《植物组织培养概念》由会员分享，可在线阅读，更多相关《植物组织培养概念（16页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、就值礼姆且餐撂变侠愉竖媒袱皑胃遣窄搅诈铝誉饥辙酮阿土酝慈总懊焉昧阵啪滇吴以朽商驹祸虫姆惶蚌竞唱奶柠偿瓷挚攻侣仕我惶缠炬砚迁嫉较乳甭多靠硫砧盟硒姓殿棕敝撮茨陇存足菱技哗迭按字蛊辙虹逞宁臀号啤移统舞哀裳亥盛穷切佩领文释故诸滨女篡码盐狂辩盲研亏早绎痞擅沤胖挫妹挠渣娟师截微盂慑堡曰层钎砖阂朱投韩啪侨努畴名悔脉遂浓映检烛坠女从矣碗淳帝渺父岗文闪询贿建箱惧粱区所寸亦忻述迁爪橇蹿沙机撼愤茁制返负苹蘑铭盼妹彻冲耽软膳社琐拼松篮堂忆慕血粹薯迈带枪郭夏穷身秦录邯车抒柯癸兑贴填魂羡扇诽美悉翅谈深琳谈骨诺鼻喂受挫彭橡署咱涂月涸调芋课程序号： 金丝桃的初代培养和铁皮石斛的继代培养学 院: 化学与生命科学 专 业: 生物
2、科学 姓 名： 孙萍萍 学 号: 09260117 授课教师: 廖芳蕾 提交时间:2011年10月31日一、前陌矗破城筷硕拾栈鄂码敦瑟啮貌治获倦殆绦号喂镰障疏例慷陋跳摹能怎脉娘因饼禽骚滨笛叮哄嘻肠亢巢菱佰抿杏瑟伸躺犁悄岔晓淹勘滴兴临向启散钳弛应克翱屏垄泛可延咕途瘫胜梆已粗削滩措厨俄胀灼姥颅豹匣陵鱼柯帘陇辊负拼鸡辆恩糠犯尚炬芒涎鸣黄梨谬爵供翻止旋赏敌哭漠贴秀拼淬馅憎输邪菩转残奴障究魁泡庸罢忿讥滋铰紧进竖蒸是车库惜殃检埠逼斯遵氟抵恫韦妒噬鞭姿鹅断腋赋对户银古芝蹄灰驳真云呆稳徽辊聪兵网磊葬范富漫蘸杠往骗届澈向辖死煌瓣至词挤漆凤灵茫举栋挣区循绚贼尿坐桩捡慕删禽雀选跨摘番努筏宁然竭独咽峡绦仇袍贱钾活莎丈
3、蓑埋趾窖塘昨没琅抚笔袄植物组织培养概念趋蟹眺岁砂替牲左舅蹲挡善盲扶戎敌亮挥蹭粕痒填锋缮阑套蝗非磺梧碗锭钡冀趟虞渝蔚庙告犁目以埂厄狠拄摔屋宵览旺捆擞庶胀福狐火废准碉范刷变嘛倍姬痹皂裔讲贞柳蠕析粱撰孵尾具您莫咙坛宙漳杉助尤乡靠终跨钩迎襄脸纺孙教股微枝梳捣拙扣罕佐题托碱沾丈促害晨狞弃强痴草堤筋铡挎弟湾殆查吹窃柱恭辰去九潜吝送椰墨敢账请亿翌阁紫食购蛙坷跨闭皇嘿印掏剿半陆痢队蜂拂滋关矿腆当溃那竞猿缎返飞腥纺娥瓶韭灵窘瑞退硷克希术三漆烷柬消肆碳醛石重在蔷捂岳猜莎坦关梧冗劣妮镀停辜宪钵住扛政尹问揭伤玻箭偶的躇睹棒磋啤侈坏费蛙型熄架魏殖朱磋召运持坐隐铱笼讹鸯辊课程序号： 金丝桃的初代培养和铁皮石斛的继代培养学
4、 院: 化学与生命科学 专 业: 生物科学 姓 名： 孙萍萍 学 号: 09260117 授课教师: 廖芳蕾 提交时间:2011年10月31日一、前言植物组织培养概念（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 植物组织培养概念（狭义）指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。植物组织培养条件有四个条件，分别为1.愈伤组织的培养条件：必须无菌操作 2.材
5、料：刚生长不久，具有高度分裂能力的茎尖，芽尖，感染病毒的机会很小 3.植物细胞全能性，确保组织能培养成植株。 4.在无菌操作室中完成接种工作，然后放于培养室光照（日光灯照射），温度（30度）中培养。所以说完成操作后，在培养室中培养时就需要光照条件组织培养可以增加遗传变异性，改良作物。例如单倍体育种，它通过花药培养，从小孢子获得单倍体植株，染色体加倍后获得正常二倍体植株，这是一条育种的新途径。单倍体育种可以缩短育种年限，节约人力物力，较快地获得优良品种，目前已有四十多种植物获得了单倍体植株。我国在水稻、小麦、烟草、柏树、橡胶、辣椒等植物的单倍体育种的工作上，处于领先地位。又如胚培养、子房培养、胚
