ banana 200g/L+9g/L agar , pH5.8-6.0Key words：Dendrobium candidum ；additive ；car
7、bon source推荐精选前言铁皮石斛(Dendrobium candidum Wal1ex Lindl )属兰科石斛属多年生附生草本别名铁皮兰，因其茎节处呈黑褐色，又名黑节草1。在我国主要分布于广西、云南、贵州等地，生长在海拔达1600m左右的山坡半阴湿的岩石上2。铁皮石斛是2005年版中国药典收录的3种石斛原植物之一，是石斛药材中最珍贵品种，具有滋阴清热、益胃生津、止咳润肺的功效3。近年来研究表明铁皮石斛中含有丰富的多糖类成分，这种多糖成分具有增强人体免疫力、防癌抗癌、恢复嗓音等功效，是极其珍贵的中药材4。由于近年来过度采挖、原始森林生态环境破坏等原因，使得野生铁皮石解资源面临枯竭，供应
8、紧张；加上铁皮石解繁殖系数低，远不能满足生产上的需要5。为保护这一珍贵中药品种，许多学者对铁皮石解种子和茎尖培养技术进行了研究，但在试管苗阶段增值系数低、试管苗茎细小、细弱，移栽成活率不高，影响了铁皮石解试管苗快繁和大规模的工厂生产6-8。本实验在前人研究的基础上，以铁皮石解组培幼苗为材料，系统地研究2种添加物及其混合添加物、2种培养基、3种碳源对试管苗壮苗、生根的影响，以提高铁皮石斛在组织培养中的增殖率和生根率，为工厂化育苗提供技术支撑9。推荐精选1. 材料由学院组培室提供的，无菌、生长良好，株高0.51.0cm，具有1-2片真叶的无根铁皮石斛组培幼苗，用于幼苗壮苗和诱导生根等生长因素的研究
9、。2.试验方法2.1 添加物的筛选设9个处理，即以香蕉、土豆及其混合物各15%、20%、25%为添加物，添加至相同激素配比的1/2MS（蔗糖5%+活性炭2g/L培养基，琼脂9g/L，pH5.8-6.0）。以不加添加物（K1）的处理为空白对照，每个处理5瓶，每瓶接种10颗组培幼苗，3个月后统计结果。2.2 MS和1/2MS培养基的筛选设6个处理，即以香蕉、土豆各20%为添加物，分别添加至相同激素配比的MS和1/2MS培养基（蔗糖5%+活性炭2g/L培养基，琼脂9g/L，pH5.8-6.0）。以不添加任何添加物的MS和1/2MS培养基为空白对照，每个处理5瓶，每瓶接种10颗组培幼苗，3个月后统计结
10、果。2.3 不同碳源的筛选设3个处理，即以浓度均为20g/L的蔗糖、白砂糖、葡萄糖为碳源，添加至相同激素配比的1/2MS+活性炭2g/L培养基，琼脂9g/L，pH5.8-6.0。每种接种5瓶，每瓶接种10颗组培幼苗，3个月后统计结果。3.测定指标及方法3.1 苗数取出全部5瓶材料，用镊子将幼苗全部取出，放置培养皿中待用。数出肉眼可见的幼苗数，记录数据，统计各参数的总和如表1。3.2 株高取出全部5瓶材料，用镊子将幼苗全部取出，放置培养皿中待用。测量50株石斛苗的株高10，记录数据，即50个材料组，计算各参数平均值如表1。3.3 根数及根长推荐精选取出全部5瓶材料，用镊子将幼苗全部取出，即50个
11、材料组，放置培养皿中待用。数出肉眼可见的根数，并用尺子测量其根长10，记录数据，计算各参数平均值如表14.实验结果4.1 不同添加物对幼苗的影响表1添加物对幼苗的影响编号添加物及浓度株高/cm根长/cm平均根数数/条叶宽/cm总苗数/颗生长状况X2X3X4T2T3T4H2H3H4香蕉15%香蕉20%香蕉25%土豆15%土豆20%土豆25%混合物15%混合物20%混合物25%1.803.561.641.703.111.603.431.941.101.751.871.501.431.721.062.511.691.424.396.715.013.554.213.485.795.274.600.35
12、0.450.300.300.400.400.450.400.35105179160133149105160137105均匀整齐，健壮均匀整齐，根粗壮均匀整齐，健壮不整齐，弱均匀整齐，弱不整齐，弱均匀整齐，根粗壮均匀整齐，健壮均匀整齐，健壮注：混合物为香蕉和土豆的各半均匀混合添加物。“株高”的测量标准足从植株基部至新叶叶鞘环痕处。“叶宽”的测量标准是选择各株中最宽新叶测量其值，最长叶通常即为最宽叶。“根数”的测量标准是植物中所有根总数11。“根长”测量标准是植株所有根的平均长度。 推荐精选图1 20%香蕉（左）15%混合物（中）20%土豆 (右)由表1和图1知，从株高、苗数、根数、根长、叶宽等指
13、标综合来看，在添加的12个处理中：（1）以添加20%香蕉效果最好，其根长达1.87cm，株高3.56cm，根诱导率12达到6.71，总苗数179颗，幼苗增殖效果也最好，可能是由于根的分化形成，加快了植株营养的吸收，促进了茎叶的生长，达到了壮苗生根的目的（2）其次是15%（香蕉、土豆）混合添加物效果较好，根长2.51cm，株高3.43cm，平均根数5.79，总苗数160条（3）最后是20%土豆的生长效果，根长1.72cm，株高3.11cm。平均根数4.22，总苗数149条。综上所述：添加物，20%香蕉15%（香蕉+土豆）20%土豆，表现在根粗壮，均匀整齐，叶色浓绿。这表明，香蕉有利于诱导铁皮石斛生根并且在一定程度上起到壮苗作用, 而且香蕉、土豆混合添加物效果均比土豆添加物更好。4.2 MS和1/2MS培养基对幼苗影响表2 MS和1/2MS培养基对幼苗的影响编号添加物及浓度培养基株高/cm根长/cm平均根数总苗数/颗生长状况X3X3-1
