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1、 微生物知识要点：一、 葡萄球菌：1 致病因素：血浆凝固酶；溶血素；杀白细胞素；肠毒素；表皮剥脱毒素；TSST-1； 耐热核酸酶； 葡激酶；透明质酸酶；脂酶。2 临床意义：疖痈等；内脏感染肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎； 全身感染败血症、脓毒血症； （毒素有关）食物中毒；烫伤样皮肤综合症；毒性休克综合症；假膜性肠炎。3 鉴定： 细菌和菌落形态； 生化实验：触+微 阳性；链+肠 阴性 葡：杆菌肽R，呋喃唑酮S金黄色葡萄球菌特性：一般平板-脂溶性黄色色素；血琼脂-溶血；血浆凝固酶+ ； 耐热核酸酶+ 甘露醇发酵+2）.如何拟定从标本中分离的细菌为葡萄球菌？并拟定其有无致病性。答：直接
2、镜检，经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌，可初步报告疑为葡萄球菌，需进一步分离培养鉴定。分离培养：血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定，若无细菌生长，需持续观测7天，并以血平板拟定有无细菌的生长。脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板，37过夜，可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。金葡菌菌落周边有透明溶血环。实验鉴定：血浆凝固酶实验，甘露醇发酵实验，耐热核酸酶实验，肠毒素测定，SPA检测。致病性葡萄球菌菌落周边有透明溶血环，血浆凝固酶实验阳性，甘露醇发酵实验阳性，耐热核酸酶实验阳性，SPA检测有A蛋白的存在。二、 链球菌：1致病因素：M蛋白；脂磷壁酸；透明质酸酶
3、；链激酶；链道酶；链球菌溶血素；致热外毒素。2 临床意义：A群： 化脓性炎症；猩红热；风湿热；急性肾小球肾炎；II III 肺炎链球菌：大叶性肺炎；中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎、心内膜炎。3 鉴定：形态。 培养+血清等，血琼脂-灰白色，半透明或不透明表面光滑小菌落；肺炎链球菌48h呈脐窝状。 几中链球菌特性：A群：血平板溶血; 杆菌肽-敏感B群：血平板溶血; 杆菌肽-耐药；CAMP+；胆汗七叶苷（）；马尿酸水解实验（+）草绿色链球菌：血平板溶血；optochin耐药；胆汗七叶苷（）；肺炎链球菌：血平板溶血；optochin敏感，菊糠分解（+），胆汗溶菌（+），荚膜肿胀实验（+） 三、 大肠埃
4、希菌1 致病因素： 侵袭力（K抗原和菌毛）；内毒素；肠毒素（LT，ST）2 临床意义：肠道外感染（泌尿系统感染为主，腹膜炎，胆道感染，肺炎等； 肠道感染：EHEC、ETEC、EPEC、EIEC、EaggEC3 鉴定：一般平板（湿润、光滑、灰白中档大小菌落）有便毛，有动力，葡萄糖发酵（+）， 硝酸盐还原（+）， 氧化酶（），触酶（+）中国兰平板（蓝色），伊红美蓝（紫黑色）,麦康凯和SS（红色）四、 志贺菌属1 致病因素：侵袭力（菌毛）；内毒素；外毒素（志贺毒素ST，也称Vero）2 临床意义：1 ）急性细菌性痢疾：腹痛腹泻 脓血粘液便，里急后重，发热，便中带血，粘液和WBC； 中毒性菌痢多见于小
5、儿，2）慢性细菌性痢疾；3）携带者3 鉴定：葡萄糖发酵（+）， 硝酸盐还原（+）， 氧化酶（），触酶（-） 接种SS和麦康凯平板，分离出无色、透明的小菌落为可疑志贺菌。血清学鉴定。5.简述对疑似痢疾患者进行病原学诊断的常规及迅速措施。 答：常规鉴定：初步鉴定最后鉴别鉴别实验血清学鉴定非典型菌株可用传代法及毒力实验进行鉴定。 迅速诊断：直接凝集免疫荧光菌球法协同凝集实验乳胶凝集实验分子生物学措施五、 沙门菌属1 致病因素 侵袭力（Vi抗原），内毒素，肠毒素。2 临床意义 胃肠炎（食物中毒）；菌血症和败血症；肠热症（伤寒副伤寒）3 鉴定：接种SS和麦康凯平板，分离出无色、透明的小菌落为可疑沙门氏菌