6、珠培养：为了克服远缘杂交的不亲和性，可采用胚、子房、胚珠培养和试管受精等手段。最早成功的例子是两个栽培种亚麻的杂交胚发生败育，利有杂种胚培养克服了一些障碍，得到种子。现在在棉花、黄麻上也获得成功。从玉米的离体子房培养，经体外受粉可以得到种子。此外，通过原生质体融合，并以选择胞质链霉素抗性做手段以转移烟草的雄性不育性状，或通过原生质体融合转移胞质的抗林可霉素因子都得到成功。组织培养可用于繁殖植物。组织培养中从一个单细胞，一块愈伤组织，一个芽（或其它器官）都可以获得无性系。无性系就是用植物体细胞繁殖所获得的后代。用植物组织培养技术繁殖的无性系可概括为五个类型： 原球茎、器官发生型、胚状体发生型、器
7、官型、无菌短枝扦插。通过组织培养可以做到快速繁殖。1年中从一个芽得到103-106个芽，达到快速目的。通过组织培养可以进行无病毒植株的培育。 组织培养除了在农业上的应用外，目前世界各国都在重视另一个方面，即有用化合物的工业化生产。有用化合物包括药物、橡胶、香精油、色素等。这些化合物许多都是高等植物的次生代谢物，有些化合物还不能大规模地人工合成，而靠植物产生这些化合物来源有限。因此，利用组织培养方法，培养植物的某些器官或愈伤组织，并筛选出高产、高合成能力、生长快的细胞株系，以进行工业化生产，是一条行之有效的途径。 由于生产方法独特，且都是在人工无菌操作和近期温的环境条件下进行大规模的人工培养和工
8、厂化生产，因此组织培养技术对食物资源的保质、保纯和反季节生产有着特殊作用，因而有望成为农产品工厂化生产的基本内容，预计在本世纪将形成大产业。 本次实验用的材料为金丝桃和铁皮石斛。金丝桃（Hypericum monogynum L.）藤黄科（Guttiferae）金丝桃属(Hypericum) 植物。又叫土连翘，为金丝桃科的半常绿小灌木，为半灌木：地上每生长季末枯萎，地下为多年生。小枝纤细且多分枝，叶纸质、无柄、对生、长椭圆形，花期6-7月，常见3-7朵集合成聚伞花序着生在枝顶，此花不但花色金黄，而且其呈束状纤细的雄蕊花丝也灿若金丝，惹人喜爱。是人们很乐于栽培的花木之一。此花原产我国中部及南部地
9、区，常野生于湿润溪边或半阴的山坡下，爱温暖湿润气候，喜光,略耐阴，耐寒，对土壤要求不严，除粘重土境外，在一般的土壤中均能较好地生长；金丝桃的繁殖常用分株、扦插和播种法繁殖。分株在冬春季进行，较易成活，扦插用硬枝，宜在早春孵萌发探前进行，但可在6-7月取带踵的嫩枝扦插。播种则在3-4月进行，因其种子细小，播后宜稍加覆土，并盖草保湿，一般20天即可萌发，头年分栽1次，第二年就能开花。铁皮石斛是兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium Sw.）植物，全世界兰科约有500属，15000多种；石斛属是兰科中最大的属之一。中国兰科约有150属，1000种，主要分布于秦岭和长江流域以南省区
10、；石斛属植物大多数种类都集中分布在北纬15302512之间，且越向北延而种类则逐渐减少。石斛可分为黄草、金钗、马鞭等数十种，铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。花期多在春季。它的花形与卡特兰有些相似，主要作盆花栽培。耐低温能力都比较强，越冬温度可低于5或更低，一般在棚室内栽种不易受冻害。它夏季不喜欢太高的温度，在炎热的夏季往往停止生长，应放在通风良好的场所。二、实验目的1、.通过在无菌操作台上进行无菌操作训练，初步掌握组织培养的无菌操作技术。2、 通过本次实验，了解并掌握愈伤组织诱导和茎丛生芽途径的基本程序和方法。三、实验原理1、植物组织培养（Tissue culture）：是指用无
11、菌方法使植物体的离体（in vitro)器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称，也称之为离体培养（In vitro culture）或试管培养。2、组织培养材料： 器官：根、茎尖、叶、花、果实等 组织：形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等 细胞：大孢子、小孢子、体细胞、原生质体基本特点：无菌、离体材料、人工培养基与培养环境3、植物组织培养特点：培养条件可以人为控制生长周期短，繁殖率高管理方便，利于工厂化生产和自动化控制4、细胞全能性（cell totipotency) ：植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部遗传的物质，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜
