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1、实验一 血液标本的采集 Collection of blood sample(一)毛细血管采血法实验原理用采血针刺破毛细血管，待血液自然流出后，用微量吸管吸取所需量的血液。试剂器材一次性消毒采血针、20l微量吸管（校正后使用）、75%乙醇棉球、无菌干棉球。操作步骤1准备 对接微量吸管和乳胶吸头，并检查连接处是否漏气。图1-1 手指毛细血管采血2按摩 轻轻按摩受检者采血部位（通常采用左手无名指指尖内侧），使局部组织自然充血。3消毒 用 75% 乙醇棉球消毒采血部位皮肤，待干。4针刺 用左手拇指和示指捏紧采血部位使采血部位的皮肤和皮下组织绷紧，右手持一次性消毒采血针，自指尖腹内侧迅速穿刺，立即出针
2、。5试血 待血液自然流出后，用消毒干棉球擦去第1滴血。6吸血 待血液自然流出后，用微量吸管吸血至刻度，然后用消毒干棉球压住伤口止血。注意事项1所选择的采血部位皮肤应完整，避开烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等部位。除特殊情况外，不要在耳垂采血。半岁以下婴幼儿由于手指小，可自拇指、脚趾或足跟内、外侧缘采血。严重烧伤者可选皮肤完整处采血。2本试验是有创性检查，故要严格按无菌技术操作。防止采血部位感染；做到一人一针一管，避免交叉感染。3消毒皮肤后，应待乙醇挥发后采血，否则流出的血液会四处扩散而不成滴。4进出针速度要迅速，且有足够深度 23mm，稍加挤压以血液能流出为宜。5如血流不畅，可以用左手自采血部位
3、远端向指尖稍施压使血液流出，切勿在采血部位附近用力挤压，以免造成组织液混入，影响结果准确性。6应使用经过校正或由临床检验中心核准的一次性血红蛋白吸管（误差 1% ）吸取血液。7如进行多项检查时，应依次采集血标本：血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数与分类。8一些药物及饮食对检验结果会造成影响应尽量避免饮用，不能停用这些药物时，观察检验结果时应考虑这些因素对检验结果的影响。实验评价毛细血管采血法操作方便，用血量少，适用于各种微量检查法或进行大规模普查。它可满足对红细胞、白细胞、血小板及血红蛋白等的定量检查，但不能重复测定。由于毛细血管血可被组织液稀释，如操作不当可造成血细胞计数偏低。
4、取血部位多用指尖和足跟等部位，除特殊情况不要在耳垂采血，以往采用耳垂取血，虽痛感较轻，但因耳垂末梢血循环较差，血细胞容易停滞，常造成红细胞、白细胞、血红蛋白和血细胞比容等的结果比静脉血高，且严寒、炎热等情况可造成计数值波动较大。手指采血虽痛感较强，但能获得较充足的血量；检测结果比较恒定，与静脉血之间差异较小，是目前我国多数医院血细胞检验普遍采用的方法。但由于毛细血管采血无法规定采血刺入的深度，加之每人皮肤厚度不同，刺破皮肤采血常需诱导，必然有组织液混入而影响检查的准确性。如要获得更具代表性的血细胞检查结果,首选静脉采血法。思考题试述毛细血管采血的注意事项？（二）静脉采血法实验原理注射器针头刺入
5、浅静脉后，利用往后拉动针筒栓时形成的负压，使血液流入针筒。试剂器材1试剂30g/L 碘酒、75%酒精。2器材一次性消毒注射器、压脉带、垫枕、消毒棉签、试管。操作步骤1准备 取试管1支（根据需要加相应抗凝剂）。2检查注射器 打开一次性注射器包装，将针头和针筒紧密连接，并使针头斜面对准针筒刻度，抽拉针栓检查有无阻塞和漏气。最后排尽注射器中的空气，备用。3选择静脉 受检者取坐位，前臂水平伸直置于桌面枕垫上。暴露穿刺部位，选择容易固定、明显可见的肘前静脉。 图1-2 静脉采血4消毒 先用 30g/L 碘酊棉签自所选静脉穿刺处从内向外，顺时针方向消毒皮肤，待碘酊挥发后，再用 75% 乙醇棉球以同样方式拭
6、去碘迹，待干。5扎压脉带 在采血部位上端约6cm处扎紧压脉带，并嘱病人反复握拳几次后紧握拳头，使静脉充盈显露。6穿刺 取下针头无菌帽，以左手拇指固定静脉穿刺部位下端，右手拇指和中指持注射器针筒，示指固定针头下座，使针头斜面和针筒刻度向上，沿静脉走向使针头与皮肤成 30。角斜行快速刺入皮肤，然后成 5。 角向前穿破静脉进入静脉腔。见回血后，将针头顺势探入少许。7抽血 穿刺成功后右手固定注射器，左手松压脉带后，再缓缓抽动注射器针栓至所需血量。受检者松拳，用消毒干棉球压住穿刺孔，拔出针头。嘱受检者继续按压针孔数分钟。8加样 取下注射器针头，将血液沿管壁缓缓注入试管中（抗凝血需立即轻轻颠倒混匀），盖紧