6、，需进一步生化反映鉴定，3）如何根据O抗体和H抗体的变化特点判断肥达实验的成果？答：若O、H凝集效价均超过正常值，则肠热症的也许性大，若两者均低，肠热症的也许性小，若O不高H高，也许避免接种或非特异性回忆反映，若O高H不高，则也许感染初期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反映的其她沙门菌感染。4）对肠热症患者进行微生物学检查时标本采集应注意什么？答:根据不同的疾病、不同的病程取不同的标本。肠热症第1、2周取外周血，第2、3周取粪便、尿液，全程可取骨髓分离培养细菌。六、 铜绿假单胞菌其生物学特性重要有4不生长，而42生长。在血琼脂、麦康凯培养基上均可形成5种不同形态的菌落，在一般培养基上可产生多种色素。
7、鉴定：革兰阴性杆菌，葡萄糖氧化发酵（氧化型），动力阳性，氧化酶（+），触酶（+），专性需氧，营养规定不高，麦康凯上生物良好，初始分离培养基特性性菌落（扩展性，平坦，具有锯齿边沿，金属性光泽，产生蓝绿色色素，玉米面气味）42度长，4度不长。七、 嗜血杆菌简述流感嗜血杆菌的生物学特点.答：革兰阴性短小球杆菌，无芽胞、无鞭毛、不能运动，多数菌有荚膜。需氧或兼性厌氧最适生长温度35，最佳培养基是巧克力琼脂。临床意义：脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎，鼻窦炎，中耳炎鉴定：培养特性，5-10% CO2 ，X因子，V因子；血琼脂：卫星现象；巧克力平板，露滴状菌落。 八 、 霍乱弧菌霍乱患者为什么会浮现剧烈腹泻
8、及严重脱水的症状？答：霍乱弧菌可产生致泻性极强的霍乱肠毒素，该毒素由1个A亚单位和5个相似的B亚单位构成，B亚单位使毒素分子与真核细胞上的受体结合，A亚单位具有酶活性功能。A亚单位进入细胞后，激活腺苷环化酶，令胞内cAMP水平增高，导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔，同步钠的吸取减少，导致严重的腹泻和呕吐. 九 白喉棒状杆菌简述白喉棒状杆菌的致病过程。答：白喉棒状杆菌存在于白喉患者的喉头气管及鼻腔粘膜，有时皮肤、结膜等部位也可见到。传染源为患者及带菌者，细菌多随飞沫或污染的物品传播，感染后白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素，引起局部炎症和全身中毒症状。白喉杆菌在侵犯局部
9、增殖，产生外毒素致病2简述白喉杆菌体外毒力实验的原理、措施及成果判断。答：琼脂平板毒力实验。将具有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中，每只平皿10ml，50冷却，在凝固之前，将浸有白喉抗毒素血清稀释液的滤纸条沉于琼脂内，制成平板(Elek平板)。在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种，划线宽度约6-7mm，两端与皿壁连接。同步，与之相距10mm处平行划线接种一原则产毒菌株，作为阳性对照。37培养24-48小时，若菌苔两侧浮现斜向外延伸的乳白色沉淀线，并与其邻近的原则产毒株的沉淀线相吻合，则为产毒株。SPA协同凝集实验：将白喉抗毒素IgG先吸附在SPA上，再加入待检菌培养物上清液。若有白喉外毒素
10、，则与SPA-IgG结合浮现可见的凝集反映。对流电泳：将已知的白喉抗毒素和待检菌培养液分置琼脂板两孔之中，电泳30min后，若两孔之间浮现白色沉淀线，表白待检菌为产毒株。鉴定：革兰染色阳性，有明显的异染颗粒的杆菌，无荚膜，无鞭毛，菌体长短不一，直或微弯，一端或两端膨大，排列呈V，L等文字形，。亚碲酸钾血培养出黑色菌落，有或无狭窄B溶血，菌落灰白色，隆起，湿润。 九 结核杆菌.致病机制：1 荚膜。2脂质：涉及索状因子，磷脂，硫酸脑苷脂，蜡质D。3蛋白质 与蜡质D结合使机体产生超敏反映，引起组织坏死和全身中毒症状。2. 结核分枝杆菌细胞壁中脂质含量高，这一特点有何意义？答：结核分枝杆菌胞壁含脂质多