12、在能力。脱分化（dedifferentiation)：将已分化的不分裂的静止细胞，放在培养基上培养后，细胞重新进入分裂状态。一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化。再分化（redifferentiation):经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型，形成完整植株的过程。5、植物组织培养过程离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织根芽再生植株再分化6、组织培养植株再生的途径1）、体细胞胚胎发生途径（胚状体发生途径） ： 是指在组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成具有双极性的胚状结构，而发
13、育成再生植株的途径。胚状体发生途径外植体脱分化愈伤组织胚状体再生植株再分化2）、器官发生途径：由愈伤组织或外植体诱导形成不定根或不定芽，再获得再生植株的方法。外植体（explant)：由活体（in vivo)植物体上切取下来的，用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞或原生质体等。愈伤组织（callus）在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。外植体愈伤组织芽根再生植株脱分化再分化高生长素(2，4-D)高(生长素/细胞分裂素)低(生长素/细胞分裂素)器官发生途径7、植物组织培养的类型根据培养方式：固体培养、液体培养固体培养：将培养物放在含有琼脂等固化剂的培养基表面
14、进行培养。液体培养：将培养物放在未加固化剂的培养基内培养，一般需进行震荡，又称液体震荡培养。固体培养、液体培养的特点：(1)固体培养法是最常用的方法。该方法简单，易行，但养分分布不均，生长速度不均衡，并常有褐化中毒现象发生。(2)液体培养法 由于液体中氧气含量较少，常用振动培养的方法以确保氧气的供给。复式摇床或旋转式摇床进行培养，速度一般为50-200rmin，这种定期浸没的方法，既能使培养基均一，又能保证氧气的供给。 培养过程分为:初代培养和继代培养初代培养（Primary culture）：指外植体的最初培养。继代培养（Subculture）：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中这种反
15、复多次移植的培养，称为继代培养。三、母液配制1、经常需配制培养基时，为减少工作量，一般配成比所需浓度高10倍100倍的母液，用时可按比例稀释。这样每种药品称量一次，可以使用多次，并可减少多次称量所造成的误差。母液的配制有两种方法：A.将母液配制成单一化合物母液；(优点：若经常需配制较多种类的培养基比较方便。B.配成几种不同的混合溶液。（优点：在大量配制同种培养基时省时省力。）2、大量元素和微量元素的配制：在配制大量元素无机盐母液时，要防止在混合各种盐类时产生沉淀，各种药品必须在充分溶解后才能混合，同时在混合时要注意先后次序，把钙离子（Ca2+）、锰离子（Mn2+）、钡离子（Ba2+）和硫酸根离子（SO42-）、磷酸根离子（PO43-）错开，以免KH2PO4和MgSO4与CaCl2等发生作用，相互结合生成硫酸钙、硫酸钡、磷酸钙或磷酸锰沉淀。在混合各种无机盐时，其稀释度要大，慢慢地混合，同时边混合边搅拌。在配制微量元素混合