7、试管塞备用。注意事项1在采集血液标本前，受检者应尽量保持平静，减少运动，住院患者应尽量在早晨卧床时取血。应向病人耐心解释，以消除不必要的疑虑和恐惧心理。如遇个别病人进针或采血后发生眩晕，应立即拔出针头让其平卧休息片刻，即可恢复。必要时可给患者嗅吸芳香酊、针刺（或拇指压掐）人中和合谷等穴位。若因低血糖诱发眩晕，可立即静注葡萄糖或嘱患者口服糖水即可。如有其他情况，应立即找医生共同处理。2采血一般通常选择肘前静脉，如此处静脉不明显，可采用手背、手腕、腘窝和外踝部静脉。幼儿可采用颈外静脉。如遇肥胖患者，静脉暴露不明显，可以左手示指经碘酒、乙醇消毒后，在采血部位触摸，发现静脉走向后凭手感的方向与深度试探
8、性穿刺。3根据用血量可选用2ml、5ml、10ml等不同刻度的一次性注射器。4静脉采血前要仔细检查针头是否安装牢固，针筒内是否有空气和水分。所用针头应锐利、光滑、通气，针筒不漏气。5抽血时切记针栓只能向外抽，不能向静脉内推，以免空气注入形成气栓，造成严重后果。6止血带压迫静脉时间不能超过1min，绑扎不能过紧以避免瘀血和血液浓缩，否则会使血液成分浓度发生改变。7血液注入试管前应先取下注射器针头，然后将血液沿试管壁缓缓注入试管中，防止溶血和泡末产生。需要抗凝时应与抗凝剂轻轻充分混匀，切忌用力振荡试管。实验评价静脉采血法适用于用血量较多（2ml）的检验项目。由于静脉血标本代表性大，且各项成分相对恒
9、定，可反映病人整体状态，是临床最常用的检验标本，广泛用于各项生化、血液、免疫、微生物学检查。毛细血管血和静脉血之间，无论细胞成分或化学组成，都存在不同程度的差异，因此在判断和比较所得结果时必须予以考虑。PCV、红细胞计数和血红蛋白测定结果前者略高，白细胞总数和中性粒细胞计数则高大约8%，单核细胞计数高大约12%；而血小板计数后者比前者高大约9%，甚至达32%。思考题静脉采血有哪些注意点？谈谈实验后的体会？（三）真空采血针的使用实验原理一次性真空采血器，采用特制的一次性双针头采血针，一端针头刺入血管，另一端针头刺透管盖进入真空采血管，血液即可因采血管内真空负压而流入管内。试剂器材1真空静脉采血针
10、（软接式双向采血针系统）。2 真空负压管 采用国际通用的头盖颜色标记，采血管标记鲜明夺目，极易分辨，避免采血时用错添加剂及送检标本与检测项目不符。见表1-1表1-1 真空负压管头盖的颜色及适用范围颜色添加成分用途蓝、黑3.2%柠檬酸钠缓冲剂用于凝血四项及血沉检查绿肝素锂用于生化检查红无添加剂用于血库和血清血检验紫乙二胺四乙酸（EDTA-K 2 ）用于白细胞、红细胞、血小板等常规检查黄无添加剂消毒容器用于血培养操作步骤1选择静脉 受检者取坐位，前臂水平伸直置于桌面枕垫上。暴露穿刺部位，选择容易固定、明显可见的肘前静脉。2消毒 先用 30g/L 碘酊棉签自所选静脉穿刺处从内向外，顺时针方向消毒皮肤
11、，待碘酊挥发后，再用 75% 乙醇棉球以同样方式拭去碘迹，待干。3扎压脉带 在采血部位上端约6cm处扎紧压脉带，并嘱病人反复握拳几次后紧握拳头，使静脉充盈显露。4穿刺 拔除采血穿刺针的护套，手持采血针沿静脉方向呈30角刺入皮肤，然后成5角向前刺破静脉壁进入静脉腔，5采血 见回血后，用输液贴固定针头，左手持真空采血管，右手将采血器末端垂直刺入盖中央的胶塞，在负压的作用下,血液迅速流入管内。6拔针 在采血量还差0.3ml0.5ml时松止血带、拔穿刺针，用消毒干棉球压迫穿刺点数分钟，待软管内的血液全部流入试管后拔除管塞穿刺针。注意事项1.使用真空采血器前应仔细阅读厂方说明书。整个过程持针器应把稳，防
12、止针刺损伤。 2.该方法针头较普通注射器针头略粗，穿刺口锋利。尽量选择粗大的静脉穿刺。3胶塞穿刺针上的乳胶套能防止滴血，采血时不能取下。4一次性真空采血管使用前勿松动其管塞，以防采血量不准。5如有需抗凝标本，先采集抗凝标本，血液采集后需及时上下颠倒6次7次充分摇匀。6如需多管血样，待第一管采集完毕，将穿刺针拔出刺入另一采血管即可。应按以下顺序采血：血培养管、无抗凝剂管、凝血象管、其他有抗凝剂管。实验评价真空采血法和以往开放式采血法相比有以下优点：简便快捷安全 预先添加各种添加剂，无需临时配制，满足临床多种试验所需。一针多管，减少重复操作，减轻患者痛苦。实现采血与检验一管操作，直接上机，节省检验
13、操作时间，同时避免了对医护人员的感染和患者血标本间的交叉污染。无菌程度高，血液污染几率小，对检验结果的干扰小。对于需用血清检验的项目，可采用带有分离胶的真空采血管，能快速分离血清，大大提高检验速率。一次性真空采血法直接将血液注入采血管省略了血液在注射器针筒内停留以及从针筒转移至采血管两个过程，也避免了传统方法中注射器将血液打入采血管所引起的血液有形成分的改变。标本留取快，减少了血液的反复挤压，血细胞破坏所致的溶血，检验结果更为真实可靠。其真空度的准确设定使实际采血量误差值为5%，主要误差来源血液粘度变化及试管内径的微细差别。但真空采血针及真空负压管成本过高，使其推广使用有一定难度。思考题试述真空采血管的优点？