11、，与其染色性、抵御力、生长速度及致病性等特性有密切关系，脂质中的分枝菌酸使其具有抗酸性；细胞壁含大量脂质，可避免菌体内水分的丢失，故对干燥的抵御力特别强；同步影响营养物质的吸取，故生长缓慢，且脂质中的磷脂、索状因子、蜡质D、硫酸脑苷脂等毒性成分以不同机制致病。3简述从标本中检查结核分枝杆菌的措施。答：1显微镜检查 (1)直接涂片染色镜检：是一种临床常用的简易迅速的检查措施。直接涂片法是用接种环取病人痰液中浓厚部分或离心沉淀(3000rmin，20min)的尿沉淀物23接种环涂片，涂片要厚。经自然于燥和火焰固定后进行齐-尼抗酸染色，或作金胺“o”荧光染色。前法用油镜检查，后法用荧光显微镜高倍镜检
12、查。镜检时应仔细查遍整个涂片或观测至少100个视野。结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色，其他细菌和细胞为蓝色。经荧光染色的结核分枝杆菌，在黑色背景中呈亮黄色。涂片镜检成果应报告“找到抗酸性杆菌或“未找到抗酸性杆菌”，而不能报告“找到结核分枝杆菌”。 (2)浓缩集菌涂片检查法：如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌，应采用浓缩集菌涂片检查法，以提高结核杆菌的检出率。所谓浓缩集菌涂片即为将采集标本离心，取沉淀涂片，或是采用漂浮集菌法，集菌后标本经反复多次使涂层加厚，一般取34个接种环，涂抹面积大概直径在15mm即可，干燥固定后染色镜检。2核酸检测 用PCR法迅速诊断结核分枝杆菌感染。设计结核分枝杆菌特异rRN
13、A片段的引物进行扩增，然后用结核分枝杆菌rRNA序列特异的DNA探针与之杂交。PCR技术的特异性与敏感性均不小于95。3抗PPDIgG的检测 用ELlSA法检测患者血清中抗PPDIgG，可作为活动性结核分枝杆菌感染的迅速诊断措施之一。肺结核病人的血清阳性率为8090。4简述抗酸染色的环节及成果，并举出两种抗酸菌。答：初染：石炭酸复红加温染5min脱色：3%的盐酸酒精脱色1min复染：美兰染1min成果：抗酸菌为红色，非抗酸菌为蓝色。结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌均为抗酸菌5一患者怀疑患有肺结核，如何进行微生物学检查？（涉及标本采集至报告成果的全过程，检查措施应有老式措施和迅速检查措施。）答：1）标
14、本采集：根据感染部位不同，采集不同的标本。 2）标本直接检查：显微镜检查核酸检测抗PPDIgG的检测。 3）分离培养与鉴定 4）药物敏感性实验 5）免疫学诊断6）动物接种梅毒螺旋体获得性梅毒（TP）:一期：硬下疳；二期：梅毒疹；三期皮肤黏膜溃疡，内脏器官肉芽肿。标本直接检测1、 暗视野显微镜检查2、免疫荧光染色3、镀银染色法4、核酸检测。抗体检测1、 性病研究实验室实验(VDRL)2、迅速血浆反映素环状卡实验（RRR）3、甲苯胺红不加热血清实验（TRUST）2、 荧光梅毒螺旋抗体吸取实验FTA-ABS； 荧光梅毒螺旋抗体双染色实验FTA-ABS-DS ; 抗梅毒螺旋抗体的微量血凝检测 MHA-
15、TP ; 抗梅毒螺旋抗体明姣颗粒凝集实验TPPA; ELISA 1.比较支原体与细菌L型的重要区别。（表格自制）【生物学性状与致病性 -细菌L型 -支原体】-培养特性-需要高渗-需要胆固醇 菌落-油煎蛋状，0.5-1mm-油煎蛋状，0.1-0.3mm形态-高度多形态性-高度多形态性大小-大小为0.6-1.0m-大小为0.2-0.3m细胞膜-不含固醇-含高浓度固醇细胞-缺少或无-无细胞壁缺失的因素-青霉素、溶菌酶和胆汁等作用所致，清除条件可恢复-遗传通过滤器-能通过滤器-能通过滤器对青霉素的作用-抵御-抵御液体培养-有一定混浊度，可附壁-混浊度极低致病性-引起慢性感染，如骨髓炎、尿路感染和心内膜炎等-原发性非典型性肺炎，泌尿生殖道感染和条件致病1.简述衣原体独特
